UHPLC-MS/MS同时测定黄芩清热除痹胶囊中6种活性成分

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱同时测定黄芩清热除痹胶囊中6种成分（黄芩苷、栀子苷、木犀草素、齐墩果酸、薏苡素、苦杏仁苷）含量的方法。方法 采用Phenomenex Luna Omega C18色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.6 μm）,以含10 mmol/L甲酸铵的0.1%甲酸水溶液（A）-0.1%甲酸的乙腈（B）为流动相,进行梯度洗脱,柱温为30 ℃,流速为0.25 mL/min,进样量5 μL,分析时间10 min。采用电喷雾离子源,以多反应监测模式在负离子条件下进行检测。结果 所测6种活性成分在测定浓度范围内线性关系良好（r≥0.999 0）,精密度、稳定性和重复性良好,平均加样回收率为98.62%~103.7%,RSD≤2.70%。结论 该方法准确度高、分析速度快、检测限低、重复性高,适用于黄芩清热除痹胶囊质量控制。     

强力止晕汤治疗肝阳上亢兼痰湿中阻型后循环缺血性眩晕临床观察

目的 观察强力止晕汤治疗肝阳上亢兼痰湿中阻型后循环缺血性眩晕的临床疗效,及其对患者脑血流动力学参数的影响。方法 选取80例肝阳上亢兼痰湿中阻型后循环缺血性眩晕患者,采用随机数字表法将其分为对照组和治疗组,每组40例。对照组患者采用常规药物治疗,治疗组患者加用强力止晕汤,两组疗程均为14 d。治疗前后分别观察两组患者中医症状评分、椎-基底动脉血流改善情况,治疗14 d后及治疗后3个月的近期疗效和远期疗效,两组患者的不良反应。结果 治疗组患者治疗后眩晕、头痛、头重如裹、烦躁易怒、失眠多梦评分和总评分降低程度明显大于对照组（P<0.05）,左右椎动脉、基底动脉平均血流速度升高程度和左右椎动脉、基底动脉搏动指数降低程度均明显大于对照组（P<0.05）。治疗组的近期疗效和远期疗效均明显优于对照组（P<0.05）。两组不良反应（轻度胆红素异常、胃肠道反应、心慌）的总发生率差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 强力止晕汤对肝阳上亢兼痰湿中阻型后循环缺血性眩晕有较好的临床疗效。     

胶质细胞源性神经营养因子在大鼠神经病理性疼痛模型中的作用及机制研究

目的 探讨胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）通过PINK1/Parkin信号通路对大鼠神经病理性疼痛的作用及其机制。方法 将大鼠按随机数字表法分为Sham组、NP组和GDNF组。对大鼠的一般情况和行为学进行观察和测定;透射电镜观察大鼠脊髓;Western blotting法观察大鼠脊髓组织中PINK1和Parkin蛋白表达。结果 Sham组大鼠的情况良好;与Sham组比较,术后NP组大鼠侧肢体后爪有内收的现象,偶有大鼠跛行;GDNF干预后大鼠的情况明显好于NP组大鼠。3组大鼠机械缩足反射阈值（MWT）和热痛阀值（TWL）在坐骨神经压榨性损伤（CCI）的阈值无明显的变化（P >0.05）;术后3 d、7 d和14 d的MWT和TWL比较,NP组大鼠较Sham组大鼠降低（P <0.05）;NP组大鼠脊髓组织中完整自噬小体双膜结构较少,线粒体分别出现肿胀甚至空泡变性,还有大量的线粒体消失不见,少数出现与溶酶体融合;经过GDNF干预后,GDNF组大鼠在各个时间的MWT和TWL较NP组大鼠升高（P <0.05）;GDNF组大鼠脊髓组织中少见自噬小体双模结构,线粒体偶见轻微肿胀和空泡变性,未见溶酶体融合。NP组大鼠脊髓组织中的PINK1和Parkin蛋白表达较Sham组升高（P <0.05）;经过GDNF干预治疗后发现,GDNF组大鼠脊髓组织中PINK1和Parkin蛋白降低（P <0.05）。结论 GDNF作用机制可能通过抑制PINK1和Parkin蛋白表达,从而有效减轻神经病理性疼痛。     

