EphB4信号通路对人胚胎神经干细胞自我更新、增殖、分化和凋亡的影响

目的本实验旨在研究EphB4是否参与调节了人胚胎神经干细胞的增殖、分化、凋亡活动,并探索其下游信号通路。方法培养原代人胚胎神经干细胞,使用沉默慢病毒与过表达慢病毒转染细胞,分别下调和上调EphB4蛋白表达水平。检测EphB4对细胞增殖、分化、凋亡的影响并探索其下游信号通路。结果 EphB4基因沉默后,抑制细胞增殖及向神经元分化,促进细胞向胶质细胞分化,对细胞凋亡无影响。EphB4基因过表达后,促进细胞增殖及向神经元分化,抑制细胞向胶质细胞分化,对细胞凋亡无影响。EphB4是通过下游信号通路Abl-Cyclin D1调节细胞增殖,此信号通路不参与EphB4在细胞分化方面的调节。结论 EphB4参与调节神经干细胞增殖,而且是决定神经干细胞向神经元分化还是向胶质细胞分化的开关,是调节干细胞增殖、迁移和分化的新信号通路,其很可能成为脑卒中后神经元修复的有效治疗靶点。     

急性心肌梗死后血管新生相关分子机制的研究进展

血管新生是指机体在正常生长发育过程中或创伤修复与缺血缺氧条件下,在原有血管丛基础上经出芽或其他方式形成新血管的过程。血管新生大致包括五个阶段:血管基底膜降解、内皮细胞增殖、血管芽生、管腔形成、血管网络稳定及成熟。在缺血性心脏病中,急性心肌梗死严重威胁着人类的健康,其病理特点是心肌血管的狭窄和堵塞,导致心肌梗死。因此,促血管新生成为治疗缺血性心脏病的方法之一。多种促血管生成的细胞因子参与到血管新生的过程中,如多肽类生长因子和脂类介质。本文就缺血性心肌梗死后心肌促血管生成因子的表达做一综述。     

延长溶栓时间窗在缺血性脑卒中tPA治疗的临床前研究进展

脑卒中(stroke)是中老年人常见疾病,其具有高发病率、高死亡率和高致残率等特点,已严重威胁人类健康。目前为止,溶栓治疗是缺血性脑卒中最有效的治疗方法,组织型纤溶酶原激活剂(tissue type plasminogen activator,t PA)是唯一被美国FDA批准用于治疗脑卒中的溶栓药物。然而t PA的时间窗只有4.5 h,很少一部分人会在时间窗内接受溶栓治疗,并且当t PA的治疗时间窗超过4.5 h,会显著增加出血性转化(hemorrhagic transformation,HT)的发生率,从而导致脑卒中患者死亡率显著增加。在临床上通常使用联合用药的治疗策略来延长t PA的治疗时间窗,从而减少溶栓带来的不利影响。HT是急性缺血性卒中患者使用组织型纤溶酶原激活剂溶栓治疗后最严重的并发症,极大地限制了t PA的临床应用。本文主要综述了在动物试验中与t PA联合使用能扩大t PA的治疗时间窗并且不增加出血性转化风险的药物,旨在为提高t PA的整体疗效提供研究基础。     

心脏发育过程中的分子调控

心脏是脊椎动物胚胎发育过程中第一个发育的器官,动物的生命活动全都依赖于它的供能。成年人心脏的功能异常是全球上引起死亡发生的主要原由,因此对心脏功能的研究尤为重要。目前对心脏功能的认识已经从生理角度逐渐深入到基因和分子对其的影响。近年来的研究更是发现有关前体细胞分化以及心肌细胞增殖过程的分子机制。这些发现为心脏疾病的治疗和保护提供新的手段,同时也带来更多新的问题和挑战。因此,本文按照心脏的发育大致过程总结了各阶段的分子调控,以期为治疗心脏疾病的研究提供一些理论基础。     

3D-TSE-T2加权像纵向观察猫脑皮质脊髓束早期Wallerian变性

目的 研究猫脑皮质脊髓束早期Wallerian变性(WD)在3D-TSE-T2加权像上信号强度动态变化过程。方法 对8只家猫实施单侧皮质脊髓束(CST)起源脑区切除术,选取连续的8个时间点,即建模前、建模后2天、4天、6天、8天、10天、20天、30天进行MR T2加权扫描。通过放置感兴趣区(ROI),分别获得患侧与健侧皮质脊髓束走行区的T2信号强度值(T2s),计算患侧与健侧T2s比值即相对T2信号强度(rT2s)。结果 手术后至第4天,T2WI未见明显异常信号,rT2s值相对稳定;第6~10天,T2WI见患侧开始出现异常低信号,rT2s值急剧下降;第10~30天内,患侧仍表现为T2WI明显低信号,rT2s值保持相对稳定,但30天时rT2s值有升高趋势。结论 T2WI能比较敏感地监测早期WD。     

