链状酰胺类化合物B07的体外杀精效果及其对精子质膜的影响

目的:研究一种链状酰胺类化合物(B07)的体外杀精作用及其对精子质膜的影响。方法:上游收集高活力人类精子分别与0μg/ml(对照组),5~640μg/ml B07作用30 min,随后用计算机辅助精液分析仪分析记录精子的活率及运动参数;用160μg/ml B07与精子作用,记录5 min、30 min、60 min和120 min时精子活动率;处理后的精子一部分经SYBR-14/PI双染后用荧光显微镜观察,另一部分通过电子显微镜来观察质膜的变化情况;并以壬苯醇醚(N9)作为阳性对照。结果:随着B07浓度的升高,精子活率和活力呈下降趋势,最低有效浓度(MEC)为640μg/ml;荧光显微镜下经B07处理的精子呈橙色,而N9处理的精子呈红色;电子显微镜显示B07组精子头部肿胀起泡,尾部针孔样损伤,N9组精子呈溶解性改变。结论:B07具有体外杀精作用,且该作用有时间和浓度依赖性,且其对精子质膜的影响小于N9。     

利多卡因联合阿替卡因在下颌后牙不可逆牙髓炎中的麻醉效果的Meta分析

目的:系统评价在下颌后牙不可逆牙髓炎治疗中,2%利多卡因行下牙槽神经阻滞联合4%阿替卡因局部浸润和仅用2%利多卡因的局部麻醉效果差异。方法:计算机检索Cochrane图书馆、Pubmed、Embase、OVID、CBM、维普、万方、中国知网,同时检索相关专业杂志,会议记录,以及相关文献的参考文献,纳入相关利多卡因和阿替卡因在不可逆牙髓炎中比较的所有随机对照试验,时间截止至2013年12月31日。采用Cochrane手册中提供偏倚风险评价方法对文献进行方法学质量评价。使用GRADE系统评估证据质量等级。结果:共纳入4个随机对照试验,Meta分析结果显示,利多卡因联合阿替卡因组的麻醉成功率优于仅使用利多卡因组(RR=1.51,95%CI:1.23,1.87,P=0.0001),其中亚组分析利多卡因下牙槽神经阻滞联合阿替卡因局部浸润的麻醉效果也优于仅用利多卡因下牙槽神经阻滞[(RR=1.69,95%CI:1.09,2.62,P=0.02)或利多卡因下牙槽神经阻滞联合利多卡因局部浸润组(RR=1.44,95%CI:1.14,1.82,P=0.002)。GRADE系统评价显示证据水平均为极低级。结论:在下颌后牙不可逆牙髓炎中,当前支持利多卡因联合阿替卡因的麻醉效果优于仅使用利多卡因的证据等级极低,且缺乏中国地区的相关研究,未来需更多高质量随机对照试验以进一步论证。     

内质网分子伴侣糖调节蛋白94在大鼠酒精性肝损伤中的高表达和意义

目的检测酒精性肝损伤大鼠肝组织内质网分子伴侣糖调节蛋白94的表达情况,探讨酒精性肝损伤的发病机制.方法24只SD雌性大鼠分成对照组和模型组.模型组大鼠给予乙醇加鱼油灌胃配合高脂饮食8周,建立酒精性肝损伤模型,应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和免疫组化法检测大鼠肝组织内质网分子伴侣糖调节蛋白94 mRNA和蛋白水平.结果与正常组比较,模型组大鼠肝组织糖调节蛋白94 mRNA和蛋白表达明显增强(P＜0.01).结论酒精性肝损伤大鼠存在糖调节蛋白94高表达,这可能是该病的发病机制之一.     

