恒温核酸扩增方法的建立及其扩增产物的鉴定

目的建立一种快速、简便的恒温核酸扩增（ＮＡＳＢＡ）方法。方法用由ＡＭＶＲＴａｓｅ、ＲＮａｓｅＨ、Ｔ７ＲＮＡ聚合酶以及相应的缓冲成分组成的恒温扩增系统，对４例丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）Ｅ区ＲＮＡ序列进行扩增，并通过Ｎｏｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交及限制性内切酶对扩增产物进行鉴定。结果经９０分钟或１８０分钟反应后均可扩增出预期大小的产物，放射自显影在预期位置出现阳性杂交信号。扩增产物经聚合酶链反应（ＰＣＲ）及内切酶ＳｍａⅠ消化后产生预期大小的１４４ｂｐ和３５９ｂｐ的片段，第１次ＰＣＲ产物经转录实验后与ＮＡＳＢＡ直接扩增的产物具有较好的同源性。结论ＮＡＳＢＡ法是一种快速简便的核酸扩增方法，此法扩增出的产物具有良好的特异性。     

MAGE-4基因在肝细胞肝癌中的表达及临床意义

目的通过研究MAGE-4基因在肝细胞肝癌组织中的表达,并与患者临床资料进行分析,探讨 MAGE-4基因与肝细胞肝癌(HCC)患者临床指标及转移与复发的关系,为MAGE-4基因编码蛋白用于HCC患者免疫治疗提供依据. 方法用RT-PCR的方法对31例HCC患者癌组织及相应癌旁组织MAGE-4基因表达进行测定,对全部RT-PCR扩增产物中目的基因片段进行DNA测序以证实其为 MAGE-4基因,患者均测定并统计AFP、AFU、抗HCV、HBsAg、AFP mRNA、肿瘤直径等临床指标. 结果 31例HCC患者肝癌组织中MAGE-4基因表达的阳性率38.7% (12/31)明显高于癌旁组织中MAGE-4基因表达的阳性率0% (0/31),P＜0.01.HCC患者肝癌组织中MAGE-4基因表达的阳性率与患者AFP、AFU、抗HCV、HBV标志物、AFP mRNA、肿瘤直径等临床指标均无关,P＞0.05. 结论 MAGE-4基因在HCC患者肝癌组织中特异高表达,可能作为HCC患者免疫治疗攻击的靶点,HCC患者肝癌组织中 MAGE-4基因表达的阳性率与HCC患者肿瘤标志物、转移、复发均无关.     

检测乙型肝炎患者体液中的HBV DNA与HBV标志物及其意义

乙型肝炎病毒(HBV)是肠道外传播的致肝炎因子,在我国有较高的感染率,经血源途径传染被认为是其最主要的传播途径。然而在HBV感染者的体液中亦可检测出HBV标志物(HBVM),提示日常生活接触可能是HBV传播的另一途径。为此本研究检测了40例乙型肝炎患者唾液、尿液和泪液中HBV DNA及其它HBV标志物,并对其意义进行探讨。     

逆转录双PCR法检测340例慢性肝病患者HCV感染及与HBV感染的关系

本文采用逆转录双PCR法对340不例同慢性肝病患者中的抗—HCV阳性血清进行HCV—RNA检测,66例抗HCV阳性血清检出55例HCV—RNA阳性,HCV—RNA阳性率为16.18％(55/340),在慢迁肝、慢活肝、肝硬化、慢重肝及肝细胞癌中HCV—RNA阳性率分别为10.98％(18/164)、20.59％(7/34)、36.67％(11/30),33.33％(1/3)及16.51％(18/109)。HCV感染在慢性肝病中主要是以与HBV合并感染形式存在,为10.88％(37/340),单一HCV感染仅为5.29％(18/340),结果提示HCV感染可加重慢性乙型肝炎的肝损害,促进病情向重症化发展,而其在肝细胞癌中的意义有待进一步研究。     

国产Bio—dUTP和35SdATP标记HBV DNA探针用于分子杂交初步报告

生物素(Bio)探针用于分子杂交于1983年Leary等已有报告。目前,BRL公司有试剂供应,但在国内尚未广泛应用。本所用国产Bio—dUTP,~(35)SdATP标记探针用于分子杂交,并与BRL Bio—DNA试剂盒和~3H、~(32)P探针杂交进行比较,现将初步试验结果     

丙型肝炎病毒基因型研究进展——基因型的检测,命名及分布

丙型肝炎病毒基因型研究进展──基因型的检测、命名及分布陈红松综述王宇审校ＨＣＶ属黄病毒科，是单股正链ＲＮＡ病毒，基因组全长９４００左右个核苷酸（ｎｔ），它的中部是一个能够编码３０１０～３０３３个氨基酸的大开放读码框架（ＯＲＦ），其编码的病毒前体多肽分...     

超声引导肝脏细针组织学活检75例总结

超声引导肝脏细针组织学活检７５例总结北京医科大学肝病研究所（１０００３４）孙焱，王豪，张兰芳，高燕，陶其敏北京医科大学人民医院董建强日本自治医科大学临床病理学教室伊东一，谷口信行近年来介入性超声得到迅速发展及完善，为临床疾病的诊治提供了可靠的依据［１...     

白细胞介素-2基因对丙型肝炎病毒E2基因免疫效果的调节作用

目的 研究白细胞介素２（ＩＬ－２）基因对丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）Ｅ２基因免疫小鼠后效果的调节作用。方法 构建Ⅱ型ＨＣＶ Ｅ２基因的真核表达载体ｐ３Ｅ２，免疫组化法检测其在哺乳动物细胞中的表达情况。用ｐ３Ｅ２单独或连同ＩＬ－２真核表达质粒一起对ＢＡＬＢ／ｓ小鼠进行尾部皮下注射，酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）法检测Ｅ２抗体的产生情况。结果 Ｅ２蛋白在哺乳动物细胞中得到瞬时表达。应用ｐ３Ｅ２单独或连同ＩＬ     

固相夹心法测定HBV感染者血清中HBsAg聚白蛋白受体

本文使用固相夹心法检测HBV感染者血清中HBsAg聚白蛋白受体。文章对该方法的特异性、敏感性、重复性进行了考察。使用该法对正常人、HBeAg阳性、抗-HBe阳性及其他疾病共220份血清进行检测,除HBeAg阳性组P/N>2.1(2.8～29.1)为阳性外,其它组P/N值均为阴性。     

DNA分子杂交检测肝癌病人血清及其肝组织中HBVDNA的应用研究

本文采用目前国内较先进的DNA分子杂交技术,使用~(32)P探针检测92例肝癌病人血清、92例对照病人血清及4例肝癌病人肝组织中的HBVDNA,从分子水平来探讨肝炎与肝癌的关系.肝癌病人血清中HBVDNA的检出率为23.91%,对照病人血清仅4.35%,两组比较P<0.01,差异显著.4例肝组织中HBVDNA检出1例.HBVDNA在肝癌病人血清和肝组织中检出,证明HBVDNA已整合于病人肝细胞中,HBV感染作为肝癌病因之一更加明朗.