新型淋球菌培养基分离培养淋球菌的研究

[目的]比较自制新型淋球菌培养基与进口 Thayer-Martin(T-M)淋球菌选择培养基分离培养淋球菌的性能,并观察其保存期长短. [方法]鉴定淋球菌,接种两种淋球菌培养基分离培养,比较各自阳性率;接种不同保存时间段的新型淋球菌培养基,比较培养性能. [结果]两种培养基对淋球菌的分离阳性率一致,差异无统计学意义.不同时间段新型淋球菌培养基对淋球菌的培养性能一致,差异无统计学意义. [结论]新型淋球菌培养基具有经济、培养性能高等优点,可以替代进口T-M培养基.     

2000～2004年成都地区淋球菌耐药性监测

目的检测成都地区2000~2004年淋球菌耐药菌株的流行情况及变迁。方法用纸片酸度定量法测定β-内酰胺酶。用琼脂稀释法测定菌株对青霉毒、四环素、环丙沙星、大观霉素、头孢曲松钠等5种抗生素的最小抑菌浓度(MIC)。结果2000~2004年5年间,978株菌对青霉素和环丙沙星的耐药率分别为88.14%~99.08%和93.87%~99.44%,其MIC50、MIC90及MIC范围均无明显变化,均未发现敏感株;对头孢曲松敏感,2000~2004年未检出耐药株,其MIC50、MIC90及MIC范围有逐渐降低的趋势。5年来共检出13株耐大观霉素菌株;产β-内酰胺酶菌株(PPNG)和耐四环素淋球菌(TRNG)检出率分别为78.02%和57.57%,均高于同期全国其它城市。2004年PPNG的检出率高达91.93%,与前4年相比显著上升(χ2=37.16,P<0.005),TRNG检出率近2年比前3年略有下降(χ2=14.81,P<0.005)。结论成都地区淋球菌耐药情况非常严重,青霉素、四环素、环丙沙星已不能作为本地区治疗淋病的药物,推荐大观霉素和头孢曲松作为本地区治疗淋病的首选药物,应对淋球菌的耐药性进行长期监测。     

不同时期分离的淋病奈瑟菌药物敏感性测定

目的　了解淋病奈瑟菌对抗生素敏感性的变迁情况。方法　对门诊 1991年和 1996年各 10 0株标本进行了 12种抗生素最小抑菌浓度 (MIC)测定。同时对产青霉素酶株 (PPNG)和非产青霉素酶株 (non PPNG)的MIC值进行了比较。结果与结论　青霉素G、四环素等 6种抗生素MIC值 1996年与 1991年两者之间有显著性差异 (P <0 0 5或P <0 0 1)。其中MIC50 值变化较大的是青霉素G和氟哌酸 ,1996年比 1991年均增加 6 3倍。此外 ,PPNG株和non PPNG株MIC值也存在差异     

阴道毛滴虫培养板的临床应用评价

阴道毛滴虫病（Trichomonisis vaginalis）足一种由阴道毛滴虫（TV）引起的常见性传播疾病。其感染可造成阴道炎、男性不育症等疾病,同时也是其它性传播疾病如艾滋病、梅毒的危险因素。     

土茯苓加减方对淋病奈瑟菌耐药质粒的消除作用

目的评价土茯苓加减方对淋病奈瑟菌耐药质粒的消除作用,为筛选安全、有效、经济的中药消质剂提供参考。方法四川省医学科学院.四川省人民医院皮肤病性病防治研究所性传播疾病(STD)实验室2005年2～12月收集的门诊淋病患者中分离鉴定的30株产β-内酰胺酶的淋病奈瑟菌菌株(PPNG)作为实验菌株(土茯苓加减方组),采用土茯苓加减方对PPNG进行耐药质粒消除;全国性病中心提供的WHO推荐淋病奈瑟菌标准菌株A、B、C、D、E作为质控菌株,采用传统消质剂十二烷基硫酸钠(SDS)作为对照(SDS组),评价PPNG经土茯苓加减方作用后对抗生素的敏感性改变情况以及土茯苓加减方的消质作用。结果土茯苓加减方组PPNG对青霉素、四环素、环丙沙星的耐药率由100%降低为60%～70%,差异均有统计学意义(P0.01);SDS组PPNG对青霉素和环丙沙星的耐药率下降为77%和80%(P值分别为0.024和0.011);土茯苓加减方对4.2、5.3和7.4kb质粒有不同程度消除作用,其中对5.3kb和7.4kb质粒的消除率达到20%左右;土茯苓加减方组总的质粒消除率为16.7%,SDS组总的质粒消除率为23.3%,但差异无统计学意义(P0.05)。结论土茯苓加减方对产β-内酰胺酶的淋病奈瑟菌耐药质粒具有一定消除作用,能够在一定程度上增强淋病奈瑟菌对抗生素的敏感性。     

