高迁移率族蛋白1参与脓毒症大鼠急性呼吸窘迫综合征时中性粒细胞的凋亡

目的 探究脓毒症大鼠急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)时高迁移率族蛋白1(high mobility group box 1,HMGB1)参与中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophils,PMN)凋亡延迟的相关机制及正丁酸钠(sodium butyrate,SB)的干预效果. 方法 采用随机数字表法将90只健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为正常对照组(NS组,6只)、内毒素(lipopolysaccharide,LPS)致伤组(LPS组,42只)、HMGB1抑制剂SB干预组(SB组,42只),LPS组、SB组又分为7个时相点(LPS致伤后0.5、1、2、6、12、24、48 h),每个时相点6只动物.LPS组,腹腔注射LPS 5 mg/kg;SB组,腹腔注射LPS 5 mg/kg后0.5 h静脉注射SB,每次剂量500 mg/kg;NS组,腹腔注射生理盐水1 ml.LPS组、SB组于LPS注射后各时点,颈静脉取血检查PMN,取血后左肺灌洗收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF),取右肺中叶行HMGB1 mRNA检测;于LPS注射12h时点(NS组大鼠留取颈静脉血、收集BALF、取右肺中叶行HMGB1 mRNA检测),3组大鼠收集左肺BALF后,取右肺下叶检测肺组织湿/干重比(wet/dry weight ratio,W/D),取右肺上叶进行病理组织学检查;于24、48 h时点,LPS组、SB组取右肺下叶检测肺组织W/D、取右肺上叶进行病理组织学检查. 结果 与NS组比较,LPS组肺组织中HMGB1 mRNA表达量明显增高,24 h达最大值,差异有统计学意义(P＜0.05);SB组的HMGB1 mRNA表达量减少,差异有统计学意义(P＜0.05).LPS组BALF中凋亡早期PMN表达量与NS组类似,但凋亡晚期PMN变化则不同,LPS组外周血中凋亡晚期PMN细胞高于NS组(P＜0.05),LPS组BALF中凋亡晚期PMN细胞均低于NS组(P＜0.05).LPS 12 h组BALF的PMN百分比明显高于NS组[(49.1±6.8)、(2.7±0.5)],差异有统计学意义(P＜0.01).LPS组肺组织光镜下可见肺泡腔水肿,支气管壁中发现PMN浸润,肺泡壁毛细血管扩充血.LPS24 h组肺组织的W/D明显高于NS组[(6.71±0.12)、(4.18±0.26)],差异有统计学意义(P＜0.05).SB干预组的HMGB1 mRNA表达量减少,早期凋亡率类似,SB组的BALF晚期凋亡率高于同时点LPS组的BALF,SB外周血组晚期凋亡低于同时点LPS外周血组,差异有统计学意义(P＜0.05).SB组BALF的PMN百分比、肺组织病理损伤程度、W/D均低于LPS组,差异有统计学意义(P＜0.05). 结论 在大鼠ARDS中,HMGB1 mRNA表达较晚,但持续时间长,SB对HMGB1有潜在的治疗作用,HMGB1可能参与PMN凋亡机制的调节.     

罗哌卡因切口周围局部浸润对大鼠慢性术后疼痛的抑制作用

目的 评价术中不同浓度罗哌卡因切口周围局部浸润对慢性术后疼痛的抑制作用. 方法 雄性SD大鼠30只,体重180 g～220 g,按随机数字表法分为5组,每组6只:假手术组(S组)、生理盐水组(R0组)、0.5％罗哌卡因组(R1组)、0.75％罗哌卡因组(R2组)、1％罗哌卡因组(R3组).按Flatters法制作皮肤/肌肉切开牵拉模型(skin/muscle incision and retraction,SMIR),S组大鼠除未进行SMIR之外其他操作均与其他组相同.应用yon Frey细丝法测定术前及术后1、3、7、10、14、17、21、24、28 d的机械缩足反射阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT). 结果 各组术前PWMT基础值差异无统计学意义(P＞0.05);与R0组比较,R1组PWMT于术后1、3、7、10、14、17、24d升高[(20.9±3.7)、(14.8±4.6)、(15.8±4.4)、(13.9±1.6)、(9.8±0.8)、(10.2±1.3)、(10.3±2.7) g](P＜0.05),R2组[(21.0±5.2)、(21.3±3.9)、(15.3±4.1)、(18.4±3.3)、(12.1±1.1)、(11.5±1.6)、(14.1±1.9)、(13.2±3.0)、(9.5±2.4)g]和R3组[(22.2±2.9)、(22.5±4.1)、(22.1±4.7)、(23.8±0.9)、(18.2±3.2)、(15.7±3.2)、(21.3±3.9)、(18.4±4.2)、(21.0±4.2) g]PWMT在术后所有时间点均升高(P＜0.05). 结论 术中罗哌卡因切口周围局部浸润可以抑制慢性术后疼痛.     

