胃肠道间质瘤组织中PDGFRα和C-kit基因突变和蛋白表达的关系

目的:检测胃肠道间质瘤(GIST)中PDGFRα和C-kit基因突变及其蛋白表达的关系及在肿瘤形成中的作用.方法:采用单链象多态性聚合酶链式反应(PCR-SSCP),免疫组化和蛋白印迹(Western blot)方法,检测GIST 52例中PDGFRα和C-kit基因突变及蛋白表达情况.结果:GIST 52例中PDGFRα基因突变5例(9.6%),多见于梭形细胞型的胃源性GIST,C-kit基因突变28例(53.8%),多发生于小肠,并且这两种基因突变互相独立;PDGFRα蛋白表达率100%,C-kit蛋白的表达率为94.2%,突变的5例GIST PDGFRα强于C-kit突变的GIST,正常胃肠道组织和神经鞘瘤:突变与C-kit蛋白表达之间没有显著相关性(P=0.5332),而突变与PDGFRα蛋白表达之间呈显著相关性(P<0.0001).结论:GIST中PDGFRα和C-kit突变在部分GIST肿瘤发生过程中发挥了重要作用;突变位点与起源部位和组织学类型有关;大多GIST中蛋白表达与其基因突变关系密切.     

组织工程化成年心肌细胞的构建

背景：采用成年心肌细胞构建组织工程细胞已成为心脏疾病领域新的科研热点。 目的：探讨简单、快捷的成年大鼠心肌细胞分离方法,并初步探索组织工程化成年心肌细胞的构建方式。 方法：采用分段式酶消化方法消化成年大鼠心室肌心肌细胞。分别转染腺病毒和脂质体介导的红色荧光蛋白基因,倒置荧光显微镜、流式细胞仪检测组织工程细胞的构建效率。转染腺病毒介导的缺氧诱导因子1a,采用Western blot检测目标蛋白的表达。 结果与结论：采用分段式酶消化方法可获得大量心肌细胞。流式细胞分析表明所获得的成年心肌细胞的存活率为（87.03±0.70）%。与脂质体转染相比（转染效率为0）,腺病毒感染效率高,为（70.31±1.39）%,荧光显微镜下细胞发出红色荧光。在腺病毒转染第4天后,可有效表达目标蛋白缺氧诱导因子1a。以上结果表明分段式酶消化法是成熟心肌细胞的快速分离方式,并明确重组腺病毒载体是转染心肌细胞的最佳基因载体。     

结肠肝样腺癌1例

肝样腺癌是一种罕见的腺癌组织病理学亚型,相对常见于胃,少见于肠道。海军军医大学长海医院收治了1例44岁男性乙状结肠原发性肝样腺癌病例。肿瘤组织主要呈梁索状、巢片状排列,细胞呈大多角形,细胞质丰富嗜酸性,核大深染,异型明显。免疫组织化学示AFP、Arginase-1、Glypican-3、CDX-2阳性,不表达CgA、Syn。患者手术后预后不佳。结肠肝样腺癌是一种独特的肠腺癌亚型,诊断高度依赖于病理,生物学行为恶性程度高,需予以重视。     

