p21小干扰RNA对低浓度过氧化氢诱导的黑素细胞提前衰老和黑素传递的影响

目的:探讨小干扰RNA(siRNA)抑制p21表达对低浓度过氧化氢(H_2O_2)诱导的黑素细胞提前衰老的影响,以及黑素细胞提前衰老与黑素传递功能间的关系。方法:p21 siRNA序列转染黑素细胞,采用荧光显微镜、实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)及western blot检测抑制效率。将正常人黑素细胞分为对照组(阴性siRNA转染处理)、p21 siRNA组(p21 siRNA转染处理)、阴性siRNA+H_2O_2组(阴性siRNA转染24 h后加入400μmol/L H_2O_2处理)及p21 siRNA+H_2O_2组(p21 siRNA转染24 h后加入400μmol/L H_2O_2处理)。采用β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老;EdU细胞增殖检测细胞增殖能力;western blot检测各组p21和树突调节蛋白[RhoA、Rac1及细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)]表达;免疫荧光检测细胞骨架蛋白和黑素小体分布。结果:p21siRNA转染黑素细胞后明显抑制p21 mRNA和蛋白表达(P0.05)。与阴性siRNA+H_2O_2组比较,p21 siRNA+H_2O_2组β-半乳糖苷酶染色阳性率降低、细胞增殖能力增加及p21蛋白表达降低(P0.05)。与对照组比较,阴性siRNA+H_2O_2组树突负性调节因子Rho A蛋白表达升高,而正性调节因子Rac1及Cdc42蛋白表达均降低,且细胞骨架蛋白及黑素小体荧光强度均降低(P0.05)。经p21siRNA预处理后,p21 siRNA+H_2O_2组较阴性siRNA+H_2O_2组Rho A蛋白表达降低,Rac1和Cdc42蛋白表达均增高,且细胞骨架蛋白及黑素小体荧光强度均增高(P0.05)。结论:低浓度H_2O_2诱导提前衰老的黑素细胞存在黑素传递功能障碍,p21 siRNA可改善低浓度H_2O_2诱导的黑素细胞提前衰老以及受损的黑素传递功能。     

两种方法治疗难治性毛发变白白癜风疗效及影响因素评价

目的：比较改良方式的308 nm准分子光与CO2点阵激光分别联合卡泊三醇搽剂外用治疗难治性毛发变白白癜风疗效,并评估其疗效的影响因素。方法：收集2019年5月—2019年8月于南京医科大学第一附属医院皮肤科门诊就诊的常规药物或光疗3个月以上无效的毛发变白白癜风患者共60例,随机分为改良照光组（A组）和点阵激光组（B组）,改良照光组以一块形状与白斑相同,边缘距白斑边缘内侧1 mm的不透光黑布紧贴于白斑表面,308 nm准分子光照射区域局限于白斑边缘,每周3次,疗程为36次,共3个月,点阵激光组每月行点阵激光1次,疗程为3次,共3个月,两组均联合卡泊三醇搽剂外用。疗程结束后评估两组疗效及复色模式,并采集患者基本信息,采用单因素和多因素Logistic回归分析方法进行疗效影响因素分析。结果：改良照光组总有效率和总显效率（89.5%,50.9%）均显著高于点阵激光组（67.6%,22.1%）（P＜0.01）。改良照光组39片（68.4%）边缘复色,10片（17.8%）混合复色,6片（10.5%）毛囊复色,2片（3.5%）均一复色;点阵激光组49片（72.1%）边缘复色,9片（13.2%）毛囊复色,6片（8.8%）均一复色,4片（5.9%）混合复色。多因素Logistic回归分析显示,病程≤2年、复色无进展时间≤1年、无血清甲状腺抗体升高、白斑位于面颈部、非节段型白癜风是难治性毛发变白白癜风治疗显效的独立影响因素。结论：两种方法治疗难治性毛发变白白癜风均可在短期内起效,改良方式的308 nm准分子光照射联合卡泊三醇外用疗效更明显。边缘复色为主要复色模式。病程、复色无进展时间、血清甲状腺抗体是否升高、白斑部位和白癜风分型是影响难治性毛发变白白癜风疗效的重要因素。     

