粪胆汁酸与大肠癌

粪胆汁酸与大肠癌的发生关系密切。本文从流行病学、实验研究等角度综述了胆汁酸在大肠癌发病中所起的作用及其可能机制。     

一种简单分离、传代培养成年小鼠肝细胞的方法

目的寻找肝细胞分离、传代培养更简单方便的方法。方法应用不同胰酶浓度、不同消化时间消化成年小鼠肝组织后进行组织块培养,观察细胞的贴壁率、产量及活力。结果胰蛋白酶分离成年小鼠肝细胞,于MEM(含20%小牛血清)培养液中,37℃密闭培养,生长情况良好,12小时左右即可完全贴壁,并已传至第二代。胰酶浓度为0.15%,消化时间15min,细胞产量及活率较高,每10g体重细胞产量为0.84±0.08×107,细胞活力为(90.66±5.71)%,贴壁生长48小时细胞倍增PD值为0.86±0.05。结论胰蛋白酶消化、组织块贴壁法是成年小鼠肝细胞分离、培养传代的简便方法,不需要特殊装置,酶耗费少,细胞采集可满足一般实验要求。     

CBL与PBL结合的教学模式在急性胰腺炎临床见习教学中的应用

急性胰腺炎是消化内科临床教学的重点和难点,如何在有限的时间内使大学本科学生学习掌握更多的临床思维方法至关重要。在临床急性胰腺炎本科见习带教中,采用典型病例为中心、问题为引导的CBL与PBL结合的教学模式,很好地调动了学生的学习积极性,有利于培养学生临床思维能力及激发科研潜能,同时促进教师自身的素质和教学技巧的提高。     

消化专科研究生的消化内镜教学体会

消化内镜是消化内科专业的重要组成部分,是消化专科研究生必须掌握的技术。让学生熟练地掌握内镜的操作,并对内镜下常见疾病的初步诊断,成为内镜教学的重要课题。本文就如何规范消化内镜的教学培训,提高教学质量,提出一些实践经验。     

鞘氨醇激酶1对结肠癌细胞血管生成拟态的影响及其机制

目的:研究鞘氨醇激酶1(sphingosine kinase1,Sphk1)对人结肠癌HT-29细胞生成血管拟态(vasculogenic mimicry,VM)的影响及其可能的机制.方法:将人结肠癌HT-29细胞分为Sphk1抑制组、Sphk1激活组、对照组.Sphk1抑制组加入N,N-二甲基鞘氨醇(N,N-dimethyl-D-erythro-sphingosine,DMS)50μmol/L;Sphk1激活组加入佛波醇-12-豆蔻酸酯-13-乙酸酯(phorbol12-myristate-13-acetate,PMA)100nmol/L;对照组加入等量的培养基.采用MTT法检测细胞生长增殖;透射电镜观察细胞形态学变化;Matrigel三维培养法观察VM形成能力;Transwell小室模型观察细胞侵袭迁移能力的变化,QT-PCR、Western blot及ELISA技术检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达.结果:DMS显著抑制细胞的增殖、侵袭、迁移并促进细胞凋亡;透射电镜可见典型的凋亡特征;三维培养中不能形成管状VM;明显减弱VEGFmRNA及蛋白表达.PMA则显著促进HT-29细胞的增殖、侵袭、迁移并抑制细胞的凋亡;透射电镜可观察到细胞增殖特征;促进三维培养中管状VM的形成;明显增强VEGFmRNA及蛋白表达.对照组、DMS组及PMA组的侵袭细胞数:112.00±6.25vs57.00±8.00,142.00±5.57;迁移细胞数:69.33±4.04vs42.00±4.16,111.00±8.03;VEGFmRNA表达量:1.000vs0.740±0.122,1.220±0.075;VEGF蛋白表达:0.39±0.05vs0.23±0.02,0.65±0.06;VEGF蛋白分泌:103.00±8.96vs63.89±8.44,201.01±17.93,均P<0.05.结论:Sphk1可促进HT-29细胞增殖、侵袭、迁移并抑制细胞的凋亡,诱导VM的形成,其机制可能是通过增强结肠癌细胞的侵袭迁移能力并促进VEGF表达而发挥作用.     