冷诱导RNA结合蛋白在脑缺血中的作用

背景 冷诱导RNA结合蛋白(cold-inducible RNA binding protein,CIRP)是一种低温诱导的,在脑组织广泛表达的冷休克蛋白.新近研究表明CIRP在缺血诱发的脑损伤中发挥重要的作用. 目的 对CIRP在脑缺血中的作用及相关研究进展进行综述. 内容 概述了CIRP的结构特征及其在脑部的表达情况,阐述了其在脑缺血中的作用. 趋向 CIRP的具体作用机制尚不明确,但对其机制的研究为治疗脑缺血提供了新的方向.     

不同剂量右美托咪定镇静程度及顺行性遗忘作用研究

目的 观察不同剂量右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)对下腹部手术患者术中镇静程度及顺行性遗忘作用的影响. 方法 选择美国麻醉医师协会(ASA)分级Ⅰ～Ⅱ级,年龄20岁～60岁,在腰麻硬脊膜外联合阻滞麻醉下复合Dex行下腹部手术(剖宫产术除外)的患者200例,其中男101例,女99例.采用随机数字表法进行分组,根据给予生理盐水或Dex维持剂量的不同分为4组(每组50例):生理盐水组(De0组)、0.2 μg·kg1·h-1组(De1组)、0.4 μg· kf-1·h-1组(De2组)、0.6 μg· kg-1·h-1组(De3组).采用改良警觉/镇静观察评分(observer's assessment of alertness/sedation,OAA/S)法,观察Dex泵入后5 min(T1)、10 min(T2)、15 min (T3)、20 min(T4)、25 min(T5)、30 min(T6)、40 min(T7)和50 min(T8)各时间点患者镇静程度及术后24 h顺行性遗忘情况. 结果 De0组各时间点的OAMS法评分均为(5.00±0)分,De1组、De2组、De3组随着时间的延长,泵入Dex剂量的逐渐增大,OAMS评分逐渐减小(P＜0.05):De1组T2～T8评分依次为(3.15±0.37)、(3.26±0.44)、(2.70±0.66)、(2.55±0.60)、(2.40±0.60)、(2.05±0.76)、(2.02±0.73)分;De2组T2～T8评分依次为(3.10±0.64)、(2.95±0.51)、(2.35±0.67)、(2.25±0.55)、(2.10±0.45)、(1.60±0.50)、(1.65±0.49)分;De3组T2～Ts评分依次为(3.10±0.31)、(2.65±0.49)、(1.95±0.39)、(1.90±0.45)、(1.75±0.44)、(1.20±0.62)、(1.25±0.64)分.De0组无遗忘病例为50例;De1组、De2组、De3组无遗忘病例明显减少(P＜0.05):De1组完全遗忘4例,部分遗忘35例,无遗忘11例;De2组完全遗忘15例,部分遗忘29例,无遗忘6例;De3组完全遗忘29例,部分遗忘19例,无遗忘2例. 结论 Dex具有良好的镇静以及一定的顺行性遗忘作用,且呈剂量依赖性.     

鞘内注入醋酸泼尼松龙对大鼠镇痛作用及脊髓c-fos表达的影响

目的 :探讨鞘内注入泼尼松龙镇痛作用及其对脊髓c fos表达的影响与神经毒性作用。方法 :慢性鞘内置管的SD大鼠 2 4只 ,随机分为实验组 2 0只 ,对照组 4只。实验组又分成两个亚组 ,用药组 (EP组 ,n =10 ) ,生理盐水组 (EN组 ,n =10 ) ;对照组分为二个亚组 ,用药组 (CP组 ,n =2 ) ,空白对照组 (CE组 ,n =2 )。EP组经导管鞘内注入泼尼松龙 2mg/kg ,1小时后行福尔马林试验 ,进行行为学评分并计算痛级均数 ;2小时后灌注、固定 ,取脊髓腰膨大用ABC法行c fos免疫组化反应及病理检验 ,记数脊髓背角c fos阳性神经元数 ,并与鞘内注入等量生理盐水组 (EN )相比较。结果 :实验各组痛级均数比较有显著差异 (P <0 .0 5 ) ;脊髓腰膨大背角Ⅰ、Ⅱ层c fos阳性神经元数EP组有减少趋势 ,但无显著差异 ;腰膨大病理检验未示异常。结论 :鞘内注入泼尼松龙有镇痛作用 ,无神经毒性作用。     

