丙型肝炎病毒NS3蛋白单克隆杂交瘤细胞株的建立及初步鉴定

应用国产基因工程表达的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＮＳ３区抗原免疫小鼠，然后取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系ＳＰ２／０融合，筛选出４株稳定分泌抗ＨＣＶＮＳ３区蛋白单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞株，分别命名为２Ｂ６，２Ｆ３，３Ｄ８，３Ｄ９，经初步研究表明这４株单抗与ＮＳ３抗原具有良好的反应性，与ＨＣＶ核心区多肽及乙型肝炎病毒表面抗原和ｅ抗原均无反应。抑制实验表明这４株抗体分别针对ＮＳ３抗原分子上的２个不同的抗原决定簇。     

自血光量子疗法治疗慢性呼吸衰竭30例报告

自血光量子疗法又称紫外线照射、充氧自血回输疗法，国外已有60余年临床应用史，我国自1958年引进本疗法治疗缺血，缺氧性疾病取得了较好的临床效果。我医院自1991年以来应用该疗法抢救、治疗了30例慢性呼吸衰竭患者，现报告如下：资料与方法本文30例患者均为慢性支气管炎，阻塞性肺气肿所致的肺源性呼吸衰竭，血气分析符合1959年国际会议确定的呼吸衰竭血气标准，该组病人患慢性支气管炎，肺气肿病程均在20年以上。性别与年龄：男性21例，平均年龄65岁（58－76岁）；女性9例，平均年龄70岁（62－75岁）。呼吸衰竭病程：1－3个月5例，4－6个…     

乙型肝炎病毒表面抗原单克隆抗体杂交癌细胞系的建立及抗体的鉴定

对乙肝病毒(HBV)各抗原成分的单克隆抗体(McAb)已经研制和应用,其中以对表面抗原(HBsAg)特异的McAb建株较多。单克隆抗HBs是对HBsAg复杂的抗原性进行精细分析的有力工具,并有助于对HBsAg的免疫检测。     

丙型肝炎病毒HCV E1区基因的真核表达载体构建及序列分析

目的:建立丙型肝炎病毒包膜区基因的真核表达载体,并通过对其序列分析阐明其作为基因接种的可能性.方法:经常规RT-PCR法从HCV RNA阳性病人的血清中扩增出HCV E1区的基因片段,经EcoR Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切后将其克隆到真核表达载体P cDNA3中,阳性克隆经Sma Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切鉴定;用双脱氧终止法测序,同时利用计算机软件对其推定的氨基酸序列进行分析.结果:RT-PCR扩增产物经酶切过夜后与经过同样双酶切的真核表达载体PcDNA3连接,阳性克隆经Sma Ⅰ和Xba Ⅰ酶切后产生了预期大小的144bp的片段 .测序后其核苷酸序列与已经报道的HCV Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型的同源性分别为72.8%、93.25% 、61.96%和56.44%;其推定的氨基酸序列的同源性分别为77.3%、95.7%、54.6%和51.35%;与已经报道的中国株的同源性为95.06%和93.25%;属HCV Ⅱ型; 经计算机辅助分析表明该片段内含有4个可能的糖基化位点,1个跨膜区,其氨基端为信号肽序列,在跨膜区的两端分别含有2个和1个抗原决定簇, 而每一个抗原决定簇内均含有1个糖基化位点,该片段内还含有2个T细胞识别位点.结论:本实验克隆的HCV E1基因属Ⅱ型,为我国流行的基因型,其基因的一级结构具备进行有关HCV核酸免疫的研究条件,其真核表达载体的构建,为进一步研究HCV E1基因的功能及HCV基因免疫的研究创造了条件.     

肝癌特异性谷氨酰转肽酶单克隆抗体的制备与初步应用

目的 制备抗肝癌特异性谷氨酰转肽酶(GGT)单克隆抗体及研究此单克隆抗体的临床应用。 方法 以纯品GGT-Ⅱ免疫BALB/C小鼠,取免疫鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合以制备能产生抗GGT-Ⅱ单克隆抗体的杂交瘤细胞株;以此抗GGT-Ⅱ单克隆抗体采用竞争抑制性ELISA检测人血清GGT-Ⅱ。 结果对融合细胞阳性孔反复克隆后获得1株稳定分泌抗GGT-Ⅱ单克隆抗体的小鼠杂交瘤细胞系:2G4F6B2,此单克降抗体为IgG1类,与GGT-I无交叉反应。以此单克隆抗体测定人血清GGT-II的结果与聚丙酰胺梯度电泳法相符。 结论 研究制备的抗GGT-Ⅱ单克隆抗体特异性高,可应用于临床检测人血清中GGT-Ⅱ。     

单克隆抗PreS 2细胞系的建立、鉴定及初步应用

本研究所用聚合人血清白蛋白(PHSA)受体阳性的乙肝病毒(HBV)颗粒致敏的BALB/C鼠脾与骨髓瘤(SP 2/o)做细胞融合,得到一株可抑制PHSA受体活性的单克隆抗体细胞株(2 E_2)。于1987年4月经日本东京免疫试剂研究所协助鉴定,确认为对HBV上PreS2抗原特异。免疫球蛋白类别属IgG1。现该细胞株已具     

分泌抗丙型肝炎病毒NS5a蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株的建立及应用

制备抗丙型肝炎（丙肝）病毒（ＨＣＶ）－ＮＳ５ａ重组蛋白的单克隆抗体（单抗），并探讨其在临床诊断中的应用价值。方法通过常规细胞融合技术制备分泌单抗的杂交瘤细胞株，用含该杂交瘤细胞的腹水对石蜡包埋肝组织细胞中的ＨＣＶ－ＮＳ５ａ抗原进行免疫组化测定，同时用抑制法检测６７例丙肝血清中的ＨＣＶＮＳ５ａ和ＮＳ３抗体分布，并与ＮＳ３单抗的结果进行比较。结果融合后的阳性克隆中筛选出４株稳定分泌单抗的杂交瘤细胞株，命名为８Ｂ２，６Ｆ１１，４Ｃ６和７Ｄ９。这４株单抗与ＮＳ５ａ抗原有良好的反应性；与ＨＣＶ核心区多肽，ＮＳ３区表达多肽及乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的表面抗原均无反应。免疫组织化学检测显示，在ＨＣＶ感染肝组织中，ＮＳ５ａ抗原阳性占５４．９％（１７／３１），而ＮＳ３抗原阳性占５１．６％（１６／３１），抗原分布多呈包涵体分布，少数病例为胞浆型，１例ＮＳ５抗原呈核型表达。在６７例抗ＨＣＶ阳性血清中，ＮＳ５抗体阳性４０例，占５９．７％，而ＮＳ３阳性４７例，占７０％。结论此法制备的单抗有强特异性，在开展ＨＣＶ免疫组织化学研究上具有广阔应用前景。     

单克隆抗PreS 2细胞系的建立鉴定及初步应用

本文报道用聚合人血清白蛋白(PHSA)受体阳性的乙肝病毒(HBV)颗粒致敏的BALB/C鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)做融合,得到一株可抑制PHSA受体活性的单克隆抗体细胞株(2E_2)。经鉴定确认为对HBV上PreS2抗原特异。免疫球蛋白类别属IgG1。现该细胞株已具备稳定、高滴度的抗体分泌能力。至今单克隆抗PreS 2细胞系的建立在国内尚未见报道。该单抗已被用于血凝试剂的制备以检测PreS 2抗原,并分析了PreS 2抗原与HBV感染后其他血清学指标的相关性。