核因子κB受体活化因子配体和肿瘤坏死因子α经炎性牙周膜干细胞外泌体促进破骨细胞分化

目的　慢性牙周炎表现的病理性骨吸收非常常见，牙周膜干细胞（PDLSCs）的外泌体（Exo）对骨吸收的作用和影响尚不明确，本研究分析了该Exo蛋白组分对破骨细胞分化的影响。方法　分别从正畸前拔牙患者和慢性牙周炎患者的牙周膜组织中提取PDLSCs，通过流式细胞术检测表面标记物；通过差速离心分别提取2种细胞的Exo，即Exo-WT和Exo-CP，并通过Western blot、透射电子显微镜（TEM）、蛋白浓度检测、纳米粒径追踪检测Exo特征；通过蛋白质谱检测2种Exo的蛋白组分；通过酶联免疫吸附（ELISA）验证了差异表达蛋白肿瘤坏死因子α（TNF-α）、核因子κB受体活化因子配体（RANKL）、白细胞介素（IL）-1α、转化生长因子β（TGF-β）、骨形态发生蛋白2（BMP-2）表达水平；将10、100、1 000 μg·mL^-1的Exo-CP或Exo-WT加入RAW264.7培养基中并于5 d时通过实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）、Western blot、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色检测破骨分化相关指标表达情况；采用SPSS 24.0软件对实验数据进行统计学分析。结果　Exo-CP富集的差异表达蛋白主要与破骨细胞分化的TNF信号通路、核转录因子κB（NF-κB）信号通路相关；ELISA实验证实了Exo-CP中高表达TNF-α、RANKL、IL-1α，低表达TGF-β1、BMP-2（P<0.05）；Exo-CP作用于RAW264.7，显著提高了细胞的破骨分化相关基因及蛋白的表达水平，TRAP染色可见分化的破骨细胞，且呈现浓度依赖性，100、1 000 μg·mL^-1浓度Exo-CP对破骨细胞分化的促进作用显著高于10 μg·mL^-1浓度组（P<0.05）。结论　慢性牙周炎的病理性骨吸收可能由炎性PDLSCs所分泌的Exo通过促进破骨细胞分化引起，Exo中主要的作用蛋白可能为RANKL和TNF-α，本研究为慢性牙周炎骨吸收的发病机制提供了新视角。     

微载体6复合脂肪干细胞移植在肛瘘治疗中的应用

目的 探讨微载体6复合脂肪干细胞(Microcarrier 6-ADSC)治疗肛瘘的疗效,为肛瘘微创化治疗探索新途径.方法 采用日本大耳兔建立兔肛瘘模型,造模成功后随机分成4组:Microcarrier 6-ADSC复合组、ADSC治疗组、手术组和对照组,每组6只,病理HE染色观察不同治疗方法的效果.结果 Microcarrier 6-ADSC复合组和ADSC治疗组的瘘管组织中有散布的横纹肌细胞和上皮组织,少量淋巴细胞聚集在微载体6周围,在ADSC治疗组中可见到脂肪细胞聚集;对照组可见肉芽组织和淋巴细胞浸润并可见大量坏死组织.与手术组相比,Microcarrier 6-ADSC复合组和ADSC治疗组的治愈时间明显缩短(P<0.05);结论 Microcarrier 6有利于AD-SC的多向分化,可为ADSC的生存提供良好环境,促进瘘管的愈合.     

tuftsin衍生物T肽对小鼠T细胞存活和分化的影响

目的探讨tuftsin衍生物T肽(TP)对T细胞存活、分化的影响。方法无菌分离正常小鼠和荷瘤(B16-F10)小鼠胸腺细胞,分为正常T细胞组、正常T细胞+TP组、荷瘤T细胞组和荷瘤T细胞+TP组,TP终浓度为4.18μmol·L~(-1),处理72 h后收集培养的胸腺细胞,Guava ViaCount流式细胞术检测细胞存活率,Annexin V-FITC和PI检测细胞凋亡,CD4-FITC和CD8a-Per CP双标记检测细胞的分化成熟。结果正常T细胞组细胞存活率为(26.70±2.40)%,而加入TP后细胞存活率为(36.50±2.00)%,两组比较有显著差异(P<0.05);荷瘤T细胞+TP组细胞存活率为(20.70±2.20)%,与荷瘤T细胞组细胞存活率(17.80±1.30)%相比无显著差异(P>0.05)。正常T细胞组早期凋亡和晚期凋亡细胞百分比分别是(28.07±1.43)%和(8.45±0.48)%,加入TP后,早期凋亡和晚期凋亡细胞百分比分别是(15.90±0.45)%和(5.10±0.21)%,加药前后比较均有显著差异(P<0.01)。正常T细胞组CD4~+和CD8~+双阳细胞的比例为(70.50±1.91)%,经TP处理后CD4~+和CD8~+双阳细胞的比例降低为(55.30±3.81)%,比较有显著差异(P<0.01)。正常T细胞组CD4~+或CD8~+单阳细胞的比例分别为(22.13±1.12)%和(6.74±0.36)%,而经TP处理后CD4~+或CD8~+单阳细胞的比例分别为(34.87±2.77)%和(9.65±0.61)%,均显著增加(均P<0.01)。结论 TP能促进正常胸腺T细胞存活,抑制凋亡,并诱导其分化成熟。     

