粉剂麻疹疫苗的气溶胶接种

为建立一种安全和具有较好费用 -效益的疫苗接种技术 ,作者将三种市售麻疹减毒活疫苗微粒化后 ,进行了粉剂气溶胶接种的可行性研究。与其他微粒化方法相比 ,该研究中采用压缩氮为气流的喷射粉碎在制备疫苗微粒时产热很少。应用电镜扫描、激光衍射、差示扫描量热计、热重分析、水份吸附性分析和蚀斑形成试验等对粉碎后疫苗的物理特性和病毒效力进行了检测。　　电镜观察显示 ,微粒化前的疫苗由许多大小不均、形态不规则的片状物组成 ( 1 0～4 0 0 μm) ,而微粒化的疫苗则表现出在形态和大小上的均一性 ( <1 0μm)。激光衍射分析也表明绝大多…     

抗JEV质粒DNA免疫:膜锚定和分泌性包膜蛋白的免疫原性

乙型脑炎病毒 ( JEV)包膜 ( E)蛋白能刺激机体产生抗病毒中和抗体。作者用聚合酶链反应法扩增 JEV GP78株的前膜 ( pr M)和 E蛋白区基因并克隆于 p CEP4真核表达载体 ,得到 p MEa(能合成 pr M和膜锚定 E蛋白 ,Ea)和 p MEs(能合成 pr M和分泌性蛋白 ,Es)两种质粒 DNA。为研究其免疫原性并与市售JEV灭活疫苗作比较 ,作者对 BALB/c小鼠进行了免疫和加强免疫 ( 50 μg质粒 DNA或空白载体肌注、1μg质粒 DNA基因枪皮肤注射、1 /1 0人用剂量的 JEV灭活疫苗接种 )。免疫后 7周用致死量 JEV( 2 0 L D50 )进行脑内攻击。攻击前用 …     

抗狂犬病病毒中和活性单克隆抗体对狂犬病街毒暴露后的治疗

目的 研究鼠抗狂犬病病毒中和活性单克隆抗体(单抗)2C、5C,对狂犬病街毒暴露后的治疗效果.方法 用3个街毒代表株CQ92、HN06、GX-4分别感染Balb/c小鼠腓肠肌,30rain后用2C、5C、狂犬病人免疫球蛋白(Hu-man Rabies Immunoglobulin,HRIG)进行治疗.结果 2C、5C、HRIG对狂犬病街毒暴露后小鼠具有相近的保护率.结论 鼠抗狂犬病病毒中和活性单抗可用于狂犬病病毒暴露后的治疗.     

RFFIT和MNT检测狂犬病毒中和抗体的比较研究

目的 对RFFIT和MNT两种方法检测抗狂犬病毒中和抗体的相关性,敏感性和重复性进行比较.方法 用MNT和RFFIT两种方法来检测已免疫的人血清52份,未免疫的人血清40份.结果 显示这两种方法检测已免疫血清的一致性是88.5%,其相关性是r=0.886,MNT的敏感性和特异性分别是84.9%,100%,RFFIT的灵敏度和特异性分别是100%,89.0%.MNT和RFFIT重复检测一个样品的变异系数(CV)分别是62.3%、13.3%.结论 RFFIT与MNT的相关性较好,RFFIT的灵敏度和重复性均比MNT好,因此,RFFIT在大多数需要检测RV中和抗体的情况下可替代MNT.     

确定单一的疫苗质量标准

在认识到制造商对其所生产的疫苗质量负责的同时 ,世界卫生组织 (WHO)提出了“保证质量的疫苗”的定义。保证质量的疫苗的定义是通过独立的评审系统评定 ,疫苗在纯度、效价、安全性和有效性方面符合适当的标准。此评审系统应利用全部已有的资料 ,如批准的资料、现场实施的监督、逐批复查、适合的实验室检测、企业的 c GMP检查和临床试验评价 ,这些工作一般由职能管理当局承担。定义还指出了通过加强国家管理当局工作来提高疫苗质量的途径。坚持有效的管理监督 ,同时认识到在选择疫苗使用时风险分析的作用 ,WHO特别重申了单一质量标准的必要性。根据对特定人群的风险 /效益权衡 ,只有保证质量的疫苗可考虑用于国家免疫规划     

