用于HIV感染早期监测及发病率调查的实验室检测技术——STARHS检测法

艾滋病是由人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的一种免疫缺陷性疾病，目前尚无法治愈，也无有效疫苗可预防。HIV感染的诊断，特别是早期感染的诊断是艾滋病预防控制工作的重要组成部分。近年来在美国发展了一种对HIV抗体检测的酶联免疫试验(EIA)加以改良的方法——serologic testing algorithm for recent HIV seroconversion(STARHS)，该方法可以判断HIV感染者是否为早期感染。     

不同人类免疫缺陷病毒2型检测方法的比较研究

目的通过随访调查16例人类免疫缺陷病毒2型（HIV-2）可疑感染者，初步评价HIV一2的几种检测方法。方法从贵州省采集既往经HIV-1／2免疫印迹（WB）试验检测出现HIV-2指示带的16份受检者的全血样品，进行HIV-2抗体和核酸检测。血浆中的抗体用HIV-1／2ELISA初筛一复检，其中阳性样品再分别用HIV-1／2线性免疫试验（LIA）和HIV-2WB检测。外周血单核细胞（PBMC）中的前病毒DNA用HIV-2巢式PCR检测。结果16份血浆样品经HIV-1／2ELISA筛查均为HIV抗体阳性；用HIV-1／2 LIA检测，全部为HIV-1抗体阳性，15份为HIV-2抗体阴性、1份不确定；用HIV-2WB检测，有3份为HIV-2抗体阳性、13份不确定。由于这批样品的采样时间距首次检测至少1年以上，可以排除窗口期感染，上述检测结果不确定的受检者均可判为HIV-2抗体阴性。此外，用巢式PCR检测所有PBMC样品均为HIV一2核酸阴性。结论16例受检者全部为HIV-1而非HIV-2感染，HIV-1／2uA的抗体检测结果与HIV-2核酸检测结果基本相符，而HIV-2WB则产生了大量的不确定甚至假阳性结果。     

HIV集合核酸检测在男男性行为人群中的应用评价

目的 评估集合核酸检测方法在男男性行为人群(MSM)中的应用,探索适合该人群的HIV早期感染检测策略及应用该方法估算新发感染率的可行性.方法 本研究共采集4 856份2008年4月至2009 年9月我国黑龙江省(4 156份样品)和北京市(700份样品)MSM人群的样品.分别经三代ELISA、四代ELISA和WB检测后,HIV阴性样品进行集合核酸检测.样品集合采用三级集合策略.并计算和比较"三代ELISA检测+WB"、"四代ELISA检测+WB"、"三代ELISA检测+WB+集合核酸检测"和"四代ELISA检测+WB+集合核酸检测"的HIV检测阳性率.4 156份黑龙江省MSM人群样品中符合条件的WB确认阳性样品纳入BED-捕获酶联试验 (BED-CEIA),并应用BED方法和集合核酸检测方法进行新发感染率估算.结果 4 856份样品中共有143份被判定为HIV阳性,其中经三代和四代ELISA检测为阳性的样品均为130份,窗口期感染样品13份.常规ELISA检测加核酸检测能最有效检测出MSM人群窗口期感染者;4种检测策略的HIV检测阳性率分别为:2.68%(95%CI 为2.22%～3.14%)、2.82%(95%CI 为2.35%～3.29%)、2.94%(95%CI 为2.46%～3.42%)和2.94%(95%CI 为2.46%～3.42%),差异无统计学意义(χ2=0.854 3,P=0.836 4).4 156份黑龙江省样品中有88份纳入BED检测,41份样品被判为新近感染.应用BED检测方法和集合核酸检测方法估算的HIV发病率分别为2.36%(95%CI 为1.63%～3.08%)和2.92%(95%CI 为1.01%～4.83%).结论 HIV集合核酸检测技术能有效地筛查出窗口期感染者,可用于我国MSM人群窗口期检测.

Abstract：

Objective To evaluate the application of pooling HIV nucleic acid amplification testing (NAAT) among men who had sex with men (MSM) population, and to investigate suitable HIV screening strategy and the feasibility of calculation of HIV incidence using pooling NAAT among MSM population in China.Methods Four thousand eight hundred and fifty-six samples were collected from MSM population from April 2008 to September 2009 among with 4 156 were in Heilongjiang province and 700 were in Beijing in China. After standard testing with an HIV ELISA and WB confirmation testing, HIV antibody-negative samples were pooled and screened for HIV using NAAT.A three-stage pooling strategy was adopted.The HIV positive rate estimated by the four HIV screening strategies was calculated.In addition, 4 156 HIV positive specimens from Heilongjiang province were screened with the BED capture enzyme immunoassay (BED-CEIA).The HIV-1 incidences were estimated by BED-CEIA assay and pooling NAAT individually.ResultsOne hundred and forty-three of 4 856 subjects were HIV infected.130 were 3rd and 4th generation ELISA positive; 13 were antibody-negative but acutely HIV infected.According to the evaluation of four HIV screening strategies, routine HIV screening test together with pooling NAAT was more effective than other strategies for screening out window period generation ELISA+WB+pooling NAAT' were 2.68%(95% confidence interval CI=2.22%-3.14%), 2.82%(95%CI=2.35%-3.29%), 2.94%(95%CI=2.46%-3.42%) and 2.94%(95%CI=2.46%-3.42%), respectively.The differences were not significant (χ2=0.854 3, P=0.836 4).Of the 88 HIV positive samples from Heilongjiang province, 44 participants were tested as recent HIV infections by BED-CEIA assay. The estimated HIV-1 incidence was 2.36% (95%CI=1.63%-3.08%) and 2.92% (95%CI=1.01%-4.83%) based on BED-CEIA assay and pooling NAAT,respectively.Conclusions Pooling NAAT is a effective screening test in HIV negative population to detect window period infection among MSM population in China.     

