三部开窍利咽针刺辅助吞咽功能训练治疗急性缺血性脑卒中后吞咽功能障碍的临床研究

目的：分析三部开窍利咽针刺辅助吞咽功能训练治疗急性缺血性脑卒中(AIS)后吞咽功能障碍的临床疗效。方法：选定山东省滕州市中心人民医院2020年1月—2022年1月住院的112例AIS后吞咽功能障碍患者展开回顾性研究，根据治疗方案的不同将其分为两组，每组56例，对照组给予吞咽功能训练，观察组在对照组基础上给予三部开窍利咽针刺治疗，比较两组临床疗效、吞咽功能评定量表(SSA)评分、吞咽X线荧光透视检查(VFSS)评分、洼田氏饮水试验、不良事件总发生率、吞咽障碍特异性生活质量量表(SWAL-QOL)评分和改良的Barthel量表(MBI)评分。结果：观察组临床总有效率为96.43%(54/56),高于对照组总有效率的75%(42/56),差异具有统计学意义(P<0.01)。观察组治疗后SSA评分低于对照组，差异具有统计学意义(P<0.01),观察组治疗后VFSS评分高于对照组，差异具有统计学意义(P<0.01)。观察组治疗后洼田氏饮水试验1级率23.21%(13/56)、2级率41.08%(23/56)均高于对照组7.14%(4/56)、28.57%(16/56),差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组不良事件总发生率1.79%(1/56)低于对照组的14.29%(8/56),差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗后SWAL-QOL评分、MBI评分均高于对照组，差异具有统计学意义(P<0.01)。结论：三部开窍利咽针刺辅助吞咽功能训练可有效减轻AIS后吞咽功能障碍患者吞咽困难、饮水呛咳等症状，降低吸入性肺炎等不良事件发生率，改善生活质量及自理能力，临床疗效显著。     

丁基苯酞对大鼠骨髓间充质干细胞氧化应激损伤保护机制的研究

目的 研究丁基苯酞(DL-3-n-butylphthalide,NBP)对双氧水(hydrogen peroxide,H2O2)诱导的大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow stem cells,rBMSCs)氧化应激损伤的保护机制.方法 采用H2O2制作rBMSCs氧化应激损伤模型.实验分为对照组、H2O2损伤组、不同浓度NBP预处理组(0.1μmol组、1μmol组、10μmol组、100μmol组).不予H2O2及NBP处理的细胞为对照组;H2O2损伤组以终浓度为600μmol的H2O2处理4h制作氧化应激损伤模型;NBP处理组以不同浓度NBP预处理rBMSCs 24h后,再予以终浓度为600μmol的H2O2处理4h.采用MTT法检测各实验组的细胞活力;油镜观察各组细胞形态;流式细胞仪检测各实验组的细胞凋亡率;Westem bolt法检测各实验组Caspase-3的表达情况.结果 NBP可明显降低H2O2对rBMSCs的损伤作用、抑制rBMSCs的凋亡、下调Caspase-2的表达.结论 NBP对H2O2诱导的rBMSCs氧化应激损伤具有保护作用,其机制可能与NBP的抗凋亡作用有关.     

17-β雌二醇抑制过氧化氢诱导鼠脊髓星形胶质细胞凋亡

目的 探讨17-β雌二醇治疗脊髓损伤的可能机制,以期为临床急性脊髓损伤的治疗提供理论依据.方法 建立原代培养的星形胶质细胞凋亡模型,将培养的细胞按随机排序的方法分为5组:对照组、过氧化氢组、l7-β雌二醇+过氧化氢组、17-β雌二醇组、二甲基亚砜溶剂组.利用四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞活性,蛋白免疫印迹检测第10号染色体缺失的磷酸酶与张力蛋白同源物基因(PTEN)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)和B细胞淋巴瘤/白血病-2( Bcl-2)蛋白的表达.结果 与对照组(0.401±0.043)比较,过氧化氢处理后(0.172 ±0.018)吸光度(A)值明显降低(q’=-1.450,P =0.001),可反映细胞生存率、活力降低,而17-β雌二醇预处理后(0.312±0.023),A值增加(q’=7.025,P=0.0025),提示细胞生存率增加及细胞活力上升,各组间比较A值差异也存在统计学意义;PTEN蛋白表达降低、Bcl-2表达上调;caspase-3表达降低、p-Akt表达上调.结论 17-β雌二醇有可能通过下调PTEN蛋白,促进p-Akt、Bcl-2蛋白的表达,抑制过氧化氢诱导星形胶质细胞凋亡.因此,脊髓损伤时早期应用17-β雌二醇有助于减轻脊髓损伤的程度,促进脊髓神经功能的恢复.     

