二甲基亚硝胺诱发大鼠肝纤维化模型肝脏超微结构形态学与血清透明质酸、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原含量的变化

背景:肝纤维化的发展伴随诸多的形态学和机能学的改变,二甲基亚硝胺所致的大鼠肝纤维化模型病变类似于人类肝纤维化病变。目的:观察二甲基亚硝胺诱发大鼠肝纤维化发生过程中形态学与血清透明质酸、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原含量的动态变化。设计:随机对照动物实验。单位:延边大学医学院病理教研室实验室。材料:选用80只3月龄Wistar雄性大鼠,清洁级,体质量175～200g,由延边大学医学院动物中心提供。试剂:二甲基亚硝胺美国Sigma公司产品,α-平滑肌肌动蛋白为Dako公司产品,天狼猩红(Siriusred)为Aldrichchem公司产品,血清透明质酸、层粘连蛋白和Ⅳ型胶检测试剂盒为华美生物工程公司产品,兔抗鼠的一抗为Dako,Denmak生物公司的产品。仪器:日本产JEM-1200EX透射电镜;日本产酶联免疫检测仪;北京航空航天大学研制开发的CMTAS多功能真彩色病理图象分析系统。方法:实验于2004-06/2005-12在延边大学医学院完成。摸球法随机将大鼠分成2组。模型组(n=40):给予腹腔注射10g/L二甲基亚硝胺(10μL/kg),1周连续注药3d(1次/d),持续4周;对照组(n=40):在同一时间段内注射同样剂量的生理盐水;分别在实验开始7,14,21,28d处死大鼠,处死前左心室取血,血清样品被冷冻在-70℃的低温冰箱中备实验用,处死后取其肝组织用于光镜和电镜的样品制备。①用ELISA法测定在肝纤维化形成过程中血清透明质酸、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原含量的动态变化。②采用苏木精-伊红染色、组织化学的天狼猩红染色观察肝纤维化形成过程中组织形态学变化及对肝纤维化分级(肝纤维化程度分为0～4级,0级:没有肝纤维化;1级:汇管区有纤维化;2级:汇管区与汇管区之间形成纤维间隔;3级:肝小叶中出现纤维间隔,并且肝的正常结构出现病理改变;4级:形成肝硬化),同时计算胶原纤维的面密度。③采用透射电镜技术、免疫组织化学的α-平滑肌肌动蛋白染色观察肝星状细胞的转化情况及分布特点。④对肝纤维化形成过程中胶原纤维面密度的百分比与血清透明质酸、Ⅳ型胶原、层粘连蛋白含量的相关分析。主要观察指标:①肝纤维化形成过程中血清透明质酸、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原含量的变化。②肝纤维化形成过程中形态学变化、肝纤维化的分级情况及胶原纤维的面密度。③肝星状细胞的转化情况及分布特点。④肝纤维化形成过程中胶原纤维面密度的百分比与血清透明质酸、Ⅳ型胶原、层粘连蛋白含量的相关分析结果。结果:纳入80只大鼠,实验组34只造模成功,与对照组40只全部进入结果分析。①模型组第7天至28天血清透明质酸、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原含量明显高于对照组(P<0.05),其中第28天增加程度最大。②模型组汇管区在腹腔注射二甲基亚硝胺后第7天出现出血坏死,第14天仍可在汇管区观察到出血、坏死,并且还可见较薄的纤维间隔,第21和28天可见较厚的纤维间隔;模型组大鼠腹腔注射二甲基亚硝胺后第7,14,21,28天胶原纤维面密度的百分比明显高于对照组(P<0.05),其中第28天增加的幅度最大;对照组大鼠纤维化病理分级与模型组大鼠各时间点相比差异显著(P<0.01),模型组大鼠的第7天较第14,28天组有明显差异(P<0.01)。③a-平滑肌肌动蛋白染色有阳性细胞出现,并且在这一阶段在电镜下观察到正处在“转化的肝星状细胞”;模型组第21和28天,在电镜下观察到典型的成纤维细胞。④胶原纤维面密度的百分比与血清透明质酸、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原含量呈正相关(r=0.707,0.675,0.662,P<0.01)。结论:二甲基亚硝胺诱发大鼠肝纤维化发生过程中,在不同时间段内形态学与血清标志物透明质酸、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原呈动态变化,并且在不同的时间段内胶原纤维面密度的百分比与血清透明质酸、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原含量呈正相关。     

