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1.
检测乙、丙型肝炎病毒基因芯片的制备   总被引:20,自引:0,他引:20  
目的:探讨研制检测乙型和丙型肝炎病毒的基因芯片。方法:以HBV、HCV高度保守的基因片段为探针,同时用没有同源性的植物基因片段为内参照基因,制备成“乙、丙型肝炎病毒双检基因芯片”。检测时抽提患者血清中的病毒核酸,进行RT-PCR扩增及荧光标记,然后与双检基因芯片杂交,结交结果用ScanArray3000扫描仪扫描。结果:双检基因芯片的内参照结果能做到绝对阳性和绝对阴性,同时对不同血清(正常人血清,乙肝E抗原阳性血清,丙肝RNA阳性血清,乙肝、丙肝阳性混合血清)能有效检测区分。结论:本研究成功地制作了乙、丙型肝炎病毒双检基因芯片,可望使用于临床。  相似文献
2.
丙型肝炎患者外周血单个核细胞HCV和Fas抗原检测   总被引:15,自引:0,他引:15  
目的:探讨丙型肝炎(丙型)患者外周血单个核细胞(PBMCs)内丙型肝炎病毒抗原(HCVAg)及Fas抗原(FasAg)表达状况及意义。方法:采用HCV核心区及NS3区单克隆抗体,对28例慢性丙肝患者PBMCs进行免疫组化检测,并同步检测FasAg。结果:HCVAg及FasAg阳性率分别为85.7%(24/28)和82.2(23/28),经相关分析显示。两者表达呈显著正相关(r=0.546,P〈0.  相似文献
3.
输血前患者血清感染性指标的检测与分析   总被引:14,自引:0,他引:14  
目的:了解输血前患者血清各项感染性指标的阳性率,及早发现阳性患者,避免医疗纠纷的发生.方法:采用酶联免疫法对输血前患者7318例进行乙型肝炎表面抗原(HBsAg),抗丙型肝炎病毒(HCV)抗体,及抗人类免疫缺陷病毒(HIV)检测.同时应用甲苯胺红颗粒凝集试验(TRUST)进行梅毒的筛选试验.结果:7318例患者中HBsAg阳性患者751例(10.26%),抗-HCV阳性患者210例(2.87%),梅毒阳性患者50例(0.68%),抗-HIV阳性患者5例(0.072%).结论:输血前患者血清感染性指标有一定比例的阳性率,应严加关注.  相似文献
4.
新疆地区不同人群HCV感染现状分析   总被引:13,自引:0,他引:13  
应用第二代酶联免疫试验(ELISA)对新疆地区3012例不同人群进行丙型肝炎病毒抗体(抗—HCV)检测。结果显示:抗—HCV抗体的总阳性率为10.82%(326/3012)。其中以肾透析患者阳性率最高占86.57%,其次为输血、有手术史病人,阳性率为79.34%,吸毒者阳性率为61.54%。我们对326例抗HCV阳性标本又进行了HBsAg、ALT、AST和GGT检测,发现HBsAg阳性率为19.33%,ALT、AST和GGT异常率分别为67.80%、61.96%、48.16%。提示:输血是传播丙型肝炎病毒的重要途径之一,并丙型肝炎患者一般都伴有肝功能异常。为此,通过检测丙型肝炎病毒抗体和ALT、AST、GGT来筛选献血员对减少丙型肝炎的发生起了重要作用。  相似文献
5.
性行为与乙型肝炎及丙型肝炎病毒感染的关系   总被引:13,自引:0,他引:13  
目的 评估高危性行为人群中乙型肝炎病毒(HBV)及丙型肝炎病毒(HCV)的感染情况及某些高危性行为与HBV、HCV感染的关系。方法 用PCR方法对本院性传播疾病(STD)门诊中的173名就诊者进行HBV、HCV检测,并对被调查者的年龄、初次性生活年龄、3个月内性侣数、终身性侣数、性生活方式、既往STD史等作调查。既往有吸毒史及受血史者不纳入调查范围。结果 HCV感染在高危性行为的人群中尤其在STD人群中常见,并与既往STD史呈正相关。3个月内性侣数超过4个是HBV、HCV感染的危险因素。HBV、HCV感染在梅毒患者中最多见。结论 HBV、HCV经性接触传播的途径不容忽视。  相似文献
6.
人胎盘滋养层细胞的分离培养及HCV体外感染试验   总被引:12,自引:1,他引:11  
目的:体外分离培养较高纯度的胎盘滋养层细胞,观察其生物学特性,探讨丙型肝炎病毒(HCV)经胎盘母婴传播的具体途径。方法:采用胰蛋白酶消化法消化人足月胎盘组织,以35%,45%两个Percoll密度梯度进行分离纯化。并用免疫组化及透射电镜等技术对其生物学特性进行观察。HCV阳性血清感染体外分离培养的胎盘滋养层细胞,通过逆转录聚合酶链反应及扩增敏感试验对培养上清进行定性、定量检测,以观察HCV的感染及复制情况。结果:胎盘组织中滋养层细胞角蛋白染色阳性,血管内皮细胞及基质成分波形蛋白染色阳性,经该法分离纯化的细胞角蛋白染色阳性者(滋养层细胞)占90%以上,电镜下滋养层细胞可观察到成熟型、中间型、未成熟型三种形态。HCV感染细胞培养16d内培养上清中可间断检测出HCV RNA.结论:改进后的分离方法可以得到较高纯度的滋养层细胞,HCV感染胎盘滋养层细胞可能是HCV宫内母婴传播的途径之一。  相似文献
7.
