桑叶对2型糖尿病大鼠肝脏Toll样受体及其下游信号元件基因表达的影响

目的:观察桑叶降糖作用,分析桑叶对2型糖尿病(T2DM)大鼠肝脏Toll样受体及其下游信号元件基因表达的影响,初步探讨其降糖机制。方法:选取SPF级雄性Wistar大鼠46只,高脂饲料饲喂8周后,腹腔注射链脲佐菌素(STZ),以制备T2DM模型。根据血糖值将模型大鼠随机分成模型组、阳性药二甲双胍(0. 2 g/kg)组和桑叶高、低剂量(3 g/kg,1 g/kg)组,每组12只,另取10只大鼠为正常对照组。灌胃给药,持续12周,每周测其空腹血糖,并于第11周时进行OGTT和ITT实验。以上实验结束后免疫吸附试验(ELISA)试剂盒测定血清中胰岛素、IL-6、肿瘤坏死因子-(TNF-)和C反应蛋白(CRP)水平,实时PCR法测定大鼠肝脏TLRs及MyD88、TRAF-6、核因子-B mRNA水平。结果:大鼠给药桑叶后,血糖值降低,饮水量明显减少,差异有统计学意义(P 0. 05),糖耐量得到显著改善,血清中IL-6、CRP水平明显降低,差异有统计学意义(P 0. 05),TLR7、TLR8、TLR9以及其下游信号元件TRAF-6、MyD88、核因子-B mRNA相对表达均较模型组明显降低,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论:桑叶降糖可能与其抑制肝脏组织TLRs及其下游信号表达,降低炎性反应有关。     

益肾生精方治疗少弱精子症的药效评价及作用机制

目的 采用环磷酰胺致大鼠少弱精子症模型，研究益肾生精方对少弱精子症的治疗作用及作用机制。方法 随机选取8只SD雄性大鼠为正常组，其余大鼠连续5 d腹腔注射环磷酰胺（35 mg·kg^-1·d^-1）制备大鼠少弱精子症模型，而后随机分为模型组、益肾生精方低、中、高剂量组（2.91、5.83、11.66 g·kg^-1），五子衍宗丸组（1.03 g·kg^-1），左卡尼汀组（0.17 g·kg^-1），每组8只。药物干预28 d后，记录大鼠体质量、睾丸质量和指数；采用计算机辅助精子分析（CASA）系统检测附睾中精子质量；苏木素-伊红（HE）染色观察睾丸组织形态；比色法检测睾丸组织中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）水平；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、睾酮（T）的水平；原位末端标志法（TUNEL）检测睾丸组织中细胞的凋亡情况；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测睾丸组织中B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、活化的胱天蛋白酶-3（cleaved Caspase-3）蛋白表达水平。结果 与正常组比较，模型组大鼠体质量、睾丸质量和指数、精子浓度和活力显著降低（P<0.01），睾丸病理评分显著升高（P<0.01）；与模型组比较，益肾生精方中、高剂量组、五子衍宗丸组和左卡尼汀组可提高体质量、睾丸质量和指数，并提高精子浓度和活力；降低睾丸病理评分。氧化应激水平检测结果显示，与正常组比较，模型组大鼠睾丸组织中SOD水平显著降低（P<0.01），MDA水平显著升高（P<0.01）；与模型组比较，益肾生精方高剂量组、五子衍宗丸组和左卡尼汀组可以明显提高SOD活性，降低MDA水平（P<0.05，P<0.01）。血清激素水平检测结果显示，与正常组比较，模型组T水平显著降低（P<0.01），FSH和LH水平显著升高（P<0.01）；与模型组比较，益肾生精方组、五子衍宗丸组和左卡尼汀组可以显著提高T水平（P<0.01），降低LH水平（P<0.05，P<0.01）。TUNEL结果显示，与正常组比较，模型组生精细胞凋亡率显著增加（P<0.01）；与模型组比较，益肾生精方中剂量组、五子衍宗丸组和左卡尼汀组可显著降低凋亡率（P<0.01）。Western blot结果显示，与正常组比较，模型组Bcl-2蛋白水平明显降低（P<0.05）、Bax和cleaved Caspase-3蛋白水平明显升高（P<0.05，P<0.01）；益肾生精方高剂量组、五子衍宗丸组和左卡尼汀组可以明显升高Bcl-2蛋白水平，降低cleaved Caspase-3蛋白水平（P<0.05，P<0.01）。结论 益肾生精方可改善少弱精子症模型大鼠的精子质量，其机制可能与抗氧化、调节性激素水平以及抑制生精细胞凋亡等多个途径有关。     