α-硫辛酸对黑素细胞氧化应激下的保护作用及抑制自噬机制的研究

目的:探讨α-硫辛酸(α-LA)对体外培养的人黑素细胞氧化损伤的保护作用。方法:以不同浓度的α-LA(100、200及400μmol/L)预处理正常人黑素细胞12 h,再加入500μmol/L H_2O_2处理6 h。采用CCK-8试剂盒检测黑素细胞活力,流式细胞仪分析细胞内活性氧(ROS)含量、钙离子水平及细胞周期,线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)分析线粒体膜电位,图像分析软件测量树突回缩速率,透射电镜观察超微结构以及western blot检测LC3和p62蛋白表达情况。结果:正常情况下α-LA能显著提高黑素细胞的活力,同时还能明显降低氧化应激时黑素细胞内ROS水平,减轻细胞内超微结构的损伤,阻止线粒体去极化及细胞内钙离子的累积,延缓树突的回缩,促进增殖及降低过度激活的自噬水平(P0.05)。结论:α-LA不仅能在正常情况下显著提高黑素细胞的活力,而且可明显降低氧化应激下黑素细胞过度激活的自噬水平,对黑素细胞起保护作用。     

低浓度过氧化氢诱导人黑素细胞提早衰老

目的：本研究旨在探讨氧化应激在人表皮黑素细胞衰老中的作用。方法：以不同浓度的过氧化氢（0、200、400、600、800、1 000 μmol/L）处理人黑素细胞5 d后,检测分析其细胞活力和凋亡。通过评估衰老相关指标β?半乳糖苷酶染色、细胞增殖、细胞周期分析、E?钙黏素以及衰老基因表达等改变,探讨低浓度过氧化氢（0~400 μmol/L）对黑素细胞衰老进程的影响。结果：与对照组比较,当过氧化氢浓度为200 μmol/L和400 μmol/L时,细胞活力和凋亡未见显著性改变;高浓度的过氧化氢（600~1 000 μmol/L）可以明显诱导黑素细胞凋亡;400 μmol/L的过氧化氢则可使黑素细胞出现以细胞树突缩短、增殖减慢、β?半乳糖苷酶蓝染率增加、细胞周期阻滞于G2期、E?钙黏素表达降低及衰老相关蛋白p53和p21的表达增加等改变。结论：400 μmol/L浓度的过氧化氢刺激能诱导黑素细胞提早衰老。     

减重代谢术后维生素水平变化与脱发的相关性研究

摘 要 目的：探究减重代谢术后患者维生素水平变化与脱发的相关性，并筛选出与脱发相关的独立危险因素。方法：收集2021年3月 ~ 9月入住南京大学医学院附属鼓楼医院普外科行减重代谢手术的肥胖患者67例，依据术后3个月门诊随访时的皮肤镜影像学检查诊断分为未脱发组（24例）和脱发组（43例）。比较两组患者术后1月内及3月内维生素水平的变化量，并用Logistic回归分析筛选出影响患者术后脱发的独立危险因素。结果：患者脱发发生率为64.18%（43/67），开始脱发时间为术后（2.88 ± 0.87）个月。脱发组患者术后1月内叶酸和25-OH VD水平的变化量明显低于未脱发组（P ＜ 0.05），术后3月内VB12水平的变化量明显低于未脱发组（P ＜ 0.05）。多因素Logistic回归分析显示，术后1个月时，叶酸、25-OH VD的变化量是患者发生脱发的独立危险因素（P ＜ 0.05）；术后3个月时，VB12的变化量是患者发生脱发的独立危险因素（P ＜ 0.05）。结论：减重代谢术后1月内低叶酸、25-OH VD水平及术后3月内低VB12水平是术后脱发发生的独立危险因素，推荐术后3月内针对性补充叶酸、维生素D3和VB12，并定期进行维生素水平监测。