雌激素对脂肪的影响研究进展

肥胖症是一种复杂的多因素疾病,是糖、蛋白质和脂肪的代谢异常所致的脂肪存储量显著增加。成年女性随着年龄增长而出现体脂量明显增加的趋势,且绝经期后随着性激素水平的骤然下降--尤其是雌激素水平的降低,机体的脂肪细胞分化异常所造成的脂肪蓄积,主要集中在身体的中央(主要是腹部、臀部)区域。而绝经妇女性激素结合球蛋白水平与肥胖,尤其是腹型肥胖具有高度负相关性[1]。就许多疾病而言,局部脂肪异常堆积相较全身体脂含量的增多可能是更重要的     

外部机械力如何影响干细胞的命运

<正>据Kim TJ 2015年2月12日(e Life,2015,doi:http://dx.doi.org/10.7554/e Life.04876)报道,美国研究人员成功揭示了如何利用机械力来诱导细胞中的关键信号通路。用光学镊子将小珠子吸附到人类干细胞外部后,利用小珠子对干细胞的挤压作用帮助释放细胞中储存的钙离子,并且开启细胞膜中允许离子流入细胞的通道。对干细胞施加机械力会产生一种重要的效应,研究人员据此揭示了干细胞分化背后的许多功能性机制,干细胞周围的机械环     

THY1蛋白在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的探讨胸腺细胞分化抗原1 (THY1)蛋白在上皮性卵巢癌发生发展中的作用。方法选取陕西省第二人民医院2014年3月-2018年3月病理科存档临床病例资料完整的石蜡病理组织,并通过病理分型将其分为3组:上皮性卵巢癌组、卵巢良性肿瘤组及正常卵巢组。应用免疫组化SP染色法,检测上皮性卵巢癌、卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织石蜡切片中THY1蛋白的表达情况。结果对比卵巢良性肿瘤组、对照组以及上皮性卵巢癌组的THY1蛋白表达水平,后者表现出最高水平,组间比较,差异有统计学意义(P0. 05); THY1蛋白的表达与上皮性卵巢癌的临床分期及病理分级有关,差异有统计学意义(P0. 05)。结论 THY1蛋白参与上皮性卵巢癌的发生发展过程。     

肥胖病人异位及血浆脂质水平与骨髓脂肪呈正相关

正目的观察异位及血浆脂质水平与骨髓脂肪的相关性,其推论假设是:作为干细胞分化的标志,青年男性与女性肥胖者的异位及血浆脂质与骨髓脂肪可能呈正相关。方法     

靶向下调上皮细胞黏附分子对结直肠癌干细胞功能及药物敏感性的影响

目的研究靶向下调上皮细胞黏附分子(ECAM)对结直肠癌干细胞增殖、侵袭及药物敏感性的影响。方法用肿瘤微球法从人结直肠癌细胞系LoVo中获取结直肠癌干细胞,用结直肠癌干细胞表面特殊标志物[ECAM和人类细胞分化抗原44(CD44)]对其进行鉴定并进行后续研究。用lipofectamine 2000脂质体介导完成转染,根据处理方法不同将细胞分为3组:实验组(ECAM抑制组),对照组(转染公共抑制剂lipofectamine 2000-抑制剂),空白组(不作任何处理),并进行培养,取3组对数期的细胞分别给予几个浓度(1,5,10,15,20,25,30,35,40,45,50 mg·L^-1)伊立替康和几个浓度(50,100,150,200,250,300,350,400,450,500,550,600 mg·L^-1)卡培他滨,继续培养。用实时荧光定量检测用药前后3组细胞中ECAM mRNA的表达水平,用噻唑蓝(MTT)法检测用药前后3组细胞的增殖能力和药物敏感性,用Transwell小室检测3组细胞的侵袭能力。结果在富集前后的LoVo细胞系中,EpCAM^+CD44^+双阳结直肠癌干细胞的百分率分别是0.95%,85.78%,与富集前比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。空白组、对照组和实验组中EpCAM mRNA的表达水平分别为8.17±0.64,7.94±0.83,2.16±0.12,对照组和实验组与空白组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);实验组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),说明3组细胞构建成功。空白组、对照组和实验组中侵袭细胞分别为79.22±5.25,80.12±4.89,31.23±2.36。对照组和实验组与空白组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);实验组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。空白组、对照组与实验组的伊立替康对结直肠癌干细胞的IC₅₀分别为(20.25±4.35),(19.22±3.99),(10.24±2.04)mg·L^-1;这3组的卡培他滨对结直肠癌干细胞的IC₅₀分别为(320.13±23.65),(315.79±21.03),(250.22±15.45)mg·L^-1,实验组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论靶向下调ECAM可以有效地抑制结肠癌干细胞增殖及侵袭能力,同时增强其对药物的敏感性。