登革热疫苗的前景

本文介绍了登革热的流行病学、发病机理以及登革热疫苗的研制状况和未来发展方向     

斑点杂交法测定Vero细胞DNA残留量的探针选择

目的：为精确检测以Vero细胞为基质的生物制品中宿主细胞残余DNA含量。方法：将提取的Vero细胞DNA分别用不同时间的超声波和HindⅢ内切酶进行断链处理，电泳和序列分析并确定DNA片段长度，地高辛标记后制备成检测探针，测定已知的不同浓度的样品DNA和疫苗中DNA残留量。结果：HindⅢ内切酶处理断链后产生172bp、344bp、516bp、688bp不同长度的DNA，并选取172bp长度的DNA片断和超声波处理30s的DNA长度为500～750bp的DNA片断作为检测用探针。结论：两种方法处理的DNA探针检测DNA的灵敏度可达0．1pg，重复性均较好，超声波处理的探针特异性优于酶切探针，并能成功的应用于疫苗产品中残余宿主细胞DNA的检测。     

我国各地区动物狂犬病街毒的检测及分析

目的 检测我国不同地区动物中狂犬病毒带毒率并分析糖蛋白编码基因序列.方法 El.ISA、免疫荧光法分别检测586份采集自中国不同地区的犬、猫,蝙蝠和野鼠脑标本和16份犬唾液中狂犬病街毒,阳性标本乳鼠颅内接种.并测序.结果 ELISA、免疫荧光法均在犬脑中分离到10株狂犬病街毒,其中贵州省113份犬脑中分离到2株病毒,湖南省62份犬脑中分离到2株病毒,武汉市70份犬脑中分离到2株病毒,江苏省85份犬脑中分离到4株病毒,沈阳市69份犬脑中未分离到狂犬病毒;79份猫脑、100份蝙蝠脑及8份鼠脑中未检出狂犬病街毒,16份犬唾液标本未检出狂犬病毒.在贵州省和武汉市,冬季采集的112份犬脑末检出狂犬病毒.春夏季采集的40份犬脑中,4份阳性.分离的10株狂犬病毒阳性株颅内接种乳鼠后.均发病死亡.所有分离株均属狂犬病毒基因1型,可分为4个亚组.结论 同一地区的狂犬病毒分离株以及相邻省份的狂犬病毒分离株的同源性十分接近,动物样本采集时间与狂犬病毒阳检率有关.     

狂犬病病毒CTN-1v株原子力显微镜观察结果的初步分析

目的 利用原子力显微镜对狂犬病病毒进行观察.方法 超速离心制备狂犬病病毒CTN-1v株,采用磷钨酸负染透射电子显微镜进行观察,在此基础上进行原子力显微镜观察,采用轻敲模式在大气常温下扫描成像.结果 透射电子显微镜观察到狂犬病病毒的典型弹状病毒粒子,透射电镜提供病毒二维图像,可见刺突结构,原子力显微镜则呈现了狂犬病病毒三维图像,且可见病毒表面有凹凸不平的特征和边缘有齿轮状的突起,同时获得表面粗糙度等可以量化指标.两种方法最终得到相似的形态学结果.结论 利用原子力显微镜首次观察到狂犬病病毒的三维形态结构,与透射电镜观察相比,原子力显微镜是一种制样简单、观察直观的新型病毒形态学研究工具.

Abstract：

Objective To explore the application of atomic force microscopy( AFM ) on the research of morphology of the rabies viruses. Methods To prepare the rabies virus CTN-1v strains by ultracentrifugation, and observe it with transmission electron microscopy (TEM) which negatively stained by phosphotungstic acid. Then study the morphology of rabies virus with AFM based on the result of TEM. AFM image applies the tapping mode to rabies virus without any further treatment in air at room temperature. Results The TEM image is two-dimensional image which can be seen the classical bullet-shaped structure,and the spike structure can also be seen. The AFM image showed the rabies virus morphology with three-dimensional image which can shows the characteristics of the virus surface and edge. The rabies virus particle was successfully observed by TEM or AFM methods. Conclusion It's the first time to get the three-dimensional morphological structure of rabies virus by atomic force microscopy, compared with transmission electron microscopy, AFM is a new research tool for viral morphology study with the advantages of simple sample preparing and intuitionistic and visible interface for researchers.