胆道闭锁与婴儿肝炎综合征的诊断和鉴别指标的分析

目的 回顾性分析梗阻性黄疸患儿的实验室指标、肝胆超声与磁共振胰胆管造影在胆道闭锁与婴儿肝炎综合征的诊断及鉴别诊断中的应用价值.方法 收集2010年1月至2012年12月间在我院住院治疗的梗阻性黄疸患儿70例,胆道闭锁患儿50例,婴儿肝炎综合征患儿20例,均行肝胆超声及磁共振胰胆管造影检查;比较两者敏感度、特异性、准确性及预测值等,并对实验室相关指标进行统计分析及组间比较.结果 胆道闭锁组和婴儿肝炎综合征组谷氨酰转肽酶分别为(743.5±564.0) IU/L、(198.8±197.8)IU/L,差异有统计学意义(P＜0.05).若以谷氨酰转肽酶＞300IU/L作为胆道闭锁诊断标准,谷氨酰转肽酶诊断胆道闭锁灵敏度、特异性、准确性分别为89.58％、68.18％、82.85％).肝胆超声诊断胆道闭锁灵敏度、特异性、准确性分别为84.0％、100.0％、88.6％;磁共振胰胆管造影检查诊断胆道闭锁灵敏度、特异性、准确性分别为82.0％、80.0％、81.4％;差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 目前,肝胆超声是诊断胆道闭锁并与鉴别婴儿肝炎综合征的可靠方法,其敏感度、特异度、准确性、阳性预测价值、阴性预测价值均高于磁共振胰胆管造影检查.     

P63在肛门直肠畸形大鼠直肠发育过程中表达及意义

 目的检测P63在正常和畸形胎鼠肛门直肠的胚胎发育过程的表达,探讨其表达的意义。方法应用乙烯硫脲(ETU)致畸Wistar孕鼠（n =20）,建立肛门直肠畸形动物模型,分别于E13、E14、E15、E16(Ex表示大鼠妊娠第x天)剖宫取胎。正中矢状面、连续切片,P63免疫组化染色,连续动态观察P63在正常和畸形大鼠胚胎泄殖腔及肛门直肠发育过程中的空间表达情况。通过Western blot和荧光实时定量PCR（qRT-PCR）方法分别研究P63mRNA和蛋白在正常和畸形大鼠胚胎泄殖腔及肛门直肠的表达。结果⑴免疫组化结果正常大鼠胚胎中,P63表达于尿直肠隔以及后肠、泄殖腔膜和尿生殖窦的上皮层。肛门直肠畸形组大鼠胚胎中,在E13～E16,P63在尿直肠隔间质、后肠上皮层、泄殖腔膜或瘘管上皮层的表达减弱。⑵Western blot和qRT-PCR定量检测结果在发育期的后肠中P63 蛋白和P63 mRNA的表达表现出时间依赖性,在肛门形成的关键时期,即14 d和15 d时P63的表达水平达到高峰,一旦肛门形成其表达量随即开始降低,畸形组与正常组比较,P63 mRNA和蛋白的表达在14～15 d明显降低,差异有统计学意义(P <0．05)。结论在正常大鼠泄殖腔和直肠胚胎发育过程中,P63存在着时空表达不平衡性的特点;在肛门直肠形成的关键时期(13～16 d),ARM大鼠胚胎中P63 基因表达下调可能与肛门直肠畸形的发生有关。     

尾芽胚胎发育过程及其与肛门直肠畸形的关系

近年来的研究表明,脊椎动物的尾芽是由位于胚胎尾部未分化的间充质细胞组成,其外侧覆以表皮,内部是由呈均质的细胞群所构成,它代表了残余的Hensen结节和原条,这些细胞有产生不同组织(包括次级神经管、尾肠、尾部体节及脊索)的能力。     

先天性食道闭锁术后短期-中期疗效评定

 目的回顾性分析我院诊治的先天性食道闭锁病例,总结诊断、治疗经验,分析影响预后因素,探讨术后短期鄄中期并发症
及其处理经验、教训。方法随访并回顾性分析近3年来我院诊断、治疗、随访的先天性食道闭锁患儿,应用食道闭锁预后分级
方法总结分析影响预后的主要因素。结果2006 年初~2009 年10 月临床资料完整的先天性食道闭锁病例48 例（男33 例,女
15 例）,平均体质量2 667.86 g（1 700~3 800 g）;全部为玉期食道成形,主要术后并发症为肺炎、吻合口瘘（16%）、气管食管瘘、
切口感染（11%）、迟发型气管食管瘘（7%）、食道狭窄（10%）,胃食管返流（67%）。死亡率为12.5%,主要死亡原因为严重肺内感
染及复杂先天性心脏病。结论绝大多数食道闭锁患儿可以耐受玉期食道吻合术,术后短鄄中期预后良好;术前及术后影响预
后及导致死亡的主要原因为复杂心血管畸形、误吸、肺内感染;主要中期并发症为胃食管返流、食道狭窄。     

