基于转录组测序方法研究加替沙星对小鼠的肝损伤作用

目的： 探讨加替沙星（GAT）对小鼠肝脏的损伤作用及其机制。方法： 选取32只SPF级雄性昆明小鼠作为研究对象，随机分为4组：低、中、高剂量（分别为25、50、100 mg/kg） GAT组和对照组。给药体积按10 mL/kg，连续灌胃给药7 d，对照组给予对应体积的生理盐水。通过检测各组小鼠血清中的谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（AKP）、肌酐（CRE）和甘油三酯（TG）浓度，初步评价加替沙星导致的小鼠肝组织损伤。进一步利用转录组测序技术检测各组小鼠肝脏的基因表达谱，筛选差异表达基因，对差异基因进行基因本体论（GO）功能分类，并采用京都基因与基因组百科全书（KEGG）数据库进行信号通路富集分析。结果： 与对照组比较，高剂量GAT组小鼠肝脏质量显著降低（P<0.01）；低、中剂量GAT组肝脏系数显著降低（P<0.01）；低、中剂量GAT组小鼠血清ALT浓度显著降低（P<0.05或0.01）；低剂量GAT组小鼠血清AST浓度显著降低（P<0.01）。与对照组比较，中剂量GAT组共筛选出27个差异表达基因（包括20个上调基因，7个下调基因）。GO功能分类提示这些基因主要富集在免疫系统、多细胞生物、多生物及生殖过程等17个生物过程中。KEGG通路分析提示差异基因主要富集于脂质代谢、萜类化合物和聚酮化合物的代谢等22条通路中。结论： GAT可导致小鼠肝功能发生变化，并通过影响小鼠肝脏内胆汁酸和胆固醇等内分泌系统和脂质代谢等的平衡，造成肝组织损伤。     

急性心肌梗死患者D二聚体质量浓度与远期预后的关系

目的 探讨急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者D二聚体(D-dimer)质量浓度与病情严重程度和远期心源性死亡的关系。方法 选取2013年1月至2020年1月收入首都医科大学附属北京友谊医院的AMI患者3 990例,根据D-dimer质量浓度分为3组:≤0.50 mg/L、0.51～0.80 mg/L、≥0.81 mg/L,平均随访时间为2.1 (1.0～4.0) 年。应用Cox比例风险回归模型评估D-dimer对心源性死亡的影响。结果 D-dimer≥0.81 mg/L组患者年龄较大、女性居多、体质量指数较低,既往合并高血压、糖尿病者较多,3支病变较为多见,住院期间肾小球滤过率较低,N末端B型利钠肽原峰值明显升高,左室射血分数<50%患者比例明显升高。D-dimer≥0.81 mg/L组患者在随访期间累计心源性病死率(18.7%)高于D-dimer≤0.50 mg/L组(2.3%)和D-dimer 0.51～0.80 mg/L组(6.1%),且校正其他危险因素后,D-dimer能独立预测AMI患者的心源性死亡(HR=1.71,95%CI:1.34~2.18,P<0.001)。结论 D-dimer能反映AMI患者病情的严重程度,且D-dimer升高可在一定程度上预测AMI患者远期心源性死亡事件发生率升高。     

基础疾病负担对药物性肝损伤严重程度及预后的影响

目的探讨基础疾病对药物性肝损伤(drug-induced liver injury,DILI)患者严重程度及预后的影响。方法纳入北京友谊医院肝病中心2016年1月至2019年12月符合入排标准的DILI患者,依据查尔森合并症指数(Charlson Comorbidity Index,CCI)分为显著基础疾病负担组(CCI>2分)和无或轻度基础疾病负担组(CCI≤2分),通过卡方检验及非参数检验分析两组患者临床特征、损伤程度及预后。结果313例DILI患者年龄为(54±14)岁,女性227例(72.5%),其中无或轻度基础疾病负担的患者272例(86.9%),显著基础疾病负担的患者41例(13.1%)。与无或轻度基础疾病负担组相比,显著基础疾病负担组年龄更大[(63±8)岁比(52±14)岁]、体质指数[(24.2±5.2)比(23.1±3.6)kg/m²]及谷氨酰转肽酶[初始值283.0(159.0,404.0)U/L比189.0(100.0,325.0)U/L;峰值335.0(239.0,582.0)U/L比219.0(131.0,360.0)U/L]更高,差异均有统计学意义(均P<0.01);严重程度及临床分型两组相比差异无统计学意义(P>0.05)。在本队列中,250例(79.9%)DILI患者恢复正常,41例(13.1%)发展为慢性DILI,22例(7.0%)需要肝移植或者死亡,显著基础疾病负担组全因病死率及非肝脏相关的病死率均显著高于无或轻度基础病负担组患者(19.5%比3.7%;12.2%比0.7%,均P<0.01)。结论基础疾病负担重的患者预后差,以非肝脏相关死亡为主。     

A DNA vaccine expressing an optimized secreted FAPα induces enhanced anti-tumor activity by altering the tumor microenvironment in a murine model of breast cancer

Cancer-associated fibroblasts (CAFs), major components of the tumor microenvironment (TME), promote tumor growth and metastasis and inhibit the anti-tumor immune response. We previously constructed a DNA vaccine expressing human FAPα, which is highly expressed by CAFs, to target these cells in the TME, and observed limited anti-tumor effects in the 4T1 breast cancer model. When the treatment time was delayed until tumor nodes formed, the anti-tumor effect of the vaccine completely disappeared. In this study, to improve the safety and efficacy, we constructed a new FAPα-targeted vaccine containing only the extracellular domain of human FAPα with a tissue plasminogen activator signal sequence for enhanced antigen secretion and immunogenicity. The number of CAFs was more effectively reduced by CD8⁺ T cells induced by the new vaccine. This resulted in decreases in CCL2 and CXCL12 expression, leading to a significant decrease in the ratio of myeloid-derived suppressor cells in the TME. Moreover, when mice were treated after the establishment of tumors, the vaccine could still delay tumor growth. To facilitate the future application of the vaccine in clinical trials, we further optimized the gene codons and reduced the homology between the vaccine and the original sequence, which may be convenient for evaluating the vaccine distribution in the human body. These results indicated that the new FAPα-targeted vaccine expressing an optimized secreted human FAPα induced enhanced anti-tumor activity by reducing the number of FAPα⁺ CAFs and enhancing the recruitment of effector T cells in the 4T1 tumor model mice.     

基于LC-MS的甘草炮制雷公藤降低肝毒性的代谢组学研究

目的 观察甘草炮制雷公藤Tripterygium wilfordii后对小鼠血清中代谢产物的影响，初步探讨其降低肝毒性的可能代谢通路。方法 将C57BL/6小鼠随机分为对照（Con）组、雷公藤（Raw）组、甘草炮制雷公藤（Pro）组，观察小鼠肝组织病理变化，检测小鼠肝功能生化指标、炎症因子水平；利用液质联用（LC-MS）技术结合代谢组学方法，对各组间的代谢差异进行表征。结果 与Raw组相比，Pro组小鼠肝组织损伤显著改善，肝功能生化指标、炎症因子水平显著降低，表明甘草炮制雷公藤后可以降低小鼠肝毒性；共筛选出脂肪酸、磷脂酸、甘油酯、磷脂酰胆碱、胆酸等12个潜在生物标志物，主要涉及脂肪酸生物合成、甘油磷脂代谢、花生四烯酸代谢等9个代谢通路。结论 甘草炮制雷公藤可有效降低小鼠的肝毒性，其机制可能与调节脂肪酸代谢等通路相关，为其临床合理应用提供参考依据。