小鼠条件性恐惧模型的建立和品系敏感性研究

目的在敏感品系上建立稳定可靠的小鼠条件性恐惧模型。方法采用给予30 s声音刺激(85 dB,5000 Hz),后2 s伴随给予不可逃避的足底电击(0.6 mA,持续2 s),声音-电击共配对5次,每次间隔2 min的方法建立小鼠条件性恐惧模型,在ICR、DBA/2(简称DBA)和C57BL/6J(简称C57)3种品系小鼠上评价场景恐惧和声音线索恐惧获得和表达的行为特点,以确定敏感品系鼠;分别于条件性恐惧训练第2,7,14,21和28天对C57小鼠场景恐惧和声音线索恐惧进行检测,以评价该品系小鼠条件性恐惧的自然消退特点;采用30 s声音+30 s间隔+10次消退训练的模式进行声音线索恐惧消退训练,并于24 h后进行消退保持测试,以评价该品系小鼠消退训练和保持的特点。结果声音-电击配对5次可成功诱导C57小鼠形成场景恐惧和声音线索恐惧,DBA小鼠可诱导形成声音线索恐惧但无法形成场景恐惧,ICR小鼠场景恐惧和声音线索恐惧均未诱导成功,确定C57小鼠为敏感品系鼠。C57小鼠呈现时间依赖的恐惧反应自然消退,其中场景恐惧在训练后第7天僵住百分率消退至(25±12)%,声音线索恐惧训练后第28天僵住百分率维持在(48±22)%;C57小鼠经10轮30 s声音消退训练,僵住时间百分率由(55±30)%消退至(32±27)%,但24 h后消退保持测试时僵住时间百分率又回升至(47±35)%。结论以敏感品系C57小鼠为研究对象,建立了恐惧获得、表达、自然消退、消退训练和消退保持各阶段恐惧行为检测的实验方法,成功建立小鼠条件性恐惧模型。     

应用GGE双标图分析丹参杂种一代品系的稳定性和适应性

目的:评估丹参杂种一代品系的稳定性和适应性。方法:采用GGE双标图模型,分析5个丹参杂种一代品系和2个生产对照种质开展一年多点试验数据,评价了参试材料单根重和有效成分含量的表现及稳定性,同时考察了4个试验点的区分力和代表性。结果:在北京海淀,H4的单根重和丹酚酸B适应性好,稳定性高;在北京密云,H4和H16的单根重和有效成分的适应性好,稳定性高;在陕西商洛,H24的单根重和有效成分适应性好,稳定性高;在河南方城,H24的丹酚酸B含量高,适应性好。通过分析环境的区分力和代表性可以确定丹参杂种一代的选育区及筛选区,北京海淀和河南方城分别作为选育高产、高丹酚酸B含量为目标和高脂溶性成分为目标的选育地点。品系需要在具有区分力的环境作进一步淘汰,在北京密云淘汰产量低的品系,在河南方城淘汰脂溶性成分含量低的品系;在陕西商洛淘汰脂溶性成分含量低的品系。结论:应用GGE双标图评价分析方法可以较好地分析丹参杂种一代品系的稳定性和适应性,可为确定筛选出优良品种、确定丹参选育试验地点和科学的建立丹参区域试验点提供科学参考。     

铁皮石斛叶片多糖和醇溶性浸出物动态积累规律研究

该文通过揭示铁皮石斛叶片多糖和醇溶性浸出物含量的动态变化规律,为铁皮石斛叶片资源的开发利用提供依据.采用苯酚-硫酸法和醇溶性浸出物热浸法测定铁皮石斛3个优良品系不同月份的叶片中多糖和浸出物含量.结果表明,铁皮石斛叶片多糖质量分数为4.45％ ～ 12.17％,约为茎的1/4,醇溶性浸出物质量分数为7.45％ ～29.34％,约为茎的1.5倍.铁皮石斛叶片多糖含量变化与物候期密切相关,冬季、萌芽初期和落叶期植株代谢水平降低,叶片多糖含量减少;植株生长旺盛期,叶片多糖含量较高.叶片中浸出物含量在萌芽前达到最高值,促进了新芽的萌动.     