月见草油脂肪酸钠盐影响家兔实验性动脉粥样硬化的病理形态学观察

为进一步探讨月见草油脂肪酸钠盐对家兔实验性动脉粥样硬化的影响，我们将１６只家兔分３组；实验对照组、预防服药组和空白对照组。前二组动物均饲胆固醇，预防服药组同时加饲月见草油脂肪酸钠盐，所有动物均饲等量基本饲料。１５０天后处死动物，在光学显微镜和电子显微镜下观察主动脉壁形态，并测算内膜动脉粥样硬化斑块面积等。结果发现，预防服药组动物主动粥样硬化斑块面积等。结果发现，预防服药组动物主动脉粥样硬化病变程度     

三硝基甲苯急性中毒对小鼠睾丸超微结构的影响

三硝基甲苯急性中毒后,小鼠睾丸的各级生精细胞,支持细胞及睾丸间质细胞的超微结构均有不同程度的改变,精子细胞的损伤较重,精原细胞的损伤较轻.生精细胞的损伤较支持细胞及睾丸间质细胞为重.     

慢性六价铬中毒对大白鼠免疫系统的影响

六价铬对人体有害,但至今其对免疫系统影响的报道甚少。本文观察了不同浓度铬化合物对大白鼠免疫系统的影响,试图反映图们江水系铬污染的潜在危险性,并为控制铬污染浓度,提供科学依据。材料与方法取32只大白鼠,分为对照组和实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,以不同浓度铬分别喂食八个月后,在乙醚麻醉下取外周血,     

三磷酸腺甙注射液(以碳酸胍为稳定剂)的毒性研究

目前国内应用的三磷酸腺甙注射液(ATP)的稳定性尚非完全可靠,故三磷酸腺甙稳定性研究,在改进药物的生产工艺及稳定疗效方面已成为一项主要课题。据文献报道,碳酸胍溶液对 ATP 的稳定性作用最佳,     

猪胆溶纤汤对肝纤维化大鼠血生化指标的影响

目的:观察猪胆溶纤汤(ZRS)对肝纤维化的预防和治疗作用.方法:采用四氯化碳皮下注射法建立大鼠肝纤维化模型,将肝纤维化大鼠随机分为预防组和治疗组,分别于造模同时和造模后灌胃给予ZRS(2ml/100g,1次/日,连续7周),观察ZRS对各组大鼠血生化指标、肝指数、脾指数的影响.结果:ZRS预防组血清GPT、LDH水平与模型比较明显降低(P＜0.05,P＜0.01),ZRS预防组血清TP、A/G水平与模型比较显著升高(P＜0.01),ZRS预防组肝指数与模型组比较显著升高(P＜0.01)、脾指数显著降低(P＜0.01).ZRS治疗组血清GOT水平、脾指数与模型组比较明显降低(P＜0.05).结论:ZRS对四氯化碳所致大鼠肝纤维化具有预防和治疗作用.     

缺氧－复氧幼狗心肌细胞冷冻蚀刻电镜观察

本实验以幼狗心脏为实验对象，应用冷冻蚀刻技术观察ＡＴＰ－ＭｇＣｌ２对缺氧－复氧幼狗心肌细胞，尤其是膜结构的影响。结果表明，缺氧－复氧对照组心肌细胞损伤较重，而ＡＴＰ－ＭｇＣｌ２组心肌细胞损伤轻ｑ提示，ＡＴＰ－ＭｇＣｌ２对缺氧－复氧幼狗心肌细胞质膜、线粒体等超微结构有保护作用。     

延吉市秋季婴幼儿急性腹泻病原病毒的电镜观察

本文报导用免疫电镜法检测秋季婴幼儿急性腹泻病毒。在29例病人粪便中检出了病毒颗粒的16例(55.2％),即轮状病毒11例(37.9％),小圆形病毒1例(3.4％),其中,同时具有轮状病毒和小圆形病毒者3例(10.3％),类冠状病毒1例(3.4％)。免疫电镜的检出率比直接电镜法高。     

感染布氏菌豚鼠的下丘脑、垂体、肾上腺皮质的组织学和超微结构观察

本文选用了二个不同种,不同毒力的布鲁氏菌(简称为布氏菌),即牛种BA19(弱毒菌)和羊种16M(强毒菌)对豚鼠进行了实验性感染。观察其下丘脑、垂体及肾上腺皮质的组织学和超微结构的变化。结果表明其下丘脑——垂体——肾上腺皮质系统出现