阿司匹林对结肠癌细胞株SW480生长增殖及NOS表达的影响

目的观察阿司匹林对结肠癌细胞株SW480生长增殖、NOS表达及NO含量的影响并探讨其作用机制。方法以不同浓度(2.5、5.0、10.0 mmol/L)的阿司匹林干预体外培养人结肠癌细胞株SW480,采用生长曲线法和MTT法观察其对生长增殖的影响;免疫细胞化学染色法检测NOS的表达;Griess法测定培养基中NO含量。结果阿司匹林对结肠癌细胞株SW480生长增殖具有抑制作用,诱导iNOS的表达,增加NO的生成,并呈浓度依赖关系。结论阿司匹林可抑制结肠癌细胞株SW480的生长增殖;诱导iNOS的表达、增加NO含量可能是其部分机制。     

结直肠癌中CD44v6、MMP-2、nm23-H1表达与临床病理的相关性研究

 目的 探讨结直肠癌中ＣＤ４４ｖ６、ＭＭＰ－２和ｎｍ２３－Ｈ１的表达与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化 ＳＡＢＣ法结合计算机图像分析技术检测 ＣＤ４４ｖ６、ＭＭＰ－２、ｎｍ２３－Ｈ１蛋白在 ２４例结直肠癌患者癌及癌旁组织中的表达。结果 ２４例结直肠癌组织中 ＣＤ４４ｖ６、ＭＭＰ－２的阳性单位（ＰＵ值）高于癌旁和正常组织（Ｐ＜０．０５），而 ｎｍ２３－Ｈ１的 ＰＵ值则低于癌旁和正常组织（Ｐ＜０．０５）。它们的异常表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小及部位无相关性，而与浸润深度、淋巴结转移、远处转移、Ｄｕｋｅ’ｓ分期密切相关（Ｐ＜０．０５）。结论 ＣＤ４４ｖ６、ＭＭＰ－２、ｎｍ２３－Ｈ１与结直肠癌的病理特征密切相关。它们的异常表达在肿瘤的侵袭转移中可能具有正、负协同作用，联合检测 ＣＤ４４ｖ６、ＭＭＰ－２、ｎｍ２３－Ｈ１蛋白可作为预测结直肠癌侵袭转移及客观评价患者预后的生物学指标。     

舒林酸对人结肠癌细胞凋亡及相关基因表达谱的作用

目的:观察舒林酸对人结肠癌LOVO细胞株凋亡的影响,以及舒林酸作用后的该细胞基因表达谱改变.方法:应用透射电镜,流式细胞仪观察舒林酸作用48 h、72 h对LOVO细胞凋亡的影响;基因芯片法检测舒林酸作用前后LOVO细胞的差异表达基因.结果:经舒林酸处理后细胞有典型的凋亡小体形成:经舒林酸0.6、0.9、1.2 mmo1/L作用后,细胞凋亡率与对照组比较明显升高(48h:4.2±1.04,4.26±0.28,7.51±2.09 vs 1.81±0.9l:72 h:6.21±0.56,7.48±1.45,10.40±1.30 vs 2.06±1.43:均P<0.05).与含有17101个cDNA的基因芯片杂交.筛选出差异表达基因1O13条,其中178条为凋亡相关基因(表达上调82条,下调96条),占所有差异表达基因的17.87%.结论:舒林酸具有诱导LOVO细胞发生凋亡的作用.上调或下调某些凋亡相关基因的表达可能是其诱导凋亡的分子机制之一.     

大肠癌患者粪胆汁酸的代谢状况

粪胆汁酸（ｆｅａｃａｌｂｉｌｅａｃｉｄ，ＦＢＡ），是饮食与大肠癌相关联的主要媒介物．我国大肠癌的发生是否与ＦＢＡ有关国内报告甚少．我们应用薄层层析色谱法（ｔｈｉｎｌａｙｅｒｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ＴＬＣ）测定并分析大肠癌患者的ＦＢＡ情况，为大肠癌的一级防治提供依据．１　材料和方法１．１　材料　疑有大肠癌２ｗｋ内未服过抗生素、泻药而来诊的患者，留取其混合后的粪便２０ｇ，放入塑料瓶内封口后置于－６０℃冰箱冷藏待测．对经肠镜检查和病理证实为大肠癌，且肝功能正常，Ｂ超检查无肝内外胆管结石者标本进…