目的 :了解我国输血后丙型肝炎病毒 (HCV)感染的慢性化规律和影响因素。方法 :对河北省固安县某农村 137例单采浆献血员HCV感染 12~ 2 5年的现状进行调查 ,包括临床表现 ,血清丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶 (AST)、γ 谷氨酰转肽酶 (γ GT)、碱性磷酸酶 (ALP)、血清总胆红素 (TBil)、直接胆红素 (DBil)、总蛋白(TP)、白蛋白 (ALB)测定和αFP检测 ,病毒学标志检测以及B型超声检查 ,其中 ,HCVRNA的测定采用荧光定量PCR方法 ,抗 HCV和HBsAg测定采用酶联免疫吸附试验。结果 :该组HCV感染的慢性化率为 70 .99% ,自然阴转率为2 9 .0 1%。 137例感染者目前几乎均无症状 ,总的ALT和 /或AST异常率为 37.4 0 % ,6例为中度 ,其余均为轻度 ,无重度。但B型超声检查发现 ,轻度者占 5 7.72 % ,中度占 38.2 1% ,重度占 4 .0 7%。重度者距感染发生时间分别为 13、14、2 1、2 5和 2 5年。HCVRNA阳性组的ALT、AST和γ GT平均水平显著高于阴性组 ,抗 HCV阳性组的ALT/AST的异常率显著高于阴性组 ,抗 HCV滴度与HCVRNA水平的对数呈正相关 (r=0 .74 7,P <0 .0 1)。男性感染者的慢性化率高于女性感染者 (78.6 9%比 6 4 .2 9% )。结论 :本组输血后HCV感染自然阴转率较高 ,慢性HCV感染表现隐匿 ,肝酶学检查指标#0;  相似文献
8.
HepatitisCvirus(HCV)infectionisrecognizedasamajorpathogenworldwideandafrequentetiologicfactorinthedevelopmentandprogressionofchronichepatitis,cirrhosisandhepatocellularcarcinoma(HCC)1 ThepresenceofHCVRNAinbileductepithelialcellsinchronichepatitisCpatien…  相似文献
9.
Hepatitis C virus nonstructural protein NS3 and telomerase activity   总被引:8,自引:0,他引:8       下载免费PDF全文
Objective To study the effect of hepatitis C virus nonstructural protein NS(3) (HCV NS(3)) on telomerase activity and carcinogenesis.Methods Streptavidin-peroxidase (SP) conjugated method was used to detect the expressio n of HCV NS(3) protein in NIH3T3 cells transfected with plasmid pRcHCNS(3)-5’ and pRcHCNS(3)-3’. Telomerase activity was detected by an in situ telomerase a ctivity labeling method, telomeric repeat amplification protocol polymerase chai n reaction (TRAP-PCR) and telomerase PCR enzyme linked immunosorbent assay (ELI SA) technology in the transfected and non-transfected NIH3T3 cells.Results HCV NS(3) protein was expressed in the NIH3T3 cells transfected with plasmid pR cHCNS(3)-5’ expressing HCV NS(3) C-terminal deleted protein or with plasmid pR cHCNS(3)-3’ expressing HCV NS(3) N-terminal deleted protein. The positive sig nal of HCV NS(3) protein was localized in the cytoplasm of NIH3T3 cells, and th e signal intensity of the former was stronger. Telomerase activity in NIH3T3 c ells transfected with plasmid pRcHCNS(3)-5’ was stronger than that in NIH3T3 c ells transfected with plasmid pRcHCNS(3)-3’ (P&lt;0.01), whereas telomerase a ctivity in NIH3T3 cells transfected with plasmid pRcCMV or untreated NIH3T3 ce lls was weaker than that in NIH3T3 cells transfected with plasmid pRcHCNS(3)-3 ’ (P&lt;0.05). The expression level of HCV NS(3) protein was significantly co rrelated with the strength of telomerase activity (P&lt;0.05). The results ob tained by in situ telomerase activity labeling corresponded to the results by te lomerase PCR ELISA technology. Conclusions HCV NS(3) protein may activate telomerase through endogenous mechanism to induce host cell transformation. The effect of HCV NS(3) C-terminal deleted protein on telomerase activity in the host cell may be stronger than that of HCV NS(3) N -terminal deleted protein. In situ telomerase activity labeling was a reliabl e technology for studying pathological morphology and telomerase activity in tis sues and cells.  相似文献
10.
丙型肝炎病毒核心区蛋白在HepG2细胞中的表达   总被引:8,自引:3,他引:5  
目的 :构建能稳定表达丙型肝炎病毒核心区蛋白的哺乳动物细胞系 ,以便对丙型肝炎病毒核心区蛋白的抗原性及其他功能作进一步研究。方法 :通过PCR扩增丙型肝炎病毒核心基因 ,将其亚克隆入真核表达质粒pcDNA3.1( )中 ,用脂质体包裹后转染肝癌细胞系HepG2 ,通过G4 18筛选获得稳定转染细胞系 ,并通过间接免疫荧光法检测HepG2中丙型肝炎病毒核心区蛋白的表达。结果 :克隆的基因全长 5 94bp ,并经测序和重组质粒双酶切证实为所需目的基因 ;经间接免疫荧光验证实转染了目的基因的HepG2细胞中有丙型肝炎核心区蛋白的表达。结论 :丙型肝炎病毒核心区蛋白能在HepG2细胞中稳定表达。  相似文献
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