2型糖尿病大鼠心室肌细胞离子通道功能和表达变化

目的:探讨2型糖尿病大鼠心室肌细胞离子通道电流及其相关蛋白表达的改变。方法:采用Zucker糖尿病肥胖(Zucker diabetic fatty,ZDF)大鼠建立2型糖尿病大鼠模型,Zucker瘦型(Zucker lean,ZL)大鼠为对照组。采用急性酶解法分离大鼠单个心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录其动作电位、L型钙通道电流(I_Ca-L)及瞬时外向钾电流(I_to)的变化;提取大鼠心肌组织蛋白,采用Western blot检测心肌细胞肥大标志物β-肌球蛋白重链(β-myosin heavy chain,β-MHC)和心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP),以及L型钙通道(Cav1.2)和钾通道(Kv4.3)的蛋白表达水平。结果:用高脂饮食诱导ZDF大鼠成功建立2型糖尿病模型;与ZL大鼠相比,ZDF大鼠心室肌细胞的动作电位时程显著延长,I_Ca-L和I_to密度显著降低[峰值分别为(?5.96±0.37)pA/pF vs(?4.92±0.30)pA/pF,(12.43±0.86)pA/pF vs(7.48±0.58)pA/pF,均P<0.05];与ZL大鼠相比,ZDF大鼠心肌组织中β-MHC和ANP的表达水平明显增加,伴有Cav1.2和Kv4.3蛋白表达下降(P<0.05)。结论:与ZL大鼠相比,2型糖尿病大鼠心肌细胞肥大,心室肌细胞动作电位时程延长,I_Ca-L和I_to密度及其相关蛋白表达水平降低,提示糖尿病大鼠心室肌细胞发生电生理重构。     

长链脂肪乳对反复种植失败患者外周血Treg细胞比例失衡的调节作用

目的：探讨长链脂肪乳对反复种植失败（repeated implantation failure,RIF）患者外周血调节性T细胞（regulatory T cells,Treg）比例失衡的调节作用。方法：选择2016年5—12月在南京鼓楼医院生殖中心行辅助助孕RIF患者75例,静脉长链脂肪乳治疗后分别用流式细胞技术检测外周血Treg细胞亚群比例。结果：75例RIF患者经静脉脂肪乳治疗后,外周血中Treg细胞亚群比例为（2.46±1.23）%,较治疗前的（2.30±0.83）%虽有所上升,但差异无统计学意义。进一步分析治疗前外周血Treg细胞比例异常降低的35例RIF患者,结果显示,静脉脂肪乳治疗后,该组RIF患者外周血中Treg细胞亚群比例为（2.18±0.64）%,较治疗前的（1.63±0.29）% 显著上升,差异有统计学意义（P < 0.001）。结论：长链脂肪乳对于RIF患者外周血Treg细胞比例失衡具有调节作用,可能在诱导免疫耐受,促进胚胎植入,降低流产率中发挥作用。     

槲皮素和原花青素对豚鼠白癜风模型黑素合成的影响

目的：明确槲皮素、原花青素单体对白癜风豚鼠皮肤黑素合成的影响。方法：利用过氧化氢构建38例豚鼠白癜风模型成功后,随机分为5组,分别给予乙醇（A组）、蒸馏水（B组）、0.1%8-甲氧补骨脂素（8-MOP）（C组）、0.5%槲皮素（D组）、0.1%原花青素（E组）以及0.3%原花青素（F组）外涂皮肤,其中C组用药1h后予日光照射10min。治疗期间,每2周拍摄记录豚鼠皮损色素沉着。40天后,处死全部模型并取被试区皮肤。肉眼下及HE染色观察皮肤基本病理改变;黑素颗粒染色法（Fontana-Masson法）检测含黑素颗粒细胞数量。结果：除A、B组外,其余4组在治疗期间均出现不同程度色素沉着。HE染色发现,与A、B组相比,其余4组皮肤厚度更厚,色沉较明显。Fontana-Masson法显示,与A、B组相比,其余4组黑素颗粒明显增多（P均<0.05）,其中,D、F组明显多于E组（P均<0.05）。结论：槲皮素以及原花青素单体对白癜风豚鼠模型的皮肤具有复色作用。     

1型糖尿病小鼠心房肌细胞电重塑及AGE对其的影响

目的探讨1型糖尿病小鼠及AGE参与心房肌细胞电重塑机制研究。方法STZ腹腔注射小鼠,诱导1型糖尿病模型;全细胞膜片钳技术检测糖尿病小鼠心房肌细胞动作电位时程、I Ca,L、I to及I kur电流变化;Western blot检测心房肌组织AGE、RAGE及通道蛋白表达水平;AGE/RAGE处理HL-1细胞,检测离子通道蛋白的表达。结果与对照组相比,糖尿病小鼠随机血糖水平明显上升,心房肌细胞动作电位时程明显延长,I Ca,L、I to、I kur电流密度及通道蛋白Cav1.2、Kv4.3、Kv1.5表达均明显降低,AGE、RAGE蛋白水平增加;AGE诱导HL-1细胞离子通道蛋白明显下调,Anti-RAGE预处理可逆转其作用。结论1型糖尿病心房肌细胞动作电位明显延长,I Ca,L、I to、I kur电流及其通道蛋白表达降低;AGE参与HL-1心房肌细胞电重塑。     

钙感受器STIM1在小鼠主动脉平滑肌收缩反应中的作用研究

目的探讨钙感受器STIM1在小鼠主动脉平滑肌收缩反应中的作用。方法采用Cre-lox重组技术制备平滑肌特异性STIM1敲除小鼠(sm-STIM1-KO);采用离体血管张力测定方法,测定sm-STIM1-KO小鼠主动脉对不同血管收缩剂反应,并给予不同的钙通道阻断剂,观察血管收缩变化。结果sm-STIM1-KO小鼠制备成功。sm-STIM1-KO小鼠钙库操纵的钙通道(SOCC)介导的血管收缩消失;与野生型相比,sm-STIM1-KO小鼠对Phe、5-HT和U46619总的收缩反应无明显变化,但在有钙和无钙的K-H溶液中,经硝苯地平孵育后,两组血管收缩均被抑制,且sm-STIM1-KO小鼠收缩明显低于野生型小鼠(P<0.01);在含硝苯地平的高钾溶液中,Phe引起的快相收缩没有变化,慢相收缩下降(P<0.01);sm-STIM1-KO小鼠肌浆网钙释放介导的血管收缩达峰速度和下降速度明显加快(P<0.05)。结论STIM1是SOCC介导的血管收缩的必须组成成分,且参与肌浆网钙释放介导的血管收缩反应。