白血病细胞可变铁池的检测及其意义

为了研究细胞可变铁池（1abile iron pool,LIP）的检测方法,用不同浓度的去铁胺（DFO）与K562及HL-60细胞共同培养0、6、12、24、48小时,用钙荧光素（caicein）负荷K562及HL-60细胞,荧光分辨仪检测细胞荧光量;用快速铁螯合剂螯合铁,使恢复荧光,然后计算2次荧光差值.结果表明：浓度为50和100μmol/L的DFO作用于K562及HL-60细胞12小时后,荧光值明显高于对照组（P＜0.05）,且LIP的荧光差值（△LIP）随DFO作用时间的延长及浓度增加而降低,即呈一定的时间及剂量依赖性.结论：DFO通过螯合细胞内铁降低了白血病细胞LIP;calcein AM荧光可作为检测细胞LIP变化的比较可靠的方法.     

白血病患儿免疫功能状况及其预防接种

急性白血病( acute leukemia,AL)是儿童期最常见的恶性肿瘤,约占儿童期所有恶性肿瘤的30％.AL为造血系恶性肿瘤,加之强烈化疗、放疗等多种因素,导致患儿非特异性屏障功能和特异性免疫功能受损,对多种病原微生物感染的风险显著增高,部分患儿甚至死于严重感染.     

HP感染与缺铁性贫血

幽门螺杆菌（Helicobacerter pylori，HP）是一种世界范围内广泛分布的革兰氏阴性杆菌，发达国家50％人口呈HP哑临床感染，发展中国家儿童HP感染率甚至可高达80％～90％。既往大量研究表明，HP感染是消化性溃疡最为重要的发病机制之一，而且与急慢性胃炎、胃癌、胃肠淋巴瘤、功能性消化不良、儿童再发性腹痛等胃肠道疾病密切相关。近年来，国外学者发现，HP感染尚与许多胃肠外疾病的发生有关，包括铁缺乏症一缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血、生长发育落后。等。本文将重点讨论HP感染与缺铁性贫血（iron deficiency anemia，IDA）发生发展间的关系，以及可能的发病机制。     

增生性贫血患儿骨髓单个核细胞转铁蛋白受体2表达情况及其意义探讨

本研究旨在探讨增生性贫血患儿骨髓单个核细胞转铁蛋白受体2(transferrin receptor 2,TfR2)表达情况,分析TfR2 mRNA表达水平与贫血程度、骨髓红系增生程度、基础疾病种类和铁状况等指标的相关关系,评价TfR2受体蛋白在红系造血方面的作用和在增生性贫血诊断方面的应用价值。实验分为两组:实验组系我院儿童血液肿瘤科收治的40例增生性贫血患者,对照组系经骨髓检查排除红系疾病和血液系恶性肿瘤的10例患者。收集研究对象的骨髓抗凝标本,采用荧光定量PCR检测增生性贫血患儿骨髓单个核细胞TfR2 mRNA表达水平,分析其与骨髓增生程度、原发疾病种类以及机体铁状况的关系。结果表明,增生性贫血组骨髓单个核细胞TfR2相对表达量显著高于对照组;增生性贫血组TfR2相对表达量与外周血Hb含量呈负相关关系(rs=-0.715),而与骨髓幼红细胞比例呈正相关关系(rs=0.533)。结论:增生性贫血患者TfR2表达水平增高,与骨髓增生程度、外周血贫血程度密切相关。     

左向右分流先天性心脏病儿童AT2受体的表达

目的：探讨未发生梗阻性肺动脉高压的左向右分流先天性心脏病儿童骨骼肌血管是否有AT2受体表达，及肺循环AngⅡ受体的表达。 方法： 20例左向右分流先心病患儿术中取肺、骨骼肌活检。用RT-PCR和免疫组化的方法检测这些骨骼肌中的AT2受体；并对肺组织中AT1和AT2受体的mRNA作半定量分析。 结果： RT-PCR在这些骨骼肌中均检出AT2受体的mRNA；这些骨骼肌血管的AT2受体免疫组化染色均为阳性。这些患儿肺组织中AT2受体的mRNA水平比AT1受体高（P＜0.05）。 结论： 左向右分流先心病儿童骨骼肌血管有AT2受体表达；肺循环AT2受体表达水平比AT1受体高。     

儿童慢性免疫性血小板减少性紫癜治疗进展

免疫性血小板减少性紫癜(ITP)是儿童最常见的出血性疾病,部分患儿演变为慢性ITP(CITP),病程迁延,常规治疗措施往往效果不佳。儿童CITP与成人CITP患者在治疗策略和措施方面有较大的不同,应综合分析患儿出血部位、出血程度、经济负担和药物不良反应等各种因素对患儿生存质量的不良影响,从而决定治疗方案和选择具体治疗措施,不应简单取决于患儿血小板计数。应严格掌握脾切除术的指征和时机,对部分患儿可考虑采用新型药物治疗。     

