VP-16诱导细胞凋亡及其细胞核基质中热休克蛋白表达的研究

目的　研究VP 16诱导HL 6 0细胞凋亡的变化特点以及凋亡细胞及核基质中热休克蛋白 (HSP)表达的变化。　方法　琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞基因组DNA断裂 ;TUNEL法观察凋亡细胞的形态学变化 ;用免疫印迹方法显示凋亡细胞核基质蛋白、细胞总蛋白中HSP表达的差异。　结果　VP 16作用HL 6 0细胞 0 5h出现早期凋亡特征。作用 4h可见明显的DNA梯状条带。与未凋亡的细胞比较 ,凋亡细胞核基质蛋白中HSP70和HSC70表达明显上调 ;VP 16作用 2、3及 4h细胞总蛋白中HSP70的表达随时间延长略显增加 ;诱导 2 2h比诱导 4h时去除VP 16后孵至 2 2h凋亡细胞总蛋白HSP70表达量增强了 3 4倍。　结论　 1 HL 6 0细胞早期凋亡形态出现在DNA梯状条带形成之前。 2 凋亡细胞核基质中HSP70、HSC70的表达明显增加 ,经 2、3及 4h作用的细胞总蛋白中HSP70表达差异不显著。这提示细胞凋亡后HSP70的活性位点主要位于核基质上。 3 VP 16作用细胞时间增长至2 2h ,HSP的保护作用可能消失     

现代高新生物技术在食品检验中的应用

在兽医领域,有许多致病菌可引起严重的人畜共患病,同时,其中一些还是当今世界引起食物中毒的病原体,因而在公共卫生上具有重要意义。近年来,随着我国国民经济的发展,肉食品的消费量增加,随之而来的因肉食品所引起的食物中毒病例也不断增加,这严重地威胁着人民身体健康。但是,目前我国肉食品中致病菌的检验普遍采用传统的细菌学检验方法(如:细菌分离培养     

络合Ca~(2+)对山羊膀胱经经穴氧分压的影响

目的:探讨Ca2+和组织氧分压与经络现象之间的联系。方法:波尔杂交母山羊10只,用盐酸氯丙嗪(0.85 mg/kg)镇静后,采用乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2200μL,0.05 kg/mol)络合穴区局部组织Ca2+,用新型组织氧分压传感针检测山羊膀胱经经穴"肝俞""大肠俞""关元俞"及旁开非经穴处氧分压的变化趋势。结果:1)膀胱经经穴的Ca2+电位明显高于旁开对照点(P<0.05,0.01);2)膀胱经经穴的组织氧分压高于旁开对照点(P<0.01);3)注射EDTA-Na2后,经穴的氧分压较注射前及注射生理盐水均明显升高(P<0.01),且经穴的氧分压高于旁开对照点(P<0.01)。结论:膀胱经穴Ca2+电位明显高于各自旁开对照点;注射EDTA-Na2络合Ca2+后氧分压明显升高。     

铜抗氧自由基作用的研究进展

铜是人类和动物机体必需的微量元素之一。铜不仅参与动物体内蛋白质、氨基酸、核酸、脂肪、碳水化合物、维生素等营养物质的代谢 ,而且还在骨骼发育、生殖、免疫、凝血、生物膜稳定等生理机能中担负着重要作用[1] 。其中 ,铜在自由基代谢中的作用是近年来国内外学者十分关注的课题 ,进行了广泛而深入的探讨 ,取得了丰硕的成果。1　氧自由基及其产生机制自由基 (Free Radical,FR)是指带有不成对电子的分子、原子、原子团或离子 [2 ]。生物体内产生的自由基主要是氧自由基 (Oxygen Free Radicals,OFR) ,约占机体内全部自由基的 95 %。这是…     

小型猪微卫星标记多重PCR体系的建立与应用

目的 建立实验用小型猪微卫星标记的多重PCR体系和进行实验猪群的遗传监测. 方法利用3种不同荧光标记的微卫星引物结合ABI3700 遗传分析仪测序的方法,通过筛选和优化反应条件,建立可用于实验用小型猪遗传质量控制的稳定的多重PCR反应体系.在此基础上进一步检测实验用小型猪近交群体的遗传变异以验证建立体系的效率.结果 筛选出了2组理想的组合:组合1包括SW742、S0228和S0218座位,复性温度58℃和56℃;组合2包括S0155、SW902和S0227三个座位,复性温度为60℃和58℃.组合内不同座位标记不同的荧光染料.还以此检测了实验用小型猪群体中的遗传变异.结论 初步建立了中国三种实验用小型猪微卫星标记检测的多重PCR体系, 为快速、大通量、准确的小型猪遗传监测提供了初步的技术基础.     

腺病毒载体及其在狂犬病疫苗研究中的应用

疫苗是目前人类可以彻底控制某一传染性疾病的唯一武器,预防接种不但保护了个体免受传染病病原体的侵袭,而且在群体中也限制了病原微生物的传播.     

细胞培养法检测和分离狂犬病街毒的可行性研究

目的 研究MNA细胞培养法检测和分离狂犬病街毒的可行性.方法 用MNA细胞培养法、荧光抗体实验(FAT)和双抗体夹心ELISA方法分别检测33份狂犬病街毒样品、20份狂犬病毒阴性犬脑样品和4份正常鼠脑样品.结果 MNA细胞培养法检测57份待检样品,培养48 h的实验结果显示,33份狂犬病街毒样品均为阳性,狂犬病毒阴性犬脑样品和正常鼠脑样品均为阴性,与FAT、双抗体夹心ELISA方法的检测结果完全一致.结论 MNA细胞培养法对样品中狂犬病街毒的检测具有较高的灵敏度和特异性,可用于狂犬病街毒的检测和分离.     

对开展饲料毒理学研究的浅见

对开展饲料毒理学研究的浅见于炎湖（华中农业大学畜牧兽医学院，武汉４３００７０）本文阐述了根据我国当前饲料工业和畜牧业生产实际开展饲料毒理学研究的意见．首先，要结合我国《饲料卫生标准》修订工作，对我国现行饲料卫生标准中尚未列入急需项目开展毒理学研究，为...     

肉品卫生快速检疫检验技术的研究及推广应用

随着我国畜牧业商品经济的发展和广大人民物质生活水平的提高,广大消费者对肉品卫生质量的要求也越来越高,以单一的感官检查的方法进行肉品卫生检验与监测,已不能适应当前市场经济发展的要求。针对当前市场管理中仍有规范不严,肉品交易中存在着以病害肉、劣质肉充当健康良质肉出     

DNA纤维上的原位杂交技术

DNA纤维上的荧光原位杂交(Fiber-FISH)技术是一种非常重要的分子细胞遗传学技术。对于高分辨物理图的绘制、基因组和染色体结构的研究、致病基因的定位克隆等都有很大作用,本文介绍了该技术的基本操作和应用,以及与引物原位DNA合成(PRINS)等技术相结合进行更精确基因定位的潜力。