miR-513a-5p慢病毒载体的构建及其对人骨肉瘤细胞放疗敏感性的影响

目的:构建miR-513a-5p慢病毒过表达载体，转染人骨肉瘤细胞株，观察miR-513a-5p对人骨肉瘤细胞放疗敏感性的影响。方法:PCR法扩增人miR-513a-5p基因，克隆入pLentis-CMV-GFP-MCS-PGK-PURO载体获得重组质粒pLentis-miR513a，双酶切鉴定并测序后将正确的重组质粒和对照质粒转染293FT细胞制备慢病毒，分别转染骨肉瘤HOS和U2OS细胞，qRT-PCR法及荧光显微镜鉴定转染结果。克隆形成实验、MTT法检测miR-513a-5p高表达HOS和U2OS细胞在X射线照射下细胞存活情况。结果:双酶切及测序结果确定成功构建miR-513a-5p慢病毒载体pLentis-miR513a。qRT-PCR结果提示，转染骨肉瘤细胞株后miR-513a-5p表达显著升高。克隆形成实验结果显示miR-513a-5p高表达后骨肉瘤细胞在X射线照射下细胞增殖减慢。MTT结果提示miR-513a-5p高表达骨肉瘤细胞经X射线照射后细胞存活减少。结论:成功构建了miR-513a-5p慢病毒载体，建立了高效稳定表达miR-513a-5p的骨肉瘤细胞株，高表达miR-513a-5p能显著增加X射线照射后骨肉瘤细胞的放疗敏感性。     

多柔比星介导的血管损伤促进主动脉夹层发生发展的机制研究

目的探讨多柔比星(Dox)介导的血管损伤在促进主动脉夹层(AD)发生发展中的作用机制。方法选取武汉大学人民医院行胸AD全弓置换患者10例为实验组,同期选择心脏移植术患者3例为对照组,2组均于术中取AD血管标本。另取3周龄雄性C57BL/6J野生型小鼠18只,随机分为3组,每组6只,对照组(WT组)、β氨基丙腈酯(BAPN)组(第3周开始饲喂含0.25%BAPN小鼠维持饲料)、BAPN+Dox组(根据体质量每周腹腔注射3mg/kg Dox,连续5周,第3周开始饲喂饲料同BAPN组),5周后,游离小鼠主动脉,4%多聚甲醛固定,石蜡包埋,切片。免疫组织化学及Western blot检测组织P53蛋白表达,TUNEL染色检测细胞凋亡情况。结果实验组P53蛋白较对照组明显升高(0.76±0.05 vs 0.39±0.11),凋亡细胞明显增多[(38.3±8.7)%vs (12.6±1.2)%](P0.01)。BAPN+Dox组死亡率明显高于BAPN组(100.0%vs 66.7%);BAPN+Dox组组织P53蛋白较BAPN组显著升高;VSMC凋亡明显增多,且2组P53蛋白和血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡均较WT组明显升高(P0.01)。结论 Dox介导的血管损伤可能通过诱导VSMC凋亡,促进AD发生发展。     

吴门调脂颗粒对大鼠平滑肌细胞自噬的干预研究

目的:探究吴门调脂颗粒对大鼠平滑肌细胞(VSMCs)的自噬在细胞、蛋白质、基因等水平的影响。方法:运用血清药理学方法,以调脂颗粒含药血清、6-氨基-3-甲基嘌呤(3-MA)、雷帕霉素(Rapamycin)诱导处理VSMCs,通过MTT检测调脂颗粒含药血清对细胞生长增殖的影响,Western blotting检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的相对表达量变化,免疫荧光法检测细胞内自噬小体的数目变化,Real time PCR检测自噬相关基因表达变化。结果:调脂颗粒含药血清处理VSMCs后,细胞生存率无明显改变,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的相对表达上调,自噬小体数量增多,自噬相关基因表达上调(P0.05)。雷帕霉素联合调脂颗粒含药血清处理VSMCs后,细胞生存率下降,较雷帕霉素组LC3-Ⅱ的相对表达下降,自噬小体数量显著减少,自噬相关基因表达下调(P0.05或P0.01)。结论:吴门调脂颗粒可以通过多个层面抑制平滑肌细胞的异常增殖及过度自噬,促进平滑肌细胞适度自噬。     