益气活血通络方通过抑制P2X7介导的脊髓小胶质细胞活化改善糖尿病大鼠神经病理性疼痛

目的 探讨益气活血通络方对糖尿病神经病理性疼痛（diabetic neuropathic pain,DNP）的影响及其作用机制。方法 高脂喂养大鼠4周后,35 mg/kg链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）腹腔注射复制2型糖尿病大鼠模型,通过观测大鼠机械痛阈和热缩足反应时间作为判定DNP模型复制成功的标准。将DNP大鼠随机分为模型组,益气活血通络方高、中、低剂量组和阳性对照组（甲钴胺）,另设空白对照组。Western blot法和免疫荧光双标检测脊髓中补体受体- 3的单克隆抗体（monoclonal antibody of complement receptor type 3,OX42）和P2X7（purinergic 2X7）的表达水平;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子- α（tumor necrosis factor- α,TNF- α）、白细胞介素- 1β（interleukin- 1β,IL- 1β）和趋化因子配体3（CC- chemokine ligand 3,CCL3）水平。结果 益气活血通络方干预后,DNP大鼠的机械痛阈和热缩足反应时间均得到显著的改善;大鼠血清TNF- α、IL- 1β和CCL3水平显著降低（P<0.05）;脊髓组织中OX42和P2X7表达水平均显著降低（P<0.05）。结论 益气活血通络方对DNP大鼠具有显著的治疗作用,其作用机制可能是通过抑制脊髓小胶质细胞活性,调节P2X7的表达,从而减轻神经炎症反应。     

黄蒲通窍胶囊对阿尔茨海默病模型大鼠Wnt/Ca2+信号通路的影响

目的 观察黄蒲通窍胶囊对阿尔茨海默病（Alzheimers disease,AD）模型大鼠学习记忆的影响,探究其潜在作用机制。方法 将30只SD大鼠随机分为空白组、模型组、黄蒲通窍胶囊组,每组10只,腹腔注射D-半乳糖联合双侧海马注射Aβ25-35复制AD大鼠模型;给药28 d,采用Morris水迷宫实验检测大鼠的学习记忆能力,检测后取材,采用苏木精-伊红染色观察海马神经细胞损伤情况,采用Western blot法检测海马组织中Wnt5、Frizzled、PLCβ蛋白表达水平,采用ELISA法检测血清三磷酸肌醇（inositol triphosphate,IP3）表达水平。结果 Morris水迷宫实验结果显示：训练期,各组大鼠的逃避潜伏期随时间的增加呈下降趋势;测试期,与空白组比较,模型组大鼠逃避潜伏期明显延长,目标象限路程与时间百分比明显减少（P＜0.05）;与模型组比较,黄蒲通窍胶囊组大鼠逃避潜伏期明显缩短,目标象限路程百分比和时间百分比明显增加（P＜0.05）。苏木精-伊红染色结果显示：与空白组比较,模型组大鼠海马神经细胞萎缩破裂、层数减少、排列松散;与模型组比较,黄蒲通窍胶囊组大鼠海马神经细胞损伤减轻。Western blot法检测结果显示：与空白组比较,模型大鼠Wnt5、Frizzled、PLCβ表达水平均明显升高（P＜0.05）;与模型组比较,黄蒲通窍胶囊组大鼠Wnt5、Frizzled、PLCβ表达水平均明显降低（P＜0.05）。ELISA法检测结果显示：与空白组比较,模型组大鼠IP3表达水平明显升高（P＜0.05）;与模型组比较,黄蒲通窍胶囊组IP3表达水平明显降低（P＜0.05）。结论 黄蒲通窍胶囊可减少AD模型大鼠海马神经细胞的损伤,改善其学习记忆的能力,其机制可能与抑制Wnt/Ca2+信号通路有关。     