不同产地不同品系瓜蒌皮中多类型资源性化学成分分析与品质评价研究

目的?分析不同产地不同品系瓜蒌皮中多类型资源性成分差异,为其资源化利用提供数据支撑。方法?采用UPLC-MS/MS方法对8个产地9个品系22个批次瓜蒌皮中的糖类、核苷类、氨基酸类、黄酮类、三萜类等39种化学成分含量进行分析,利用主成分分析（PCA）法对瓜蒌皮产地及品系差异进行综合评价。结果?瓜蒌皮中果糖、葡萄糖的平均含量分别为14.78%、8.14%;检测出10种核苷类、18种游离氨基酸类成分,核苷类成分平均总量为0.57?mg/g,游离氨基酸类成分平均总量为37.71?mg/g;检测出黄酮类成分6种、三萜类成分3种,平均总量分别为0.58、0.01?mg/g。PCA结果表明,基于39种化学成分分析结果,不同产地不同品系瓜蒌皮品质存在明显差异。河北石家庄产“皖蒌7号”瓜蒌皮综合得分最高,河北产区与其他产区的瓜蒌皮差异明显,主要差异成分为药效成分氨基酸类和木犀草苷。结论?不同产地不同品系瓜蒌皮所含资源性成分种类基本一致,但从整体上分析评价,各类型资源性成分含量差异较大,传统药用瓜蒌产区所产部分品系瓜蒌皮中资源性成分总量及药效成分含量相比其他产区较高,研究结果可为瓜蒌皮临床用药选择和不同产地不同品系瓜蒌皮的综合利用提供参考。      

PCR—单链构象多态性分析在中国大陆日本血吸虫品系研 …

聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）是一种将ＰＣＲ扩增的ＤＮＡ片断变性后在中性聚丙烯酰胺凝胶中电泳，检测点突变和ＤＮＡ多态性的有效方法，本实验采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析对我国江苏，云南，湖南及湖北４省的日本血吸虫染色体ＤＮＡ中１个２８０ｂｐ的ｒＤＮＡ片断进行了比较分析，结果显示，４地血吸虫２８０ｂｐ的ｒＤＮＡ片断有一定的多态性和碱基序列的差异，其中江苏和云南两地样品带型相似，而湖南和     

中国大陆日本血吸虫品系的研究——Ⅱ.哺乳动物的易感性

本文报告了6种哺乳动物于人工感染安徽、湖北、广西、四川和云南5地日本血吸虫的虫体回收率及其虫卵开放前期。结果表明,C57BL小鼠、金黄仓鼠、长爪沙鼠、家兔和恒河猴均是中国大陆上述5地日本血吸虫的可容宿主,大鼠则是不可容宿主。各种动物感染大陆上述5地日本血吸虫的虫卵开放前期平均天数表明,C57BL小鼠、金黄仓鼠或恒河猴感染云南或广西两地血吸虫的虫卵开放前期均较四川的为长,差别显著。本文指出德国汉堡热带医学研究院提供的或由其转种而传代的日本血吸虫的平均虫卵开放前期明显地较中国大陆各地日本血吸虫自然隔离群的长5～8d,它已不能代表中国大陆品系日本血吸虫的生物学特性,建议将其称为“中国大陆Vogel品系”,以资与中国大陆的加以区别。     