准确判愈性病性尿道炎的探讨研究

目的通过对性病性尿道炎患者的尿道分泌物和前列腺液的检测,为更准确地判愈性病性尿道炎提供参考指标。方法所有病人在疗前用尿道分泌物做检测,疗后用尿道分泌物和前列腺液做检测,并就尿道分泌物与前列腺液的检测判愈结果进行分析。结果已经尿道分泌物判愈的54例性病性尿道炎患者中,有24例(44.44%)出现前列腺液的异常。结论性病性尿道炎因取材部位的影响,仅用尿道分泌物检测可能有44.44%出现错判。前列腺液反映了中、后尿道的情况,以尿道分泌物加前列腺液的检测来判愈性病性尿道炎更具准确性。     

淋球菌外膜蛋白PI基因重组子的构建和表达

目的 扩增四株淋球菌外膜蛋白PI基因，构建pET30b-PI-NG重组子，在大肠杆菌中诱导表达外膜蛋白PI．方法 采集临床淋球菌四株，提取细菌基因组DNA，PCR扩增外膜蛋白PI基因，与克隆载体pBS-T连接，构建pBS-T-PI-NG重组子，测序，目的基因插入表达质粒载体pET30h中，构建pET30h-PING重组子，转化表达宿主大肠杆菌BL21(DE3)，IPTG诱导蛋白质表达，SDS-PAGE初步分析．结果 成功构建了四株淋球菌的pET30b-PI大肠杆菌表达重组子，经IPTG诱导表达后，其中三株获得表达的目的蛋白PI。结论 本研究为PI蛋白免疫学特性的研究、抗体制备、以及预防淋病疫苗的研制莫定了基础。     

淋球菌临床分离株PI基因序列的测定与分析

目的：分析比较4株临床分离的淋球菌和2株标准菌株外膜蛋白IP基因及蛋白质序列，初步探索我国淋球菌的变异情况，为淋球菌多态性研究、IP基因的表达和疫苗研制提供依据。方法：构建pBS-T-IP克隆重组子并进行测序，用hlastn和CLUSTAL W分析基因和蛋白质序列的相似性，并与已发表的序列进行比较，预测并分析所得IP基因的loop(表面暴露区域)结构。结果：在GenBank中搜索到相似性大于98％的序列，6条序列分别属于PIA和PIB两个亚型，其中IP4的序列与GenBank中的相应序列有18个位点的差异，可能为我国特有的流行株。位于7个loop结构中的变异位点占3条PIA蛋白间总变异的67％，占3条FIB蛋白间总变异的84％，变异程度较高。结论：成功克隆了临床分离的淋球菌株和标准菌株的IP基因并进行序列分析，为深入研究我国流行的淋球菌菌株的多态性、IP基因的表达和疫苗研制奠定了基础。     

荧光探针二次杂交技术及其在医用基因芯片中的应用

目的 建立一种适用于医用基因芯片的核酸检测技术。方法 运用自行设计的荧光探针，通过与模板DNA和固定探针的次序杂交，检出特异基因片段。结果 应用该方法在基因芯片上对性病病原体菌株进行检测，各阳性组荧光密度值较阴性组显著下降；对临床标本检测的灵敏度和特异性均达到90％以上，杂交过程不需添加任何试剂，杂交检测时间缩短至40分钟以内。结论 荧光探针二次杂交技术可用于医用基因芯片，并具有快速、简便、可靠等特点，有利于实现检测过程的全自动、封闭性和一体化。     

伏牛山区三宝成亮点

八百里伏牛山盛产的连翘、山五味、山茱萸由于产量大、社会用量也大，是豫西山区群众的主要经济来源，特别是山茱萸在伏牛山实施退耕还林以后成了当地群众的支柱产业，所以当地群众称连翘、山五味、山茱萸为伏牛山三宝。