芪归糖痛宁颗粒调节炎性因子预防糖尿病周围神经病变的机制研究

目的 通过观察芪归糖痛宁颗粒预防性给药对相关炎性因子的影响,探究其改善糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)的机制。方法 将120只SD大鼠分为正常组,模型组,芪归糖痛宁颗粒高、中、低剂量组和甲钴胺组,采用链脲佐菌素腹腔注射联合高脂饲料喂养法复制糖尿病大鼠模型,预防性给予相应药物8周,以运动神经传导速度（motor nerve conduction velocity,MNCV）和摆尾温度阈值评价DPN的改善情况,采用酶联免疫吸附法测定大鼠血清基质金属蛋白酶-1 (matrix metalloproteinase 1,MMP-1)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1（interleukin 1,IL-1）、单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)含量。结果 与正常组比较,模型组大鼠摆尾温度阈值显著升高（P<0.05）,MNCV显著下降（P<0.05）,血清MMP-1、TNF-α、IL-1和MCP-1均显著升高（P<0.05）。芪归糖痛宁颗粒对DPN大鼠的MNCV、摆尾温度阈值及血清MMP-1、TNF-α、IL-1和MCP-1的效应具有明显的剂量依赖性（P<0.05）,不同剂量对不同指标的效应呈现不同的量效关系;不同剂量芪归糖痛宁颗粒与甲钴胺对DPN大鼠的MNCV、摆尾温度阈值及血清MMP-1、TNF-α和IL-1的效应相比较,差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论 芪归糖痛宁颗粒能预防DPN,其机制与调控复杂的炎性因子网络有关,其效应具有明显的剂量依赖性。     

早期非负重康复运动对膝骨关节炎大鼠关节软骨YKL-40表达的影响

目的观察非负重游泳运动对膝骨关节炎大鼠膝关节软骨YKL-40表达的影响,探讨非负重游泳运动防治膝骨关节炎的机制,为临床采用非负重游泳运动防治膝骨关节炎提供理论依据。方法将40只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、实验Ⅰ组、实验Ⅱ组,每组10只,对照组大鼠不予以任何干预,模型组与实验组大鼠采用木瓜蛋白酶注射法建立膝骨关节炎模型。对实验组进行为期6周的非负重游泳运动后,对所有大鼠膝关节软骨进行肉眼及光镜下观察形态改变并评分、免疫组化法观察YKL-40的表达情况。结果模型组、实验Ⅰ组、实验Ⅱ组大鼠膝关节软骨大体观评分分别为:4.10±0.74,2.90±0.74,2.10±0.57;改良Mankin评分分别为:6.17±0.16,4.69±0.18,2.95±0.15;YKL-40表达的AOD值分别为:0.33±0.02,0.29±0.02,0.26±0.03。三组大鼠膝关节软骨大体观评分、改良Mankin评分、YKL-40表达的AOD值均逐渐降低(P<0.05)。结论早期康复运动可以改变YKL-40在膝骨关节炎大鼠膝关节软骨细胞中的表达,能够延缓膝骨关节炎大鼠膝关节软骨的进一步退变。     

糖代谢重编程及其靶向治疗药物在炎症相关疾病中的作用

细胞在炎性微环境影响下发生糖代谢重编程,使其主要供能方式由氧化磷酸化转变为有氧糖酵解,该过程参与炎症相关疾病发生发展的各个阶段。糖代谢重编程不仅改变单个细胞的代谢模式,而且打破了机体微环境的代谢稳态,进一步促进细胞有氧糖酵解,为炎症相关疾病的恶性进展提供有利条件。有氧糖酵解的相关代谢酶、转运蛋白、代谢产物等均为关键信号分子,药物通过靶向这些特异性强的关键分子,抑制有氧糖酵解从而发挥治疗作用。本文围绕糖代谢重编程对炎症相关肿瘤、类风湿关节炎、阿尔茨海默病等炎症相关疾病发生发展的影响以及药物靶向糖代谢重编程对疾病的治疗作用展开综述。     

中医院校生理学开放性实验教学初探

生理学实验是中医院校重要的基础实验课之一,实行开放性实验可以启发或培养学生的科研创新性思维.通过抽取本科生进行生理学开放性实验,并对实验的学生进行问卷调查,分析实验效果,探讨教学体会,为今后全面实行开放性实验教学提供参考.     

胡国俊从气冲气陷治咳经验

胡国俊辨治顽固性咳嗽着眼于整体气机的治疗:一是从中气下陷、金虚而鸣之病机入手,通过建中益气、培土生金之法进行治疗;二是从冲气上干、金撞而鸣之病机入手,通过调冲降逆、安致病之脏的方法予以调理。