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膀胱移行细胞癌3号染色体短臂上抑癌基因杂合性缺失的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 探讨位于3号染色体短臂的候选抑癌基因FHIT、hMLH和VHL在中国人膀胱移行细胞癌(TCC)发生中的可能作用。方法 选取6个位于上述基因内含子或与上述基因紧密连锁的微卫星多态标记对40例膀胱TCC组织进行杂合性缺失(LOH)分析。结果 位于FHIT基因内含子内的两个微卫星多态标记(D2S1234和D3S1300)中至少有一个为杂合子的杂合率为95.0%(38/40),至少有一个发生LOH的频率为57.8%(22/38)。与hMLH1基因连锁的两处微卫星多态标记(D3S1561和D3S1612)中至少有一个为杂合子的杂合率为55.0%(22/40),至少有一个发生LOH的频率为59.1%(13/22)。与VHL基因连锁的两个微卫星多态标记(D3S1038和D3S1284)中至少有一个为杂合子的杂合率为90.0%(36/40),至少有一个发生LOH的频率为47.2%(17/36)。在所检测微卫星多态标记中仅D3S1284的LOH与膀胱TCC的病理分期正相关(P<0.01),余微卫星多态标记的LOH与膀胱移行细胞癌病理分级及病理分期均不相关(P>0.05)。结论 上述3个基因在膀胱TCC中存在高频率LOH,提示它们可能在膀胱TCC的发生发展中起重要作用。FHIT基因和hMLH1基因的缺失作为分子标志有可能为膀胱TCC的早期诊断提供新的途径和依据,而VHL基因的缺失可能是膀胱TCC发生的晚期事件。 相似文献
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肺癌易感性与p73基因多态性关系的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨中国人群p73基因5’UTR区域两个单核苷酸多态性(G4C14,A4T14)与肺癌的关系。方法采用病例对照研究;选择经组织学确诊的肺癌病例425例,地区、年龄和性别频数匹配的对照588名,以聚合酶链反应-单链构象多态性方法进行多态性检测。结果此两个多态性之间具备完全的连锁不平衡,AT(A4T14)单倍型在病例组显著少于对照组(0.225 vs.0.287.P=0.0018),提示变异的AT单倍型对肺癌具有保护作用。与携带p73 GC/GC单倍型基因型者比较,携带GC/AT单倍型基因型者肺癌风险降低30%(OR=0.70,95%CI:0.53~0.92),而携带AT/AT单倍型基因型者肺癌风险降低55%(OR=0.70,95%CI:0.26~0.80)。结论p73基因多态改变可能与中国汉族人群肺癌遗传易感性有关。 相似文献
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目的本实验旨在构建ECRG4的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化ECRG4所编码的蛋白,为进一步研究奠定基础。方法将ECRG4基因序列前端编码疏水性跨膜区28个氨基酸的cDNA序列截去,再将截短的cDNA序列克隆到原核表达载体Pet30(+)上,重组表达载体转化感受态表达菌株BL21(DE3),低浓度IPTG低温诱导融合蛋白的表达。采用Western blot鉴定目的蛋白的表达,使用Ni-NTA亲和层析柱进行纯化。结果构建了截短的ECRG4.pET30a(+)基因的原核表达载体,IPTG低温诱导得到大量可溶性蛋白,并且通过亲和层析纯化了重组融合蛋白。结论成功获得了高效表达的、具有一定的生物学活性的ECRG4原核表达产物,并为进一步研究ECRG4的结构和功能打下基础。 相似文献
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人食管癌相关基因4在食管癌中的抑癌功能 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨人食管癌相关基因4(ECRG4)在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的抑癌功能及其机制.方法 利用DNA重组技术,构建ECRG4真核表达质粒pcDNA3.1-ECRG4,在ESCC细胞系EC9706细胞中转染表达ECRG4蛋白,检测细胞生长状态、细胞黏附、迁移、侵袭能力和裸鼠成瘤能力的改变.Western印迹检测ECRG4表达诱导P53和P21蛋白表达的变化.结果 ECRG4基因转染组裸鼠成瘤的最后体积和重量分别为(264±43)mm3和(0.39±0.09)g,对照组裸鼠分别为(464±128)mm3和(0.76±0.13)g,差异均有统计学意义(均P<0.05).ECRG4基因转染组肿瘤细胞与基质的黏附性、迁移和侵袭能力均低于对照组,但差异均无统计学意义(均P>0.05).ECRG4基因转染组P53和P21蛋白表达均高于对照组(100.00±3.87和35.71±2.36比16.6±1.92和1.09±0.11,均P<0.05).结论 ECRG4是ESCC的候选抑癌基因,ECRG4可能通过参与P53通路调控P21蛋白表达来发挥其抑癌功能. 相似文献
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反义 HSP70对人乳腺癌细胞的抑瘤效应 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:观察反义热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)RNA对人乳腺癌细胞学特性的影响,探讨其抗肿瘤作用。方法:将逆转录病毒真核表达载体介导的反义HSP70重组质粒pX-AHSP70和空载体pLXSN-neo转染至MCF7/Adr人乳腺癌细胞,通过细胞生长曲线和软琼脂集落实验以及裸鼠移植瘤实验观察转染反义HSP70重组质粒细胞的体内外抑瘤作用。结果:建立了稳定表达反义HSP70 RNA的MAp70细胞,与空载体细胞相比,HSP70蛋白的表达下降了48%。细胞群体生长速度明显减慢,软琼脂集落形成率和抑制率分别为6.08%和62.14%,裸鼠皮下接种的平均出瘤时间为15天,最终平均瘤重为108mg,以上参数与空载体细胞相比,均有显著差异。结论:反义HSP70RNA能够有效地抑制HSP70表达,进而抑制乳腺癌细胞的体外增殖和体内移植瘤的形成与发展。 相似文献
7.
