抗HBV药物对小鼠早期胚胎发育的影响

目的　观察拉米夫定 (3TC)和干扰素 (IFNα) 2种抗乙型肝炎病毒 (HBV)药物对早期胚胎发育的影响 ,探讨妊娠早期用药的可能性。方法　收集昆明种小鼠的单细胞受精卵 ,采用微滴培养法连续培养 72h ,观察不同浓度3TC和IFNα对胚胎发育的影响 ,以胚胎发育到各期的比例为判断发育效果的标准。结果　当IFNα浓度高达 1 0 0 0u/m ;3TC 50 0 μmol/L时 ,胚胎发育率呈下降趋势 ,尤其是培养液中 3TC浓度达 50 0 μmol/L时 ,发育至 4 -细胞、8-细胞及桑椹胚期的胚胎数明显减少 (P <0 .0 5) ,但在IFNα浓度 <50 0U/ml;3TC <30 0 μmol/L时 ,对小鼠早期胚胎发育基本无抑制作用。结论　在正常治疗剂量下 ,IFNα和 3TC对早期胚胎发育无影响     

HBV感染人胎盘滋养层细胞机制的初步探讨

目的 采用透射电镜观察HBV体外感染人胎盘滋养层细胞的超微结构变化.方法 HBV体外感染人胎盘滋养层细胞.ELISA检测培养上清中HBsAg,PCR检测细胞培养上清和滋养层细胞中的HBV DNA.HBV荧光定量PCR检测细胞培养上清中HBV DNA量(拷贝/ml).透射电镜观察滋养层细胞的超微结构.结果 感染组滋养层细胞培养上清中HBsAg在PBS清洗后12 h时A值为0.942,96 h时上升为1.264.PCR检测感染组细胞培养上清和感染组细胞HBV DNA均为阳性.PBS彻底清洗后0、12、36、60、84 h感染组细胞培养上清的HBV DNA分别为:＜103,3×104,6×105,5×105,3×105拷贝/ml.透射电镜观察到感染组滋养层细胞膜附近存在包涵素(Clathrin)形式的内吞小体形成,并且发现内吞小体内存在病毒颗粒样结构.在感染组细胞粗面内质网内发现HBsAg特异性的纤维丝状结构.结论 HBV可能经包涵素依赖的细胞内吞形式进入滋养层细胞,进而实现感染细胞或通过胞释作用将病毒排至细胞的对侧而实现穿越滋养层细胞屏障.     

陕西株庚型肝炎病毒(GBV-C/HGV )RNA NS3区 cDNA(4248nt～4465nt)的扩增、克隆和序列分析

目的　了解陕西株庚型肝炎病毒 (HGV,RNA/ GBV-C)的核苷酸序列特点 .方法　从陕西省西安市两位非甲、乙、丙、丁、戊型肝炎患者的血清中 ,应用反转录及套式 PCR技术 ,从血清中提取 RNA,经特异性的反转录引物 P4反转录成c DNA,以此为模板分别用 P3,P4及 P1 ,P2 两对引物进行PCR扩增 ,扩增到 2 18bp的 HGV RNA NS3区部分基因 ,将其克隆入 Pin Point TMXal- T载体 ,挑选阳性克隆并进行了序列分析 .结果　 SG2 与 HGV的核苷酸同源性分别为 85 .6 4%与84.48% ;与 GBV- C的核苷酸同源性为 86 .2 1%与 84.48% ,其二者之间同源性为 97.13% ;二者与 HGV的氨基酸同源性分别为 98.2 8%和 93.10 % ,与 GBV- C的氨基酸同源性也为98.2 8% ,93.10 % ,二者之间的氨基酸同源性达 94.83% .结论　庚型肝炎病毒 NS3区核苷酸同源性较高 ,同义突变率也较高 ,可能是一个对其生存环境较为适应的病毒 .     

退田还湖对生态环境及血吸虫病流行的影响

血吸虫病在全球的危害非常严重，且多年来无太大变化。我国主要分布在长江中下游的12个省、市、直辖区。建国后通过大规模的群众性防治工作，疫区面积大为缩小、居民患病状况明显改善，但1980年以来疫情呈现徘徊态势，局部地区呈严重回升趋势。2003年入夏以来，血吸虫病又出现了新的变化。在我国流行的人畜共患血吸虫病主要是日本血吸虫病，钉螺是日本血吸虫唯一的中间宿主。中国的钉螺根据外形分为肋壳和光壳2种，都可以传播血吸虫病。湖南8个县区为光壳钉螺，钉螺面积达2737．70万m^2。根据血吸虫病流行类型和中间宿主钉螺孳生地的类型，可分为江洲滩型、平原水网型和山丘型，以江洲滩型的发病率最高。血吸虫病的地理分布呈明显的地方性和间断性，重点分布在江湖洲滩地区。因此，我们针对洞庭湖区退田还湖带来的生态环境及对血吸虫病流行的影响进行了研究。     

人胎盘组织和滋养层细胞膜联素V的检测

目的检测膜联素V(AnnexinV)在人胎盘组织的表达及其分布,探讨乙肝病毒(HepatitisBVirus,HBV)感染胎盘细胞的可能方式.方法收集血清学HBsAg阳性孕妇足月胎盘组织39例、血清学HBsAg阴性孕妇足月胎盘组织4例,将培养的滋养层细胞制成细胞爬片,用免疫组化方法检测胎盘组织和滋养层细胞中的Annexin V.随机选取7例胎盘组织采用免疫荧光标记方法结合激光共聚焦技术对Annexin V进行重测.结果Annexin V存在于人类胎盘组织中,位于滋养层细胞、间质细胞及绒毛毛细血管内皮细胞的胞浆中.结论胎盘中含有丰富的AnnexinV,推测其可能是乙肝病毒进入滋养层细胞并感染胎儿的潜在受体.     