儿童白血病体外药物敏感实验的临床意义

目的:研究白血病患儿体外药物敏感性,观察初治患儿白血病细胞体外对多种化疗药物的原发耐药情况,为小儿白血病的实验研究和临床治疗提供理论依据。方法:采用MTT法测定22例白血病患儿外周血或骨髓白血病细胞对阿糖胞苷(Ara-C)、地塞米松(DEX)、多柔比星(ADM)、柔红霉素(DNR)、长春新碱(VCR)、依托泊甙(VP-16)等化疗药物的敏感性。结果:22例患者中S/S15例,R/R2例,S/R3例,R/S2例,体外药敏与体内疗效总符合率77.3%,阳性符合率83.3%,阴性符合率33.3%,敏感度78.9%,特异度40.0%。结论:MTT法是简便、快速、客观的肿瘤细胞敏感实验方法,可用于指导临床合理选用化疗药物。     

实时荧光定量PCR快速检测大肠埃希菌的方法研究

目的基于TaqMan探针建立产肠毒素大肠埃希菌实时荧光定量PCR检测方法。方法针对编码大肠埃希菌耐热肠毒素STI、不耐热性肠毒素LTI基因片段设计引物、探针,采用外标法,绘制标准曲线,进行荧光定量PCR检测。结果引物、探针特异性良好,该方法的灵敏度可达到每反应1DNA拷贝,特异性强,检测范围在100～107拷贝每反应,重复性及稳定性好,整个过程只需要2h。结论该方法能快速、灵敏、特异检出产肠毒素大肠埃希菌。     

儿童噬血性淋巴组织细胞增生症GDF15mRNA表达及意义

目的 研究噬血性淋巴组织细胞增生症（HLH）患儿生长分化因子15（GDF15）mRNA表达情况,探讨GDF15表达改变的机制和意义.方法 选取2011年4月至2012年2月四川大学华西第二医院儿童血液肿瘤科收治的初诊HLH患儿为HLH组,选取同期年龄、性别与HLH组匹配的健康体检儿童为对照组.Omega Blood RNA Kit提取外周血总RNA,逆转录制备cDNA后Eva Green定量RT-PCR方法,检测HLH组和对照组的GDF15、Fn-H、HIF1α和HIF2α mRNA表达水平,△△Ct方法计算基因相对表达量.检测血生化指标.结果 HLH组18例,对照组19例.HLH组和对照组GDF15 mRNA相对中位表达量分别为4.584和1.490,HLH组显著高于对照组（P=0.039）;HLH组Fn-H mRNA表达水平显著高于对照组,相对中位表达量分别为3.955和1.690（P=0.008）,并与GDF15 mRNA相对表达呈正相关（r=0.573,P =0.013）;HLH组和对照组HIF1α和HIF2α mRNA相对表达水平差异无统计学意义（P分别为0.282和0.311）;GDF15 mRNA相对表达水平与初诊时最低Hb水平呈负相关（r=-0.576,P=0.015）,与血清铁蛋白、乳酸脱氢酶、网织红细胞计数、三酰甘油和纤维蛋白原水平无相关性.结论 HLH患儿外周血细胞GDF15 mRNA表达显著升高,但不依赖于HIF介导的缺氧感知信号路径.HLH情况下巨噬细胞异常持续活化很可能是GDF15和Fn-H mRNA表达上调的主要机制.     

儿童急性淋巴细胞白血病单个核细胞转铁蛋白受体2表达及其意义

目的 研究急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿单个核细胞转铁蛋白受体2(TFR2)基因表达情况,分析其与儿童ALL不同预后因素的相关性.方法 采用荧光定量逆转录聚合酶链反应法测定56例新发ALL患儿和15例对照患儿骨髓或外周血单个核细胞TFR2相对表达量.结果 泼尼松敏感组患儿TFR2相对表达量(中位数为0.0848)显著高于泼尼松不敏感组(中位数为0.0126,P=0.038).低危组、中危组和高危组TFR2相对表达量的中位数分别为0.1677、0.0728和0.0125.差异具有统计学意义(P=0.003).初诊时外周血白细胞(WBC)计数WBC<50×109/L、(50～100)×103/L和≥loo×103/L 3组患儿TFR2相对表达量的中位数分别为0.0974、0.0294和0.0078,差异也具有统计学意义(P=0.013).另外,B细胞ALL,和T细胞ALL患儿TFR2相对表达量的中位数分别为0.0636和0.0065,B细胞型TFR2表达水平显著高于T细胞型(P=0.004).秩相关统计分析表明,ALL患儿单个核细胞TFR2表达量与初始外周WBC总数、外周血幼稚细胞比例、幼稚细胞绝对计数的秩相关系数分别为-0.398、-0.307、-0.421,具有负相关关系(P分别为0.003、0.022、0.001).结论 TFR2可能为儿童ALL一个新的分子生物学预后因素,在ALL患儿预后评估和指导个体化治疗方面可能具有临床应用价值.