肺癌高死亡率的根本原因在于早期诊断的困难。现代分子肿瘤学的研究进展揭示了在肺支气管上皮癌变过程中发生的多种分子水平异常,使得我们有可能将外周血等容易取得的微创性样品中的分子病理学改变作为肺癌早期诊断的辅助指标。通过以往的研究我们发现,一条等位基因缺失而另一条等位基因异常高甲基化是肺癌组织中抑癌基因p16失活的重要机制之一。在这项研究中,我们利用从非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)病人外周血血浆中提取的DNA分析了P16基因的甲基化状态。采用改进的甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)的方法,95例NSCLC病人的血浆DNA被检测,其中肺鳞癌59例,肺腺癌36例。作为对照,75例相应的肿瘤组织被同时分析。结果显示,p16基因启动子区高甲基化状态的检出率在血浆中为72.6%(69/95),而在相应的肺癌组织中为74.7%(56/75)。值得注意的是,血浆DNAp16基因异常甲基化只是从那些肿瘤组织DNA表现p16基因高甲基化的病例中被检出-二者存在极好的符合率。我们还发现,在Ⅰ期病人中,血浆p16基因异常高甲基化在肺鳞癌(82.4%),比在肺腺癌(33.3%)中要高得多(P<0.005)。从而提示,血浆p16基因异常甲基化有可能成为一项早期发现非小细胞肺癌(尤其是鳞癌)的、非常重要的分子病理学指标。而血浆DNA的MSP则是检测这一指标的敏感、可靠并且便于操作的技术之一,成为一种可以应用于人群筛查的方法。 相似文献
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近日,我国首次艾滋病疫苗Ⅰ期临床研究最后一组15名志愿者,在广西疾病预防控制中心接种了我国自行研制的艾滋病联合疫苗。据悉,这次临床研究共招募49名志愿者并分成8组,前7组已按设计方案全部接种完毕。 相似文献
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目的 在染色体 8p2 1 8p2 2界定发生于中国人肺腺癌的杂合性缺失 (LOH)的最小区域 ,为定位克隆肺腺癌相关抑癌基因提供线索。方法 利用 32例肺腺癌患者肿瘤组织检测位于 8p2 1~p2 2的 17个微卫星多态性标记的LOH频率 ,并且探讨各位点LOH与病理分级和临床分期的关系。结果 在 32例肺腺癌患者组织中有 31例 (96 6 7% )存在至少 1个位点的LOH ;主要集中于 3个区域 :位于 8p2 2的D8S2 5 4~ 2 6 1、D8S182 7~ 1731以及D8S1135。所检测位点中仅D8S2 6 1位点的LOH发生频率与肺腺癌分期呈正相关 (P <0 0 5 )。结论 8p2 2区域可能存在位于D8S2 5 4~ 2 6 1,D8S1135和D8S182 7~ 1731的、与中国人肺腺癌相关的抑癌基因 相似文献
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肺癌高死亡率的根本原因在于早期诊断的困难。现代分子肿瘤学的研究进展揭示了在肺支气管上皮癌变过程中发生的多种分子水平异常,使得我们有可能将外周血等容易取得的微创性样品中的分子病理学改变作为肺癌早期诊断的辅助指标。通过以往的研究我们发现,一条等位基因缺失而另一条等位基因异常高甲基化是肺癌组织中抑癌基因p16失活的重要机制之一。在这项研究中,我们利用从非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)病人外周血血浆中提取的DNA分析了P16基因的甲基化状态。采用改进的甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)的方法,95例NSCLC病人的血浆DNA被检测,其中肺鳞癌59例,肺腺癌36例。作为对照,75例相应的肿瘤组织被同时分析。结果显示,p16基因启动子区高甲基化状态的检出率在血浆中为72.6%(69/95),而在相应的肺癌组织中为74.7%(56/75)。值得注意的是,血浆DNA p16基因异常甲基化只是从那些肿瘤组织DNA表现p16基因高甲基化的病例中被检出——二者存在极好的符合率。我们还发现,在Ⅰ期病人中,血浆p16基因异常高甲基化在肺鳞癌(82.4%)比在肺腺癌(33.3%)中要高得多(P<0.005)。从而提示,血浆p16基因异常甲基化有可能成为一项早期发现非小细胞肺癌(尤其是鳞癌)的、非常重要的分子病理学指标。而血浆DNA的MSP则是检测这一指标的敏感、可靠并且便于操作的技术之一,成为一种可以应用于人群筛查的方法。 相似文献