人正常早孕滋养细胞体外培养株的系统鉴定

目的 建立人早孕滋养细胞株（HPT-8）的系统鉴定方法。方法 通过光镜、扫描电镜、透射电镜、免疫组化和免疫荧光激光共聚焦的方法对体外培养出的HPT-8进行系统鉴定评价。结果 电镜下可见细胞表面微绒毛丰富；胞质丰富；内质网扩张明显，细胞间紧密的桥粒样结构连接；检测细胞胞浆中角蛋白18和波形蛋白均为阳性，细胞胞浆中角蛋白7为阳性，细胞膜上移动相关蛋白为阳性。表皮生长因子受体、滋养细胞趋化因子和胎盘碱性磷酸酶结果均阳性，而人绒毛促性腺激素和胎盘催乳素结果均为阴性。结论 通过多种方法对HPT-8进行形态、超微结构、蛋白骨架和功能指标的综合评价，可以较全面的确定体外传至72代的细胞株HPT-8为具有部分内分泌功能的滋养细胞株，为进一步开展实验研究建立细胞模型。     

免疫预防后HBeAg与HBV宫内感染分析

目的 探讨免疫预防后母亲及其新生儿HBeAg阳性对乙型肝炎病毒（HBV）宫内感染及婴儿产生抗．HBs的影响。方法 以194例HBsAg阳性孕妇及其所生的196例婴儿为研究对象。通过随访分析母亲或新生儿HBeAg阳性对HBV宫内感染的发生、新生儿HBV持续感染及其与婴儿抗．HBs产生的关系。结果 196例新生儿有10例发生宫内感染，母亲或新生儿HBeAg阳性是宫内感染的危险因素（P〈0．05），RR值分别为4．76（1．28～17．67）、5．53（1．49～20．48），共有1例HBV宫内感染慢性化的婴儿，其出生时HBeAg也阳性。在出生于HBeAg阳性母亲的婴儿、HBeAg阴性母亲的婴儿之间，在出生时HBeAg阳性的婴儿、出生时HBeAg阴性的婴儿之间，在1，4，7月龄随访时各组间抗-HBs的A值差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论 HBeAg可自由通过胎盘，因此该指标不能作为宫内感染与否的判断指标。免疫预防后母亲及新生儿HBeAg阳性与否在宫内感染和慢性化中仍起重要作用。但对婴儿抗-HBs的产生无影响。     

人早孕绒毛组织的体外原代培养和人滋养细胞株的建立

目的:建立快速、有效的绒毛滋养细胞体外原代培养的方法以及建立人滋养细胞株和初步评价。方法:采用胰酶和胶原酶I混合消化法消化绒毛组织,用胰蛋白酶消化传代体外培养,通过光镜、透射电镜和免疫荧光激光共聚焦方法对培养出的细胞进行形态和骨架评价。结果:显微镜下可见细胞呈多边形,细胞平铺生长,有细胞融合后形成的合体滋养层细胞;透射电镜下可见细胞表面的微绒毛丰富;胞质丰富,内质网扩张明显,有丰富的糖原颗粒、髓样小体和明显的脂滴,以及细胞间紧密的桥粒样结构连接;直接免疫荧光双标记染色检测到角蛋白18和波形蛋白均为阳性。结论:采用胰酶和胶原酶I混合消化法可获得较纯的滋养细胞,通过光镜、透射电镜和免疫荧光激光共聚焦检测细胞外形和骨架,确定该体外传至56代的细胞株为滋养细胞株。     

糖尿病患者及其配偶生活质量的影响因素

目的了解糖尿病患者及其配偶的生活质量及其影响因素。方法选择西安市某综合性医院内分泌科就诊的门诊和住院糖尿病患者60例，均经空腹血糖测定及糖耐量试验确诊，其配偶均排除糖尿病。应用SF-36量表作为调查工具。结果糖尿病患者配偶的生理功能、生理职能、总体健康、活力、社会功能、情感职能、精神健康评分均明显高于患者（P〈0．01），躯体疼痛评分低于患者（P〈0．01）；多元线性逐步回归分析显示，糖尿病患者生活质量的影响因素有病程、年龄、空腹血糖和经济收入。糖尿病患者配偶的生活质量与年龄、性别和经济收入有关。结论糖尿病患者配偶的生活质量好于患者。病程长、年龄大、空腹血糖高和经济收入低的患者生活质量差；年龄大、女性、家庭经济收入低的配偶生活质量差。     

湖南省血吸虫病的长期趋势及影响因素分析

目的了解湖南省血吸虫病近15a的发展趋势,为今后的防治工作提供基础资料。方法采用1990～2004年间的湖南省血吸虫病监测资料,分析长期趋势;采用多因素分析各长期趋势间的相关性。结果新血吸虫病人检出率和病死率15a间一直呈下降趋势,并且主要在前3a下降比较显著,之后维持在相对稳定的状态。粪检阳性率、血检阳性率和耕牛患病率15a间一直在很小的范围内波动,总体上看呈比较平稳的状态,流行区人口数呈缓慢的上升趋势,2000～2004年的上升幅度较大。结论湖南省血吸虫病近15a的防治工作中,取得的成效是显著的,今后还应进一步加大耕牛血吸虫病的防治力度。