先天性肛门直肠畸形合并少见型手足畸形一家系调查及其病因研究

 目的探讨先天性肛门直肠畸形合并少见型手足畸形一家系患者的临床表现及其致病原因。方法在患者家系调查的基础上,设立正常对照组与患者组,应用聚合酶链反应技术对候选基因P63第3-14,DLX5,DLX6,DAC,和HOXD13外显子的DNA序列测定,对两组的外显子进行分析。结果根据病史及体检提示,该家系患者祖孙三代均患有畸形程度进行性加重的肛门直肠畸形及手足畸形,其中2例肢体畸形符合缺指裂掌畸形;病因研究提示,将患者扩增的片段DNA序列分别与正常对照组以及人类基因库DNA序列进行比较,发现位于P63基因第6外显子的第797位碱基对发生突变,即由G突变为A,密码子CGA->CAA,该突变结果为错义突变,导致相对应的第227位氨基酸由精氨酸->谷氨酰胺。结论肛门直肠畸形合并缺指裂掌畸形可能是1个新的综合征表现型,由P63基因第6外显子基因组的第797位碱基对突变所致     

中国北方五市儿童功能性便秘流行病学特征现况调查

Objective Functional constipation (FC) is a common complaint in childhood but the prevalence still remains unclear, the aim of this study was to explore the prevalence of FC in childhood in the northern parts of China. Methods A screening program on FC in childhood was carried out in 5 northern cities (Beijing, Tianjin, Shenyang, Changchun, Harbin) of China according to symptoms under the Rome Ⅲ criteria. Random clustered sampling of the inhabitants was carried out under stratification of cities, geographic zones, schools or nurseries.Sample size of each area was in proportion to the population of the area. The range of age was 4-14. All subjects under study were requested to fill in a questionnaire distributed by the teachers. The screening program was carried out immediately after a section survey was completed. All together, 20 000 questionnaires were distributed with 19 638 retrievals. According to the result of the screening, a small number of patients who met the criteria were further selected to undergo a detailed clinical examination in the hospital including laboratory examination, colonic transit time, defecography or/and barium enema, electromyologram and anorectal manometry to exclude organic disease of the colon. Simultaneously, a detailed questionnaire was requested to fill under the assistance of trained doctors or medical students.Prevalence of FC of the population was adjusted by the rate of correct diagnosis from the detailed study. Results The adjusted point prevalence of FC in 5 northern cities of China according to Rome Ⅲ criteria was 4.73% with higher prevalence rate of FC seen in the Beijing area (5.02%) than in other cities (4.82%, 4.76%, 4.27%, 4.40%, with P＜0.001 ). Male to female ratio was 1.26:1 with majority of the FC fell in the 4-6 year olds (5.76%). Conclusion FC appeared a common disorder in childhood in the northern parts of China which called for greater attention. Higher prevalence was noted in the age groups of 4-6.     