探讨绝经过渡期、育龄子宫肌瘤患者异常阴道出血相关因素分析

目的: 探讨育龄、绝经过渡期子宫肌瘤患者异常阴道出血危险因素，为异常阴道出血临床精准诊断、治疗提供理论依据。方法： 选取2017年06月—2020年06月于内蒙古医科大学附属医院住院行手术治疗的子宫肌瘤患者。实验组设为非月经期异常阴道出血的子宫肌瘤患者，对照组为无异常阴道流血子宫肌瘤患者。根据第9版教科书年龄18-43岁定为育龄组；44-54岁定为绝经过渡期组（我国妇女平均绝经年龄为49.5岁，80%在44-54岁之间〔1〕）。 应用Excel双录入，核对无误后进行统计分析。计数资料的比较用R×C列联表卡方检验、四格表卡方检验及两独立样本秩和检验。非条件Logistic回归模型用于子宫肌瘤阴道异常出血危险因素的分析，并分别得到OR值与相应95%的可信区间。在此模型中，OR值＞1认为是危险因素，OR值＜1认为是保护因素。统计学显著性水平设定为双侧p≤0.05，即认为差异有统计学意义。全部统计分析选用SPSS19.0软件进行统计学分析。结果：1.将与子宫肌瘤阴道异常出血相关的33项临床指标纳入单因素分析得出，月经周期异常、肌瘤位置（子宫颈肌瘤）、肌瘤直径≥9cm、血红蛋白异常、子宫内膜癌、核分裂像＞5个差异有统计学意义（P≤0.05），均是子宫肌瘤阴道异常出血的危险因素；2.子宫肌瘤异常阴道出血核分裂像＞5个与子宫内膜病理性改变和异常阴道出血差异有统计学意义（P=0.019）。结论：1. 子宫内膜发生病理改变是子宫肌瘤患者引起异常阴道出血的原因之一。2.月经周期异常、子宫颈肌瘤、肌瘤直径≥9cm、血红蛋白异常、子宫内膜病理改变均是子宫肌瘤阴道异常出血的危险因素；子宫肌瘤核分裂像＞5个是子宫平滑肌瘤出现异常阴道出血的独立高危因素；3.子宫肌瘤核分裂像＞5与阴道出血、子宫内膜病理改变有统计学意义。进行单因素分析后得知，月经周期、肌瘤位置、肌瘤大小、血红蛋白、子宫内膜病理变化均子宫肌瘤阴道异常出血的发生有关。 关键词育龄；绝经过渡期；子宫平滑肌瘤；异常阴道出血；危险因素     

a-1, 2岩藻糖基转移酶II在肺鳞癌组织中的表达及对肺鳞癌细胞增殖的影响

目的：探讨a-1，2岩藻糖基转移酶II（FUT2）在肺鳞癌中的表达情况及其对肺鳞癌细胞增殖的影响。方法：应用UALCAN数据库分析FUT2在临床肺鳞癌患者组织中的差异表达及其与肺鳞癌患者临床TNM分期、年龄及性别因素的相关性；采用瞬时转染技术，将FUT2的shRNA质粒转染进H226细胞株中构建FUT2低表达的肺鳞癌细胞模型；利用CCK-8、平板克隆及Western blot实验检测FUT2对肺鳞癌细胞的生长、单克隆细胞团形成及PCNA蛋白表达的影响。结果：FUT2在肺鳞癌尤其是肺鳞癌TNM早中期呈现高表达趋势（P＜0.05），而与年龄和性别无关。低表达FUT2可以抑制肺鳞癌细胞的生长速率和单克隆细胞团的形成数，同时，可以抑制肺鳞癌细胞PCNA蛋白的表达水平，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：FUT2在肺鳞癌中高表达且促进肺鳞癌细胞的增殖能力，有望成为肺鳞癌的早期诊断指标。     