新生鼠心肌再生相关调节机制的研究进展

心血管疾病是一种危害人类健康的疾病,心肌梗死导致的收缩性心力衰竭是造成死亡的主要原因。既往观点认为,成年哺乳动物心脏中心肌细胞自我增殖更新能力有限,而近年来大量报道指出,哺乳动物在出生早期具备心肌再生的能力,并且其强度足以修复受损的心脏组织。新生鼠心肌再生现象的发现,为探讨影响心肌再生的相关机制提供了理想的动物模型,继而许多能够逆转心肌细胞周期阻滞和促进心肌再生的调控机制得以揭示。本文基于近几年开展的有关新生鼠心肌再生的研究,综述了影响心肌再生基因表达的因素(ncRNAs、转录因子等)、心肌再生相关信号通路和非心肌细胞(细胞外基质、免疫反应、心外膜等)对心肌再生的调节作用,以期为实现成年哺乳动物心肌损伤后心肌再生提供方向。     

多巴胺诱导SH-SY5Y多巴胺能细胞凋亡

目的 动态研究多巴胺对多巴胺能神经细胞的细胞毒作用.方法 用不同浓度的多巴胺处理SH-SYSY细胞,在一定时程内的不同时间点观察细胞活性,各种氧化应激指标.结果 研究发现多巴胺作用于多巴胺能细胞系SH-SY5Y,可导致细胞存活率明显减少,细胞存活率的下降呈时间与浓度依赖;多巴胺处理后,细胞的氧化应激指标OH-自由基、超氧化物岐化酶(SOD)、线粒体膜电位(△ψM)、活性氧(ROS)均有不同程度的改变.结论 本次实验结果提示多巴胺对多巴胺能细胞的毒性是通过氧化应激途径起作用的.     

莫诺苷对脑缺血再灌注大鼠皮层肝细胞生长因子及血管性血友病因子表达的影响

目的研究莫诺苷对脑缺血再灌注7 d大鼠患侧皮层肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)及血管性血友病因子(von willebrand factor,v WF)表达的影响。方法 25只健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠采用改良Zealonga线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,术后随机分为假手术组、模型组、莫诺苷小剂量组、中剂量组及大剂量组,每组5只。造模后3 h按照30,90,270 mg/kg剂量每天一次灌胃给予莫诺苷。免疫印迹法和免疫荧光法分别检测莫诺苷对脑缺血再灌注7 d大鼠患侧皮层HGF及v WF表达的影响。结果脑缺血再灌注7 d后,免疫印迹法显示,与假手术组相比,模型组HGF蛋白表达显著升高(P0.01);同模型组相比,莫诺苷给药组(30 mg/kg、90 mg/kg、270 mg/kg)HGF蛋白表达水平均显著升高(P0.05,P0.01,P0.001)。免疫荧光法显示,与假手术组相比,模型组v WF表达显著升高(P0.001);同模型组相比,莫诺苷中、大剂量组(90 mg/kg、270 mg/kg)v WF表达显著升高(P0.01,P0.001)。结论莫诺苷可以上调HGF及v WF在脑内的表达,促进局灶性脑缺血大鼠血管新生。     

炎症在梗死心肌损伤与修复中的作用

炎症在心肌梗死后心肌损伤与修复中扮演着重要的角色,其中Ly6C~(Lo)单核细胞、M2巨噬细胞及CC类趋化因子受体2(CCR2)阴性巨噬细胞可能有助于心肌梗死后心肌再生修复。同时,心肌梗死后单核/巨噬细胞释放大量的炎症因子,如白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-10、CCR2等,它们也发挥重要作用。研究已经表明心肌梗死后强烈的炎症反应是造成心肌组织继发性损伤的重要因素,因此通过药物等外界手段抑制心肌梗死后的炎症反应,减轻心脏损伤,保护心肌组织,可能会为心肌梗死后的心肌再生修复提供新的策略。     

PBL与临床案例结合促进内科教学的思考

PBL教学法与案例教学相结合,发挥两种教学方式的优势,即可以强化基本理论知识的学习,提高学生自主学习的能力;又可以从案例教学中探索疾病发生发展的病理生理学过程,从问题到思考,从理论到临床,达到深化理论强化实践的真正统一。