胃肠道间质瘤中C-kit原癌基因突变体的构建及功能研究

目的:构建含突变C-kit基因cDNA的真核表达质粒并行进一步的功能分析.方法:用RT-PCR方法从人胎脑组织克隆野生型C-kit基因蛋白编码区cDNA.根据胃肠道间质瘤中检测出的C-kit基因突变序列,体外突变野生型C-kit cDNA得到突变型C-kit cDNA,与pcDNA3重组成真核表达质粒,并用脂质体法稳定转染人胚胎肾细胞(human embryonic kidney cell,HEK)293细胞系,G418加压筛选出阳性克隆;用Western印迹法检测转染细胞KIT蛋白表达,绘制细胞生长曲线,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测转染HEK 细胞后细胞周期改变,并观察稳定转染突变型重组质粒人胚肾细胞在裸鼠内的成瘤性.分别设转染pcDNA3空白质粒和野生型的C-kit cDNA真核表达质粒的HEK细胞做为对照.结果:构建了突变型C-kit cDNA与pcDNA3的真核表达质粒; 功能检测分析表明:细胞生长曲线显示与对照组相比,实验组的生长速度明显增快;MTT比色显示,与对照组相比实验组细胞增殖活性显著增强;细胞周期检测结果显示,处于增殖期细胞(S G2-M)比例显著高于对照组;体内结果显示转染突变型C-kit基因的HEK细胞在裸鼠体内成瘤.结论:C-kit原癌基因突变体可促使人类细胞生长加快,增殖活性明显增强,并可以使更多的细胞由静止期进入增殖期, 并可使人胚胎肾细胞发生恶性转化,提示C-kit基因突变有可能是引起胃肠道间质瘤恶性转化的关键机制之一.     

强化临床病理住院医师规范化培训过程与考核体系

临床病理住院医师的规范化培训具有独特的专业特点,其培训过程与考核体系均应根据本专业的特点设置和执行。培训过程中应对受训人员做好专业思想教育,加强病理诊断基本功的训练,同时安排相应的系列讲座、及病例讨论,并与日常考核相联系,帮助受训人员完成培训任务并成为合格的病理医师。     

食管间质瘤的临床病理及免疫组织化学研究

胃肠道间质瘤 (ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｓｔｒｏｍａｌｔｕｍｏｒ,ＧＩＳＴ)作为一组独立的消化道间叶源性肿瘤 ,其发生于胃和肠已被人们所熟知 ,食管是否亦存在原发性间质瘤则颇有争议[1,2 ] 。我们通过 14例食管间质瘤患者的临床病理及免疫组织化学研究分析 ,探讨食管间质瘤的临床病理学特征、免疫表型特征 ,以期提高对这一肿瘤的认识。1 材料与方法 :(1)组织标本 :收集我院 1991～ 2 0 0 0年间 5 7份资料完整的食管间叶源性肿瘤病理标本 ,根据目前的组织病理学和免疫组织化学诊断标准重新复查 ,其中 14例确诊为胃肠道间质瘤 ,…     

免疫组织化学阳性标记结果的观察和判断

免疫组织化学标记结果的判断是以观察组织片阳性或阴性染色为前提，就阳性染色而言，应着重观察阳性染色颗粒在细胞中存在的位置和分布形式，因为它直接反映抗原在细胞中定位和分布情况，而抗原的存在与否及其在细胞中的定位正是免疫组化诊断的重要依据。在免疫组化标记中，观察阳性染色颗粒定位有助于区别假阳性反应；决定抗原定位     

巢蛋白(Nestin)在胃肠道间质瘤组织中的表达及其临床意义

目的　通过检测胃肠道间质瘤 (GIST )组织中巢蛋白 (nestin)的表达 ,探讨nestin在GIST的诊断、鉴别诊断及起源中的意义。方法　应用免疫组织化学技术EnVision微波二步法 ,检测 94例GIST (良性 44例 ,恶性 5 0例 )组织中nestin蛋白的表达 ,并与平滑肌瘤和平滑肌肉瘤进行对照研究。结果　GIST组织中nestin的阳性表达率为 95 .7% ( 90 /94) ,良、恶性组nestin的阳性率分别为 97.7% ( 4 3 /4 4)、94.0 % ( 4 7/5 0 )。 2组的表达水平无显著性差异 (P >0 .0 5 )。平滑肌瘤和平滑肌肉瘤nestin表达均阴性。结论　Nestin作为胃肠道间质瘤的 1种特异而敏感的新标志物 ,对GIST的诊断及鉴别诊断有重要意义 ,但不能作为GIST分化程度的指标 ,同时提示GIST可能起源于向卡哈尔细胞 (ICC )表型分化的干细胞。