TLR3激动剂对B细胞功能的影响

目的观察TLR3激动剂Poly I:C对B细胞功能的影响,包括细胞增殖、共刺激分子表达、细胞因子和抗体的分泌情况。方法利用免疫磁珠法分选小鼠脾脏CD19+B细胞,RT-PCR法证实其表达TLR3。体外用Poly I:C刺激B细胞一定时间后,CFSE分裂法检测B细胞增殖,流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测B细胞表面共刺激分子表达,CBA(cytometric bead ar-ray)法或ELISA法检测培养上清中细胞因子含量,CBA法检测B细胞分泌Ig的亚型。结果 Poly I:C可以促进B细胞增殖,上调B细胞表面CD40、CD80、CD86和MHC II类分子的表达,促进IL-6和TNF-α的高分泌,诱导IgG1κ抗体的产生。结论 Poly I:C可以通过促进增殖、细胞因子分泌,诱导抗体产生和上调共刺激分子表达等多方面调节B细胞功能。     

分泌IFN-γ的杀伤性树突状细胞的体外诱导培养及鉴定

目的从体外诱导的骨髓来源的树突状细胞（dendritic cells,DC）中分离分泌IFN-γ的杀伤性树突状细胞（IFN-γproducing killer dendritic cells,IKDC）.方法取C57BL/6小鼠骨髓细胞,以小鼠重组GM-CSF和IL-4协同诱导下培养.培养第6天,加LPS刺激.培养第7天,收集细胞,通过流式细胞仪（flowcytometer,FCM）分选出CD11clowB220＋NK1.1＋的细胞,FCM进一步鉴定其表型.并将其与肿瘤细胞系B16F10共培养24 h后,CBA（cytometric bead array）法检测共培养上清中IFN-γ的分泌水平.结果体外培养的骨髓来源的DC中,FCM检测存在CD11clowB220＋NK1.1＋的细胞,进一步鉴定发现其高表达CD49b,低表达MHC II类分子,不表达Gr-1分子;并且与肿瘤细胞B16F10共培养后可分泌大量IFN-γ.结论通过FCM分选的方法可从体外培养的骨髓来源的DC中获得IKDC.     

T细胞受体基因转染过继性免疫治疗的研究进展

利用T细胞进行过继性免疫治疗是治疗病毒感染性疾病和肿瘤的理想方法,但是用于治疗的T细胞的特异性、亲和性和数量等限制了其应用,如何获得特异、高效、一定数量的T细胞是目前亟待解决的问题。采用TCR基因转染的方法,将特异性高亲和力TCR转移到受体的T细胞中,可以特异性杀伤受体体内的肿瘤细胞。     

红内期疟原虫不同发育阶段对检测结果的影响

目的观察红内期疟原虫期态对实验室常规检测的影响。方法使用5%山梨醇同步化法对恶性疟原虫3D7虫株进行连续两次同步化处理,收集不同时间段的虫血(间隔6 h),分别进行镜检、巢式PCR以及流式细胞术检测,并进行比较分析。结果采用镜检方法检查红内期疟原虫时,滋养体、裂殖体期疟原虫较环状体更易检获;采用巢式PCR检测,并对电泳结果进行灰度分析,其9个时间点的灰度值分别为20.80、38.23、57.52、86.28、114.83、312.04、347.39、376.95和484.99,其中0 h与6 h、6 h与12 h之间的差异均无统计学意义(P>0.05),12 h及之后收集的疟原虫其灰度值均有统计学意义(P<0.05);采用流式细胞术检测,以环状体为主的疟原虫荧光强度较弱,产生的峰形较高且窄,滋养体、裂殖体疟原虫所发出的荧光强度逐渐增强,产生的峰逐渐变低、变宽。结论采用镜检法、巢式PCR以及流式细胞术3种方法检测红内期不同发育期疟原虫的结果不同,因此在疟疾的实验室诊断中应考虑疟原虫期态对检测结果的影响。     

共表达膜型IL-15和RAE的细胞克隆的筛选和鉴定

目的筛选能够共表达膜型IL-15和RAE的细胞株,为扩增和活化特定免疫细胞提供有效的实验工具。方法前期工作中已通过潮霉素筛选获得共表达膜型IL-15和RAE的BaF3细胞,但阳性细胞所占的比例较低。本实验通过有限稀释法先筛选高表达RAE的单克隆细胞株,再筛选高表达膜型IL-15的单克隆细胞株,最终获得了1株共表达膜型IL-15和RAE的单细胞克隆。将该细胞株与NK细胞共培养后,通过IFN-γ的分泌验证其生物学活性。结果流式细胞仪证实该细胞株能够高水平共表达膜型IL-15和RAE。并具有很强的活化NK细胞的效应。结论成功地制备了共表达膜型IL-15和RAE的单克隆细胞株,为活化特定免疫细胞,如IKDC和NK细胞提供实验工具。     

蠕虫感染与过敏性和自身免疫性疾病

许多研究发现蠕虫感染后虫源性分子诱导免疫细胞形成免疫调节网络,介导免疫抑制,从而抑制过敏性和自身免疫性疾病。寄生虫可以通过诱导免疫调节细胞活化和产生细胞因子发挥抑制效应,从而影响其他免疫相关疾病。然而,蠕虫感染与免疫相关疾病之间的调节机制尚无明确的结论。一些蠕虫感染可以保护和控制过敏性疾病,而另一些蠕虫却加剧疾病的免疫病理损害。     

钩虫病防治研究进展

钩虫病(ancylostomiasis)是由钩虫寄生人体引起以缺铁性贫血和营养不良为主要临床表现的疾病。主要病原是十二指肠钩口线虫(Ancylostoma duode-nale)和美洲板口线虫(Necator americanus)。钩虫病在临床上可分为钩蚴皮肤(黏膜)侵入期、钩蚴肺部移     

人体寄生虫学开展研究性教学的探索

人体寄生虫学是临床医学和预防医学的主要基础课程之一,也是基础医学与临床医学的桥梁。课堂教学中进行研究性教学,采用病例导入的形式,并结合不同的专业侧重于不同的内容,既有助于学生对课程内容的理解和掌握,更有利于培养学生的创新思维,提高其综合分析问题的能力。