新生儿HIV1型感染的两种早期诊断方法比较

我国HIV1型(HIV-1)感染的主要途径已从吸毒转变为性途径传播[1],新生儿面临着更大的感染危险.临床实践证明在感染HIV-1的新生儿中及早开展抗病毒治疗可以大大降低病死率和提高生活质量[2].     

新生儿HIV1型感染的两种早期诊断方法比较

我国HIV1型(HIV-1)感染的主要途径已从吸毒转变为性途径传播[1],新生儿面临着更大的感染危险.临床实践证明在感染HIV-1的新生儿中及早开展抗病毒治疗可以大大降低病死率和提高生活质量[2].     

安徽、河南、山西3省自愿咨询检测人群HIV/HCV共感染及HCV基因亚型初步分析

目的了解目前我国安徽、河南、山西3省自愿咨询检测(VCT)人群HIV感染者中HIV/HCV共感染率及HCV亚型的分布情况。方法对来自安徽、河南、山西3省VCT人群中HIV阳性样本进行HCV抗体检测并对HCV阳性的样本进行HCVC/E1区RT-PCR扩增、基因测序,分析HCV的亚型分布。结果在HIV阳性的382份样本中,检出HCV阳性215份,3省VCT人群HIV感染者中HIV/HCV共感染率平均为56.3%,安徽、河南、山西3省分别为50.0%、59.3%、42.9%。其中,经血传播人群的HIV/HCV共感染率为72.1%,经性传播人群为33.3%,其它途径人群为36.6%。HCV PCR扩增成功98份,1b亚型69份(70%),2a亚型28份(29%),3a亚型1份(1%)。结论安徽、河南、山西VCT人群具有较高的HIV/HCV共感染率;经性传播人群HIV/HCV共感染率高于国外水平;HIV/HCV共感染对HCV亚型分布无显著影响。     

新生儿HIV1型感染的两种早期诊断方法比较

我国HIV1型(HIV-1)感染的主要途径已从吸毒转变为性途径传播[1],新生儿面临着更大的感染危险.临床实践证明在感染HIV-1的新生儿中及早开展抗病毒治疗可以大大降低病死率和提高生活质量[2].     

新生儿HIV1型感染的两种早期诊断方法比较

我国HIV1型(HIV-1)感染的主要途径已从吸毒转变为性途径传播[1],新生儿面临着更大的感染危险.临床实践证明在感染HIV-1的新生儿中及早开展抗病毒治疗可以大大降低病死率和提高生活质量[2].     

检测HIV-1新近感染的BED捕获酶免疫实验的重复性和稳定性评价

目的对BED捕获酶免疫实验（BED capture enzyme immunoassay，BED-CEIA）的重复性和稳定性进行评价。方法对在国家艾滋病参比实验室（参比室）和A、B两个艾滋病确证中心实验室，使用BED-CEIA方法对新近感染检测的实验数据进行统计。分别对在参比室和A、B两实验室进行检测的59、35和18块酶标板的质控品（NC、CAL、LPC和HPC）OD和OD-n的Mean、SD和CV进行统计。对3个实验室初筛和确认实验结果的一致性进行比较，得出R^2值。使用同一考核血清盘，将11位不同实验人员的实验结果与参比室实验员的实验结果进行比较，得出R^2值。结果在参比室进行的实验中，对OD-n的统计显示，质控品NC的CV为14．4％，LPC和HPC的CV值约为5％；在A实验室中，LPC和HPC的CV值均控制在10％以内；在B实验室中，LPC和HPC的CV值均控制在12％以内。3个实验室初筛和确认实验结果的R。值均达到了0．90以上。其他实验人员与参比室实验人员的结果实验比较显示，R^2为0．9777，不同实验员之间可重复性强。结论BED-CEIA方法的稳定性和重复性均十分突出，可以在我国接受过专项培训的艾滋病确证中心实验室开展该项工作。     

云南省德宏州HIV-1新近感染者基因型耐药分析

目的 了解云南省德宏州HIV-1新近感染者中耐药的发生情况.方法 收集德宏州2006年7-12月期间所有的HIV-1阳性样品共1048份,使用BED捕获酶免疫试验进行新近感染检测,共检出新近感染样品101份;使用Bayer公司的TruGene方法进行基因型耐药检测,应用所有样品的序列构建系统进化树以确定样品的亚型.结果云南省德宏州HIV.1新近感染者巾的耐药发生率为6.25%(4/64),样品PR区中M36I/V、L63P和H69K等次要耐药突变出现的频率较高,分别占81.25%、70.31%和65.63%;HIV-1流行株以C/CRF07 BC/08_BC为主,占65.63%(42/64).结论德宏州HIV-1新近感染者中耐药的流行处于中等水平;有必要加强HIV-1的耐药监测.