热休克蛋白70抑制剂PES对人胃癌BGC细胞NF-κB通路的影响

目的:探讨热休克蛋70(heat shock protein 70,Hsp70)抑制剂PES(2-phenylethynesulfonamide)对人胃癌BGC细胞活性、细胞迁移以及核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路的影响。方法 :采用Hsp70抑制剂PES处理人胃癌BGC细胞后,应用CCK-8(cell counting kit-8)法检测BGC细胞的活性,细胞划痕实验检测BGC细胞的迁移能力,蛋白质印迹法检测NF-κB信号通路成员及其下游血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达,免疫荧光法观察BGC细胞质中p65的表达。结果 :与未经PES处理的BGC细胞(对照组)比较,5、10和20μmol/L的PES处理BGC细胞72 h后,BGC细胞活性和细胞迁移率被明显抑制(P值均<0.05)。20μmol/L的PES处理后,BGC细胞NF-κB信号通路中磷酸化p65(phospho-p65,p-p65)、p65、NF-κB抑制蛋白激酶α(inhibitory protein of NF-κB kinaseα,IKKα)、p-IKKα、p-IKKβ、IKKβ、p-Akt和Akt以及下游VEGF蛋白的表达水平均明显低于对照组(P值均<0.05),且细胞质中p65蛋白的荧光明显减弱。结论 :Hsp70抑制剂PES可抑制胃癌BGC细胞的活性和迁移,下调BGC细胞NF-κB信号通路活性以及下游VEGF蛋白的表达水平,降低BGC细胞质中p65的表达。     

核苷酸结合寡聚蛋白2在胃腺癌及其相关疾病组织中的表达及意义

核苷酸结合寡聚域蛋白质家族(NOD)广泛存在于植物、线虫、脊椎动物和人类的细胞内,在遗传上高度保守.其中NOD2基因是第一个被发现的人类克罗恩病(CD)易感基因.随着分子生物学和遗传学研究的深入,已被认为是肠道上皮细胞的细菌识别感受分子.本实验旨在探讨NOD2蛋白在胃腺癌及其相关疾病中的表达及幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染对其表达的影响.     

蓝舌病毒湖北株对小鼠前列腺癌RM-1细胞的杀伤效应

目的:体外研究蓝舌病毒湖北株3(BTV-HbC3)对小鼠前列腺癌细胞RM-1的感染性并探讨BTV-HbC3靶向性溶瘤的机制。方法:观察RM-1细胞感染BTV-HbC3的细胞病变效应;MTT法研究病毒致细胞病变率的特征;透射电镜观察感染病毒后细胞超微结构的变化;DNA Ladder分析病毒诱导细胞凋亡的情况;流式细胞仪测定病毒对RM-1细胞凋亡的影响。结果:BTV-HbC3感染RM-1细胞后有明显的细胞病变效应;DNA Ladder分析为阶梯状条带;透射电镜发现胞质内有大量病毒颗粒和典型细胞凋亡形态变化;流式细胞仪可见明显的细胞凋亡。结论:BTV-HbC3在体外能有效的感染RM-1细胞,并能诱导RM-1细胞凋亡。     

阳离子脂质体介导的虫荧光素酶基因表达

目的 研究阳离子脂质体Lipofectin介导虫荧光素酶基因在不同细胞株中的表达。方法 质粒pDR2luc在大肠杆菌DH5a中扩增后用碱裂解法提取,并经Sepharose 2B凝胶过滤柱层析,通过凝胶电泳及紫外分光光度计分析纯度、定量,以Lipofectin分别转染人肝癌细胞株HepG2、SMMC7721、人肾癌细胞株GRC及非洲绿猴肾细胞COS7,然后以液体闪烁计数仪单光子计数法测定荧光素酶活性。结果 荧光素酶活性在4种细胞株中均有表达,且均有显著性差异(均P<0.05)。结论 阳离子脂质体Lipofectin可用于多种真核细胞基因转染。     

细胞毒T淋巴细胞相关抗原4基因多态性与吸毒并HIV感染相关

目的研究细胞毒T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)基因外显子1的49位点A/G和启动子-318位点C/T多态性与吸毒并HIV感染的相关性。方法 采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)方法,检测24例单纯吸毒者、41例吸毒合并HIV感染患者以及204例正常对照者CTLA-4基因外显子1的49位点A/G和启动子-318位点C/T的基因型。结果 与正常对照组比较,吸毒组C/C(12.50%vs51.47%)(P<0.01)型频率明显下降;在吸毒合并HIV感染患者组,CTLA-4A+49G基因型差异无统计学意义(P>0.05);CTLA-4C-318T基因型差异有统计学意义(P<0.01),C/T(68.3%vs45.6%)、T/T(21.95%vs2.94%)型频率明显上升,C/C(9.76%vs51.47%)型频率显著下降。与吸毒组比较,吸毒合并HIV感染组中CTLA-4A+49G及CTLA-4C-318T各基因型频率变化无统计学差异(P>0.05)。结论 吸毒合并HIV感染与CTLA-4基因动态密切相关,C-318T基因型C/T、T/T型与吸毒合并HIV感染呈正相关,C/C行呈负相关。