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1.
重组结核分支杆菌16000蛋白抗原(rPA16)的免疫原性研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:研究结核分枝杆菌重组16000蛋白(rPA16)诱发家兔产生抗体的能力并评价其血清学诊断的价值。方法:家兔按注射的抗原及佐剂的不同分组,皮下多点注射分别进行免疫,6次免疫后采血,双向琼脂扩散试验和酶联免疫吸附试验(ELISA)跟踪兔血清抗体效价的时间效应并检测兔血清与所试各类分支杆菌PPD有无交叉反应;同时检测rPA16与各分支杆菌PPD的免疫羊血清的反应,并用rPA16抗原检测人血标本,分析该抗原的临床检测的敏感性和特异性。结果:兔血清抗体效价结果显示:5个月后,加佐剂的抗原组的兔免疫血清仍能检测到抗体,不加佐剂组2个月后血清抗体检测即为阴性,ELISA检测兔免疫血清比双向琼脂扩散方法要更敏感,rPA16抗原加佐剂引起的兔血清抗体滴度最高可达1:6400,不加佐剂组的血清抗体滴度仅为1:400,ELISA法分析抗rPA16的兔血清的特异性表明其特异笥较好,仅与牛、人型结核分支杆菌的PPD呈阳性反应,与其他所试分支杆菌PPD反应均为阴性,同时又分析了rPA16抗原的特异性,与人型PPD相比,该抗原只与所试各类分支杆菌,BCG、牛分支杆菌免疫的血清呈阳性反应,而人型PPD则基本上与结核分支杆菌免疫的血清均呈阳性反应,ELISA检测血清标本结果:肺结核病组中rPA16和PPD检测敏感性分别为64.8%和75.2%;健康组,卡介苗接种阳转健康组,rPA16和PPD检测特异性分别为96.2%,88.5%和94.3%,66.7%。结论:rPA16具有较强的免疫原性和一定的特异性,可能成为结核病血清学诊断试剂之一。 相似文献
2.
结核病何以再度肆虐全球中华医学会结核病分会常务理事全军结核病研究中心副主任309医院结核病研究室主任庄玉辉本世纪80年代初,肺结核曾一度被认为是一种不会再对人类构成威胁的疾病。在美、英等工业发达国家,结核病得到了有效的控制,肺结核病例数锐减。如美国,... 相似文献
3.
应用PCR检测HCMV-DNA,ELISA检测HCMV-IgM、IgG,诊断肾移植受者HCMV感染,65例受者中HCMV感染者39例,非感染者26例。应用MTT法检测受者血清IL-6生物活性,阐明了HCMV感染对肾移植受者血清IL-6水平的影响。结果表明:感染与非感染组间血清IL-6水平差异无显著性(P>0.05);6例原发性感染者血清IL-6水平随感染时间延长呈增高及降低双相改变,表明慢性迁延性感染者血清IL-6水平降低。临床工作中监测HCMV感染的肾移植受者血清IL-6水平变化具有重要意义。 相似文献
4.
重组结核分枝杆菌16000蛋白抗原(rPA16)豚鼠皮肤试验效果的研究 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 :以豚鼠为动物模型 ,分析重组 16 0 0 0蛋白抗原rPA16能否引起迟发型超敏反应 (DTH)。方法 :连续 3次皮下注射结核分枝杆菌H37Rv热灭活菌体 ,使豚鼠致敏后进行皮肤试验。以生理盐水为阴性对照 ,PPD为阳性对照组 ,重组蛋白则设置 0 .1,0 .2 ,0 .4μg三个剂量 ,分别进行背部皮内注射 ,注射后 2 4~ 72h观察豚鼠注射局部皮肤的皮痘、硬结程度。结果 :0 .1~ 0 .4μg/ 0 .2ml的重组蛋白抗原rPA16在 48~ 72h阳性反应平均直径与PPD相比均无显著差异 (均P >0 .1) ,3种浓度的重组蛋白豚鼠皮肤反应的阳性率之间也无显著差异 (P >0 .1)。 48h为rPA16引起豚鼠皮肤反应的较佳测量时间。结论 :重组结核分枝杆菌 16 0 0 0蛋白抗原与PPD相比 ,所引起的豚鼠皮肤DTH的反应能力基本相似 ,具有皮肤试验的潜在应用价值 相似文献
5.