Dickkopfl在肛门直肠畸形大鼠泄殖腔发育中的差异表达研究CSCD

目的 研究Wnt信号通路的细胞外拮抗物Dickkopf1（Dkk1）在正常胎鼠和肛门直肠畸形胎鼠的泄殖腔及后肠组织中的差异表达水平,探讨Dkk1与肛门直肠畸形（anorectal malformations,ARM）发生的相关关系。方法 用乙烯硫脲（ethylenethiourea,ETU）致畸Wistar孕鼠24只,制成ARM动物模型,根据切片观察,组成畸形组（n＝96）,胎龄在12～17、19、21 d。取相同胎龄的正常对照组孕鼠16只,对应胎龄胎鼠作为正常对照组（n＝96）。常规制备胎鼠冰冻切片,解剖显微镜下手工显微切割方法准确切取泄殖腔及后肠组织。实时定量聚合酶链反应（real-time polymerase chain reaction,RT-PCR）方法和蛋白印迹（Western blot）方法,检测正常和ARM不同胎龄胎鼠的泄殖腔及后肠组织中Dkk1的mRNA表达情况和蛋白水平。应用随机区组设计的两因素方差分析,比较正常和肛门直肠畸形胎鼠泄殖腔和后肠组织的Dkk1表达水平的差异。结果 在对照组和畸形组大鼠胚胎泄殖腔及后肠组织中均能检测出Dkk1 mRNA和蛋白表达。对照组Dkk1 mRNA及Dkk1蛋白表达在胎龄16 d的大鼠中表达达到峰值分别为2.77±0.06和3.20±0.76。畸形组泄殖腔及后肠组织Dkk1 mRNA及Dkk1蛋白表达呈波动态势,平均水平分别为0.96±0.14和0.87±0.14,与对照组2.00±0.52和1.98±0.65比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 Dkk1在胎鼠的泄殖腔及后肠组织中的低表达可能与ARM的发生有关,可能在ARM的发生中具有重作用。     

功能性便秘儿童粪便短链脂肪酸的气相色谱分析及临床意义

目的 应用分析化学技术建立正常儿童粪便样本中短链脂肪酸的指纹图谱,并分析其在功能性便秘(FC)儿童中的变化,探讨肠道短链脂肪酸变化在儿童功能性便秘中的作用.方法 研究对象分为对照组和便秘组,对照组35例,平均年龄6岁,便秘组15例,平均年龄6.5岁,均符合儿童功能性便秘罗马Ⅲ标准.取所有儿童粪便样本提取短链脂肪酸(SCFA),应用气相色谱技术(GC)对SCFA的含量进行定量检测.结果 对照组儿童每克干粪中SCFA的含量为(51.89±17.62)mg/g,其中各SCFA的含量依次为:乙酸,丁酸,丙酸,异丁酸和异戊酸;与对照组相比,便秘儿童每克干粪中SCFA总量明显减少,差异有统计学意义(P<11.01);其中乙酸,丙酸和丁酸的含量减少,异丁酸和异戊酸含量增加,其含量顺序依次为:异丁酸最多,异戊酸次之,乙酸,丙酸和丁酸含量最低;便秘组粪便中sCFA浓度(87.29±33.42)mg/L较时照组的(17.36±8.12)mg/L增高,差异有统计学意义(P<0.01);结论功能性便秘儿童粪便中的短链脂肪酸含量减少,比例失调,但浓度升高,功能性便秘的产生可能与肠道内短链脂肪酸吸收过度以及局部的短链脂肪酸浓度升高有关.     

功能性便秘儿童肠道菌群DNA的PCR-SSCP和BOX-PCR指纹图谱分析及临床意义

目的 探讨功能性便秘(functional constipation,FC)儿童肠道微生态菌落的构成及其在便秘发生过程中的作用.方法 研究对象分为便秘组和对照组,便秘组15例,平均年龄6.5岁,对照组35例,平均年龄6岁.取所有儿童粪便提取细菌基因组DNA, 应用基于细菌16SrDNA的PCR-SSCP技术和基于细菌基因组的BOX-PCR技术对肠道菌落的DNA指纹图谱分析,结合克隆测序和生物信息学技术对FC儿童的肠道菌落进行初步鉴定,并对其组成结构进行分析.结果 对照组和便秘组的所有样品分别进行3 次以上的PCR-SSCP和BOX-PCR指纹图谱分析,得到了稳定可重复的图谱,便秘组菌种的种类较对照组明显增多,差异有统计学意义;对照组优势菌主要为拟杆菌属、埃希氏菌属、双歧杆菌属、乳杆菌属;便秘组的优势菌主要为脆弱拟杆菌属、埃希氏菌属、真杆菌属和梭菌属.结论 功能性便秘儿童肠道菌群的菌属多样性增加,各肠道菌属间存在比例失调,肠道微生态失调可能参与了便秘的产生或加重过程.     

上皮细胞间充质转化在胚胎发育过程中的研究进展

早期胚胎发育过程中,上皮样细胞与间充质样细胞的形态转变调节了哺乳动物的胚胎发育,参与了胚层分化、神经系统分化、组织器官的形成,决定着胚胎发育成功和完全与否.上皮细胞发生间充质转化由多种环境因素诱导,深入的了解这一过程在胚胎发育中的作用,将为预防和治疗人类遗传性疾病和先天畸形的防治奠定基础.