腹腔镜"蘑菇状"剜除术治疗外生性肾血管平滑肌脂肪瘤的临床应用

目的对比研究腹腔镜下外生性肾血管平滑肌脂肪瘤"蘑菇状"剜除与标准肾部分切除术的安全性及有效性，为肾血管平滑肌脂肪瘤腹腔镜下"蘑菇状"剜除术术式的建立提供临床依据。 方法选取海南医学院第二附属医院与解放军总医院2018年1月至2019年5月期间，接受腹腔镜手术的肾血管平滑肌脂肪瘤患者53例，其中25例沿肿瘤假包膜行"蘑菇状"剜除术(A组)、28例行肾部分切除术(B组)。比较两组手术患者的肾动脉阻断时间、手术时间、术中出血量、术后24 h血红蛋白、术后eGFR(estimated glomerular filtration rate,估计肾小球率过滤)的变化、术后住院时间和术后肿瘤复发率。 结果53例手术无术中转开放，无死亡病例。肾动脉阻断时间：A组(11.9±2.2)min、B组(21.5±6.5) min(P<0.001)。手术时间：A组(87.9±24.8)min、B组(114.3±38.9) min(P<0.001)。术中出血量：A组20 ml(20～40)ml、B组50 ml(50～100)ml(P<0.001)。术后24 h血红蛋白变化：A组(7.4±4.3) g/L、B组(12.4±8.8) g/L(P＝0.013)。术后24 h eGFR变化：A组(6.2±7.2 )ml(min·1.73 m²)，B组(12.7±12.8)ml(min·1.73 m²)(P＝0.027)。术后6个月eGFR变化：A组(1.5±3.7)ml(min·1.73 m²)、B组(6.5±5.6)ml(min·1.73 m²)(P<0.001)。术后住院时间：A组4.0 d(3～4)d、B组4.5 d(3～6)d(P＝0.023)。术后随访两组术后肿瘤均无复发。 结论采用腹腔镜"蘑菇状"剜除术治疗外生性肾血管平滑肌脂肪瘤在肾动脉阻断时间、术中出血量、术后24 h血红蛋白、术后eGFR变化、术后住院时间等方面均优于传统肾部分切除术，两组术后肿瘤均无复发；该方法安全、有效，适于临床推广。     

血府逐瘀汤含药血清对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖及PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响

目的研究血府逐瘀汤含药血清对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响及其机制。方法低氧诱导大鼠PASMCs增殖,设置正常对照组、低氧模型组、血府逐瘀低剂量组、血府逐瘀高剂量组和NVP-BEZ235组,血府逐瘀低、高剂量组含药血清浓度分别为5%和20%。运用CCK-8法检测不同低氧时间和药物干预对于PASMCs增殖的影响,Western Blot检测细胞p-Akt、p-mTOR和PCNA表达。结果低氧培养36 h时PASMCs OD值最高,且高于常氧培养(P0.01);与正常对照组比较,低氧模型组OD值明显升高(P0.01),p-AKT、p-mTOR、PCNA表达增加(P0.05);与低氧模型组比较,血府逐瘀高剂量组和NVP-BEZ235组OD值不同程度降低(P0.01),各药物组p-AKT、p-mTOR、PCNA表达减少(P0.05);与血府逐瘀低剂量组比较,NVP-BEZ235组p-AKT、p-mTOR、PCNA表达减少(P0.05)。结论血府逐瘀汤含药血清可以抑制低氧诱导的大鼠PASMCs增殖,可能通过阻断PI3K/Akt/mTOR信号通路活化并下调PCNA表达而发挥作用。     

重要启事

目的：分析肾血管平滑肌脂肪瘤（AML）的CT表现。材料与方法：经手术及病理证实的AML22例，其中男9例，女13例，年龄6—55岁，均行CT平扫及增强扫描。结果：22例AML中，典型的由血管，平滑肌，脂肪3种成分构成的AML病例有14例，因肿瘤内脂肪成分比例少，影像上不易显示脂肪，称为无或少脂肪成分的AML有8例。结论：AML的CT诊断的关键是确定瘤内有脂肪成分，即使少量也有诊断意义。     

腹腔镜下子宫肌壁间肌瘤剔除术中线圈套扎法的临床运用

资料与方法 1 研究对象 本组80例子宫肌壁间肌瘤患者，年龄23～45岁，均为单发性子宫肌壁间肌瘤，直径为3～12cm。术前常规行宫颈细胞学检查，对有异常出血的患者术前宫腔镜检查及诊刮术，子宫内膜活检排除子宫内膜恶性病变。术前B超检查明确肌瘤的部位、大小、离官腔的距离，所有患者均无其他内科合并症。将80例随机分为A、B两组：A组患者术中运用1-0微乔线体外自制线圈套扎子宫肌瘤基底部减少出血，B组于子宫肌瘤周围注射缩宫素减少出血。