用限制性内切酶PstⅠ消化人型结核杆菌H37RvDNA,与质粒pUC19 DNA连接后转化大肠杆菌,经同位素32P标记的人型结核杆菌H37Rv全染色体DNA探针筛选出6个阳性克隆(MT1 ̄6),其中克隆DNA片段MT2(4.2Kb)、MT4(3.5Kb)和MT5(3.0Kb)标记成探针,检测了22种分支杆菌标准株和15侏人型结核杆菌临床分离侏以及2种非分支杆菌,其杂交结果完全相同,与人型结核杆菌及 相似文献
6.
目的 本研究旨在采用分子生物学技术 ,从基因水平上确认医院内术后暴发感染的致病菌 ,并建立一套快速的PCR方法鉴定龟分支杆菌脓肿亚种。方法 根据分支杆菌的rrn操纵元序列即 16srDNA和 16s - 2 3srDNA间隔区序列 ,分别设计合成一对引物 ,采用聚合酶链反应技术 ,并以结核分支杆菌和常见速生长非结核分支杆菌作对照 ,对临床分离株进行PCR扩增 ,并根据DNA带的大小和数量鉴定分支杆菌。结果 5 3株龟分支杆菌脓肿亚种临床分离株和标准株 ,用16srDNA扩增 ,均被扩增出一条特异的 5 84bpDNA带 ,相应的 16s - 2 3srDNA扩增 ,为特异的380bpDNA带。而速生长的非结核分支杆菌均扩增出不同大小的 1或 2条DNA带。 结论 基因水平上确认此次引起医院内术后暴发感染的致病菌为龟分支杆菌脓肿亚种。rrn操纵元PCR扩增检测体系灵敏、特异 ,能鉴定龟分支杆菌脓肿亚种临床株 ,并与其它速生长分支杆菌区别开。 相似文献
7.
一氧化氮(NO)在活化巨噬细胞抗某些肿瘤细胞和微生物上起重要作用。用不同剂量的母牛分支杆菌制剂免疫BALB/c小鼠,检测小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮的水平,结果显示受免疫小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮水平明显高于未免疫小鼠(P<0.01-0.001)。不同剂量母牛分支杆菌制剂免疫的BALB/c小鼠,腹腔巨噬细胞产生的一氧化氮水平差别不显著(P>0.05)。因此认为,母牛分支杆菌制剂作为结核病免疫治疗剂其作用之一是活化巨噬细胞产生一氧化氮,从而达到杀菌的目的。 相似文献
8.
9.
目的研究结核分支杆菌rpoB基因突变及其与利福平(RFP)耐药性的关系。方法以参考菌株结核分支杆菌H37Rv为对照,用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)方法分析了40株结核分支杆菌临床分离株。PCR-SSCP方法由PCR扩增和扩增产物DNA单链多态性分析组成。结果两对引物PCR扩增产物分别为411和258bp,其敏感性分别为5pg/μl、500个菌/ml和1pg/μl、500个菌/ml;均为属特异性。40株结核分支杆菌临床分离株258bp扩增片段SSCP图谱的特点:以参考菌株结核分支杆菌H37Rv为对照,10株敏感株均无区别;单耐RFP或包括RFP多种抗结核药30株,除3株外,其余27株SSCP图谱有明显的区别;检测阳性率为90%,特异性为100%。结论PCR-SSCP方法可检测出耐RFP结核分支杆菌rpoB基因突变;该基因是RFP的药物靶编码基因,它的突变与RFP耐药性有密切关系,这有助于结核分支杆菌耐药性的快速检测和研究 相似文献
10.