神经末梢给药吸收途径及其效应特点

目的：临床上给药均依托血液、淋巴系统吸收、转运、分布到全身靶组织。本文探讨神经末梢吸收药物途径及其临床应用价值。资料来源：应用计算机检索万方数据库1990—01／2005—12期间的有关皮内、穴位注射、贴敷的文献，检索词“神经末梢、吸收、皮内、穴位、注射、贴敷”，限定文章语言种类为中文。并手工查阅相关书籍。资料选择：对资料进行初审，删除明显不随机临床试验．然后查找余下的文章全文，进一步判断是否为随机对照实验。纳入标准：①随机对照实验，无论是否为单盲、双盲、或非盲法。（固平行对照组，为未采用经皮内、穴位注射或敷贴者。治疗组为经皮内、穴位注射或敷贴者。排除标准：明显不随机的临床实验。质量评价主要考察治疗的真实性，调查设计是否严密，实施过程是否严格，统计学处理是否合理。资料提炼：共检索20篇关于研究神经末梢吸收和皮内、穴位注射、贴敷的随机对照试验，11篇符合纳入标准。排除的9篇均是重复的同一研究。资料综合：无论是传人神经还是传出神经，在其末梢部位都存在着一定选择性的吸收功能。当药物被分布到神经末梢部位后，特别是皮内、穴位、黏膜和某些部位的肌肉等神经末梢密集区，可被神经末梢吸收到神经细胞内．并随轴浆远程转运到脊神经节、交感神经节、脊髓前角的胞体及其轴突、树突，进而到达相应的中枢神经部位及所联系的组织、器官，在局部形成较高药物浓度发挥药物作用。对一些小分子亲水性药物，还有可能通过神经细胞的缝隙连接实现跨细胞转运，从而发挥更广泛的作用。结论：在特定区域的皮内及穴位等神经末梢丰富的部位给药，可通过“神经末梢吸收一轴浆转运一缝隙连接传递一靶组织、靶器官效应”发挥作用。、由于该途径给药可在对应的靶组织、靶器官局部形成较高浓度，故具有较高临床价值。     

缺血预处理对离体大鼠肺缺血再灌注氧化损伤的影响

目的：研究缺血预处理（IP）对离体大鼠肺缺血再灌注氧化损伤的影响。方法：建立离体大鼠肺缺血再灌注损伤模型。18只SD大鼠随机分为3组，每组6只。对照组（Con)持续平衡灌注通气60min，无缺血；缺血再灌注组（IR）缺血45min，再灌注30min；缺血预处理组（IP）先给予连续2次的5min缺血、5min再灌注的预处理，再行缺血45min和再灌注30min。测定缺血前和再灌注末灌注液中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和白细胞数量，测定再灌注末肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性、黄嘌呤氧化酶（XOD）活性和湿／干比（W／D）。结果：IR组再灌末MDA含量、MPO活性、XOD活性和W／D较Con组明显升高（P＜0．01），而SOD活性则显著下降（P＜0．01）。IP能明显减少再灌后MDA、MPO、XOD和W／D的增加，提高SOD的活性（P＜0．01）。结论：IP能明显抑制离体大鼠肺缺血再灌注导致的氧化损伤。     

不同浓度高渗高胶液对失血性休克合并肺损伤兔肺功能及血浆炎症因子表达的影响

胸部创伤导致的失血性休克合并肺损伤是目前较为常见的生产和交通意外,失血性休克的院前及院内早期首要处理就是液体复苏,复苏液选择不当可能诱发或加重急性肺损伤(acute lung injury,ALl)/ARDS,加之肺部的直接损伤,使得失血性休克合并肺损伤更易发生ARDS,ARDS往往是失血性休克复苏后延迟死亡的首发和主要原因,因而选择具有肺部保护功能的复苏液体成为治疗失血性休克合并肺损伤的关注焦点之一.研究表明,高渗高胶液通过抑制炎症细胞的激活和减少炎症介质释放从而保护肺功能[1].笔者以林格液为复苏对照,探讨不同浓度高渗高胶液对失血性休克合并肺损伤兔肺功能及血浆炎症因子(IL - 1β 、IL -6、IL -8)表达的影响.     

大鼠CRH基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定

目的：构建针对大鼠促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）基因的RNA干扰（RNAi）慢病毒表达载体并进行鉴定。方法针对CRH基因设计4个RNAi靶点并分别构建入慢病毒骨架载体,测序鉴定。过表达质粒和RNAi质粒共转染293T工具细胞后,用Western blot进行外源筛靶以确定有效靶序列。有效RNAi病毒质粒与辅助质粒通过Lipofectamine 2000共转染293T细胞,培养48 h后,收集细胞培养上清液,将其浓缩后用孔稀释法测定病毒滴度。结果 Western blot外源筛靶显示3个靶点能有效敲减目的基因的表达。测定浓缩病毒悬液的滴度为1．5×109 T U／ml。结论成功构建了CRH基因的RNAi慢病毒载体,可用于CRH在应激反应中作用的研究。