自体骨髓间充质干细胞移植治疗神经系统疾病的临床研究

目的:探讨应用自体骨髓间充质干细胞(MSCs)移植治疗神经系统疾病的临床疗效。方法:收集患者24例,包括持续植物状态(PVS)12例、运动神经元病11例、桥脑小脑萎缩1例。入院后经骨髓穿刺采集自体骨髓,当天分离回输1×108个单个核细胞,剩余细胞进行MSCs培养扩增,待MSCs数量增至约1×108个细胞后收集细胞,经腰椎穿刺推注。治疗前后对患者神经功能变化分别进行评价。结果:12例PVS患者中,PVS评分提高、肌力改善5例;11例运动神经元病患者和1例橄榄桥脑小脑萎缩患者中,肌力、构音障碍改善5例。结论:MSCs移植治疗可以部分缓解神经系统疾病的症状,近期疗效明显,无不良反应,远期疗效还需进一步随访和观察。     

大鼠皮质星形胶质细胞氧糖剥夺后Slit2、Robo1的表达研究

目的探讨神经生长导向因子slit2及其受体robo1在氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)不同时间后大鼠皮质星形胶质细胞的表达变化及其意义。方法建立培养乳大鼠皮质星形胶质细胞OGD模型,并分为OGD 0h组(对照组)、2h组、4h组、6h组和12h组。相差显微镜观察各组的细胞形态,MTT法检测各组的细胞活力,RT-PCR法检测各组slit2mRNA和robo1 mRNA的相对表达情况。结果 (1)对照组、OGD 2h组、4h组、6h组和12h组的细胞活力(OD值)分别为0.756±0.013、0.681±0.016、0.563±0.033、0.404±0.024和0.222±0.026,细胞活力随着氧糖剥夺时间延长而下降,呈时间依赖性(P0.01)。(2)氧糖剥夺后,统计结果显示不同组别星形胶质细胞slit2 mRNA和robo1 mRNA表达先逐渐升高,6h组达高峰(与对照组比,P0.05),12h组明显下降(与6h组比,P0.01)。结论 slit2/robo1信号通路可能参与缺血后抑制性微环境的形成,影响神经的再生修复过程。     

可植入温敏水凝胶的合成及性质研究

目的:合成满足植入给药载体要求的温度敏感型PLGA-PEG-PLGA嵌段共聚物,并对其结构和性质进行研究.方法:采用开环聚合法,以不同比例的丙交酯、乙交酯和PEG为原料,异辛酸亚锡为催化剂,合成PLGA-PEG-PLGA嵌段共聚物.通过考察不同嵌段共聚物的相变温度和黏度,筛选确定符合植入给药载体要求的合成条件和投料比例.结果:合成的凝胶材料,经FTIR和1H-NMR检测,材料符合PLGA-PEGPLGA嵌段共聚物特征.经筛选,按丙交酯-乙交酯-PEG 1500(6:1:3)的质量比投料,0.1%(W/W)催化剂用量,在真空条件下140℃反应12 h,可以得到满足植入给药要求的栽体材料.结论:采用开环聚合法,可以合成温敏型PIGA-PFGA嵌段共聚物,其相变温度可过改变丙交酯、乙交酯投料比例和PEG的相对分子质量在一定范围内调节.实验合成的共聚物在质量分教为20%时.相变温度35℃,黏度与55%甘油水溶液相当,形成的凝胶具备一定的刚性,材料无有机溶剂残留,符合植入蛤药载体的要求.     

应用高分辨磁共振对短暂性脑缺血发作和轻型卒中患者颈动脉斑块分型的研究

目的 利用高分辨磁共振成像技术评估并比较短暂性脑缺血发作（Transient ischemic attack,TIA）及轻型卒中患者的颈动脉粥样硬化斑块类型,探讨两者之间是否存在差异。方法 选取2018年10月—2020年12月于滕州市中心人民医院诊断为TIA的28例患者及诊断为轻型卒中的25例患者行颈动脉高分辨磁共振检查,观察是否存在动脉粥样硬化斑块及斑块的脂质纤维成分、纤维帽、斑块内出血、钙化等逐层对比分析并进行分型,并选取同期健康对照组20名一起比较。结果 三组的无颈动脉粥样硬化斑块检出率比较,差异有统计学意义（P<0.05）,三组患者Ⅳ-Ⅴ型及Ⅵ型斑块所占比例不同,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 高分辨磁共振技术对TIA及轻型卒中患者颈动脉粥样硬化斑块是一种有效可行的临床评估手段,轻型卒中患者斑块易损性显著高于TIA患者,具体原因需进一步探讨。     

神经导向因子Netrin-1基因转染大鼠骨髓间充质干细胞的体外实验

目的:将携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因标记和Netrin-1基因的腺病毒(Ad5-Netrin-1-CMV-EGFP)转染骨髓间充质干细胞(BMSCs),观察其对BMSCs分泌细胞因子、自身分化和小管形成的影响.方法:体外分离培养大鼠BMSCs,转染病毒后,real-time PCR检测BMSCs表面受体,RT...