实验动物品系数据库的建立

目的基于国内外部分实验动物数据库和文献,收集整理世界上现有的200多种共计26 000多个品系的实验动物数据,建立关系型检索数据库,使其成为世界上最大最全的实验动物品系数据库。方法构建基于My SQL数据库软件的中小型数据库,建立检索界面、录入界面和数据库接口。结果本文建立了实验动物品系数据库,已经收录小鼠品系数据21 596条;大鼠品系数据2062条;猴品系数据13条;地鼠品系数据2条;犬品系数据5条;兔品系数据5条。以后会逐步完善数据,实现实验动物品系数据库的定期更新。讨论该数据库的建立方便我国科研人员查阅和使用国内外实验动物品系资源,为引进欧美日等发达国家的实验动物品系资源提供链接。     

异品系皮肤移植大鼠γδT细胞数量和细胞因子分泌

目的 观察异品系大鼠皮肤移植排斥反应发生发展过程中外周血γδT细胞数量变化及其γ干扰素(IFN-γ)及白细胞介素4(IL-4)的分泌情况.方法 建立Wistar→SD大鼠异晶系皮肤移植模型,以SD大鼠自体皮肤再植为对照,于术后0、4、8 d和10～13 d(排斥时)取外周血用免疫荧光染色和流式细胞仪检测γδT细胞数量,并于体外扩增该细胞,用ELISA双抗夹心法测定培养上清中IFN-γ及IL-4的含量.结果 异晶系皮肤移植大鼠术后外周血γδT细胞数量和培养上清中IFN-γ和IL-4水平均显著升高,且显著高于自体皮肤再植同时间点对照组.结论 异品系皮肤移植排斥反应早期外周γδT细胞即可被活化,数量增多,且能同时分泌IFN-γ和IL-4,或同时存在分泌Th1和Th2类细胞因子的2个亚群,参与排斥反应的发生过程.     

微卫星锚定PCR研究日本血吸虫的遗传变异

目的　对中国不同自然隔离群的日本血吸虫进行遗传变异研究 ,并为中国日本血吸虫地域品系的划分提供依据。方法　采用微卫星锚定PCR(SSR -PCR)技术对中国 7省 10地日本血吸虫标本基因组DNA进行PCR扩增 ,根据扩增产物 ,计算遗传距离 ,并构建系统进化树。结果　各地域标本PCR扩增产物均呈多态性 ,其中中国大陆与中国台湾日本血吸虫之间的遗传距离为 0 316± 0 0 6 7(0 176～ 0 378) ;中国大陆日本血吸虫山区型之间的遗传距离为 0 0 6 7;湖区型之间的遗传距离为 0 0 6 3～ 0 176 ;山区型与湖区型之间的遗传距离为 0 0 6 7～ 0 2 5 0 ;湖北省境内 4个地域的日本血吸虫 ,其遗传距离为0 0 6 3～ 0 111。结论　根据我们所采集的日本血吸虫标本和SSR -PCR的实验结果 ,认为中国大陆日本血吸虫在基因分类水平上至少可分为不同层次的 5类 :①云南洱源、四川天全为一类 ;②安徽贵池、湖南岳阳为一类 ;③湖北武汉、湖北钟祥为一类 ;④江西新建、湖北阳新为一类 ;⑤湖北松滋单独为一类。其中①与②③④⑤在总体上可分为两大类 ,②③④⑤又可再分为②③与④⑤两类 ,②③与④⑤还可再各分为两类 ,此外 ,中国台湾日本血吸虫单独列为一类。     

减毒日本血吸虫尾蚴免疫BALB/c小鼠血清IgG水平动态及其被动转移保护力研究

以紫外线照射减毒血吸虫尾蚴免疫动物已证明可获得较高的保护力,尤其是重复免疫更可使免疫小鼠获得更高的保护力;人们普遍认为其诱导的保护性机制可能是细胞免疫与体液免疫共同作用的结果。本文以紫外线减毒日本血吸虫尾蚴免疫BALB／c小鼠,动态观察IgG抗体水平并将免疫小鼠血清转移至另一组小鼠体内测定保护力,以同种品系来源的血清抗体来进一步探讨抗体在血吸虫保护性免疫机制中的作用。