寒喘祖帕颗粒对甲型流感病毒鼠肺适应株FM1感染肺炎小鼠的保护作用

目的研究寒喘祖帕颗粒对甲型流感病毒鼠肺适应株FM1感染小鼠的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法①ICR小鼠60只,随机分为正常组、模型组、达菲组及寒喘祖帕颗粒高、中、低剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组小鼠用甲型流感病毒鼠肺适应株FM1溶液(病毒原液稀释4.0×10~3倍)滴鼻感染小鼠造模。达菲组给予达菲47 mg/kg,寒喘祖帕颗粒高、中、低剂量组分别给予寒喘祖帕颗粒浸膏1.08 g/kg、0.54 g/kg、0.27 g/kg,正常组和模型组给予同体积蒸馏水。各组均连续干预5 d,于6 d时称取小鼠体质量,摘取全肺,计算其肺指数及抑制率;末次给药24 h后ELISA法测定小鼠血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)水平;HE染色观察小鼠肺组织病理学改变并进行评分。②ICR小鼠160只,随机分为正常组、模型组、达菲组及寒喘祖帕颗粒高、中、低剂量组,正常组10只,其余各组每组30只。除正常组外,其余各组小鼠用流感病毒鼠肺适应株FM1溶液(病毒原液稀释3.5×10~3倍)滴鼻感染小鼠造模。造模当天开始各组分别灌胃给药,达菲组给予达菲47 mg/kg,寒喘祖帕颗粒高、中、低剂量组分别给予寒喘祖帕颗粒浸膏2.16 g/kg、1.08 g/kg、0.54 g/kg,正常组和模型组给予同体积的蒸馏水。各组均连续干预5 d,观察14 d内小鼠死亡情况,记录小鼠存活时间并计算死亡率。结果①与正常组比较,模型组小鼠体质量降低(P0.01),肺指数增加(P0.01),血清TNF-α水平升高(P0.01),肺组织病理得分增加(P0.01);与模型组比较,达菲组和寒喘祖帕颗粒高、中剂量组小鼠体质量增加(P0.05,P0.01),肺指数降低(P0.05,P0.01),血清TNF-α水平降低(P0.01),肺组织病理得分降低(P0.01);达菲组与寒喘祖帕颗粒各剂量组比较、寒喘祖帕颗粒各剂量组组间比较,上述指标差异均无统计学意义(P0.05)。②与正常组比较,模型组小鼠存活时间减少(P0.01),死亡率增加(P0.01);与模型组比较,达菲组和寒喘祖帕颗粒高、中、低剂量组存活时间增加(P0.01),达菲组寒喘祖帕颗粒高剂量组死亡率降低(P0.01)。与达菲组比较,寒喘祖帕颗粒中、低剂量组存活时间减少(P0.05),寒喘祖帕颗粒高、中、低剂量组死亡率升高(P0.01)。与寒喘祖帕颗粒高剂量组比较,寒喘祖帕颗粒中、低剂量组存活时间减少、死亡率升高(P0.05)。结论寒喘祖帕颗粒对甲型流感病毒鼠肺适应株FM1感染小鼠有一定的保护作用,该作用可能与抗炎、降低血清TNF-α含量有关。     

羚羊清肺颗粒(濒危替代)药效学实验研究

目的:评价羚羊清肺颗粒原方中羚羊角替换为山羊角后的解热、镇痛、祛痰、止咳以及对急性咽炎的治疗作用,并与羚羊清肺颗粒原方进行药效学比较,为羚羊清肺颗粒山羊角替代羚羊角提供实验依据。方法:通过内毒素致家兔发热实验,观察其解热作用;通过小鼠醋酸扭体实验,观察其镇痛作用;通过小鼠酚红排泌实验,观察其祛痰作用;通过枸橼酸诱发豚鼠咳嗽实验,观察其止咳作用;通过氨水致大鼠咽炎实验,观察其治疗急性咽炎作用。结果:羚羊清肺颗粒(濒危替代)可明显降低发热模型家兔体温,减少小鼠扭体次数,增加小鼠气管酚红排泌量,延长豚鼠咳嗽潜伏期,并显著降低豚鼠咳嗽次数;降低咽炎模型大鼠血白细胞数、中性粒细胞数以及淋巴细胞数,并能显著减轻大鼠气管组织炎性病变。结论:羚羊清肺颗粒(濒危替代)具有解热、镇痛、祛痰、止咳及治疗咽炎的药效学作用,山羊角可作为羚羊清肺颗粒原方中羚羊角替换的一种选择。     

肝癌早期诊断标志物的研究进展

肝癌是全球最常见的恶性肿瘤之一，在我国的发病率和死亡率均很高，严重威胁着人类的健康。原发性肝癌早期不易发现，临床确诊时往往已发展至中晚期，治疗难度大且预后差。因此，早发现、早诊断、早治疗是提高原发性肝癌患者生存率的最佳途径。血清甲胎蛋白（AFP）是目前临床应用最广的肝癌诊断标记物，但在肝癌早期阶段敏感性和特异性不足，且部分肝癌患者AFP阴性，因此，需要寻找更有价值的肝癌早期诊断标志物。本文通过对肝癌早期诊断标志物研究现状的分析和思考，以期为肝癌早期诊断提供科学依据。     

桑叶改善3T3-L1细胞胰岛素抵抗的作用及其机制分析

目的:观察桑叶含药血清对脂肪细胞株3T3-L1胰岛素抵抗(IR)模型葡萄糖消耗量及细胞活力的影响,筛选出桑叶含药血清的最佳浓度,并检测其对炎症因子含量的影响,探讨可能的作用机制。方法:取对数生长期3T3-L1前脂肪细胞,10 mg·L~(-1)胰岛素(Ins),0. 25 mmol·L~(-1)地塞米松(DEX),0. 5 mmol·L~(-1)3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)诱导48 h后,10 mg·L~(-1)Ins再次诱导48 h,待其分化为成熟脂肪细胞后,1μmol·L~(-1)DEX诱导96 h以建立IR细胞模型。桑叶水提物含药血清培养12,24,36,72 h后,采用葡萄糖氧化酶法检测桑叶含药血清培养后细胞葡萄糖的消耗量,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测桑叶含药血清培养后IR模型的细胞活力,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测桑叶含药血清对细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的影响,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定桑叶含药血清对胰岛素信号通路胰岛素受体(InsR),胰岛素受体底物(IRS),磷酸化IRS1(p-IRS1),葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)蛋白表达的影响。结果:桑叶含药血清可显著提高IR细胞葡萄糖消耗量(P 0. 01),增强细胞活力(P 0. 01),降低炎症因子TNF-α的含量(P 0. 01),调节胰岛素信号通路下游蛋白的表达量(P 0. 05,P 0. 01)。结论:桑叶可明显改善3T3-L1细胞IR状态,其作用机制可能与抑制TNF-α表达、促进胰岛素信号通路蛋白的表达有关。     

小儿珠珀散治疗感冒药效学的动物实验研究

目的:探讨小儿珠珀散治疗感冒的药物效应,为临床应用提供参考。方法:针对感冒过程中儿童可能出现的发热、咳嗽、痰多、消化不良等症状,分别利用脂多糖(LPS)致热家兔,氨水诱发小鼠咳嗽,酚红排泌法、半固体营养糊小鼠肠推进实验探讨小儿珠珀散对症治疗的作用。结果:小儿珠珀散可降低小鼠耳肿胀程度、家兔体温上升幅度;延长小鼠咳嗽潜伏期,减少咳嗽次数,减少小鼠气管酚红排出量;促进小鼠胃排空,增加小鼠小肠推进率(P均<0.05)。结论:小儿珠珀散可缓解感冒过程中的多种症状。