番茄红素对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的 研究番茄红素对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响及其机制.方法 取对数生长期人肝癌HepG2细胞,分别给予不同浓度番茄红素(5、10、20 μg/ml)和顺铂(40 μg/ml)进行干预,48 h后通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖抑制率,通过流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡状况,采用Western blotting技术检测Bax、Bcl-2、激活型Caspase-3蛋白表达.结果 干预48 h后,空白对照组人肝癌HepG2细胞增殖抑制率为0,番茄红素(5、10、20 μg/ml)组和顺铂组分别为(21.3±4.2)％、(40.5±7.6)％、(63.8±9.1)％和(37.8±5.9)％,差异有统计学意义(F=37.905,P=0.000);它们分别与空白对照组比较,差异均具有统计学意义(t=208.124,P=0.000;t=394.637,P=0.000;t=628.592,P=0.000;t =257.168,P=0.000).番茄红素(10、20μg/ml)组细胞周期G0-G1期比例分别为(54.0±2.9)％、(67.3±3.6)％,与空白对照组(37.9±1.5)％比较,差异有统计学意义(t =4.508,P=0.024;t=10.673,P=0.006);番茄红素(10、20 μg/ml)组G2-M期比例分别为(8.5±0.6)％、(4.7±0.5)％,与空白对照组比较(18.4±0.8)％,差异有统计学意义(t=9.975,P=0.008;t=13.864,P=0.003).番茄红素组(5、10、20 μg/ml)和顺铂组细胞凋亡指数分别为(19.5±4.8)％、(43.0±9.2)％、(67.6±10.1)％和(36.9±6.8)％,与空白对照组[(3.6±1.7)％]比较均显著升高,差异有统计学意义(t=18.617,P=0.001;t=34.295,P=0.000;t=51.437,P=0.000;t =29.804,P=0.000).番茄红素(10、20 μg/ml)组和顺铂组Bel-2、Bax表达及Bax/Bcl-2比值分别为0.42±0.09、0.43 ±0.14、1.02±0.39,0.27±0.08、0.76 ±0.19、2.81 ±0.85和0.34 ±0.11、0.31 ±0.09、0.91 ±0.40,与空白对照组(0.59 ±0.17、0.18 ±0.06、0.31 ±0.12)比较,Bcl-2表达显著下调,差异具有统计学意义(t=4.327,P=0.023;t=11.064,P=0.006;t =5.182,P=0.018),Bax表达显著上调,差异具有统计学意义(t=9.837,P =0.008;t=17.349,P=0.001;t=10.165,P=0.007),Bax/Bcl-2比值显著升高,差异均具有统计学意义(t=11.521,P=0.006;t=18.194,P=0.001;t=9.537,P=0.008).番茄红素(5、10、20 μg/ml)组和顺铂组激活型Caspase-3蛋白表达分别为0.25 ±0.07、0.34 ±0.11、0.46 ±0.18和0.17 ±0.05,与空白对照组(0.08±0.03)比较,差异具有统计学意义(t=8.307,P=0.009;t=13.067,P=0.006;t=16.218,P=0.003;t=5.202,P=0.019).结论 番茄红素能够通过抑制细胞增殖并促进其凋亡而对人肝癌HepG2细胞生长起到一定的抑制作用,其机制可能与番茄红素能够影响细胞周期进程并调节凋亡相关基因蛋白表达有关.     

α硫辛酸对阿尔茨海默病模型大鼠海马区CREB、Bcl-2表达的影响

目的观察α硫辛酸对阿尔茨海默病模型大鼠海马区cAMP反应元件结合蛋白(p-CREB)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达的影响。方法将24只清洁级SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、α硫辛酸组,每组各8只。采用双侧海马一次性注射Aβ1-42的方法在模型组及α硫辛酸组中建立AD大鼠模型。同时α硫辛酸组给予腹腔注射α硫辛酸100 mg/(kg·d)。采用Morris水迷宫实验观察大鼠空间记忆能力,HE染色观察大鼠海马区锥体细胞的形态学变化,同时采用Western Blot方法检测各实验组大鼠脑海马组织中p-CREB,Bcl-2蛋白表达情况。结果 Morris水迷宫测试显示AD模型大鼠的学习记忆能力的明显下降,经α硫辛酸治疗的AD模型大鼠学习记忆得到改善。HE染色显示,AD模型组海马CAl区锥体细胞数量明显减少,排列稀疏,结构紊乱;α硫辛酸组大鼠海马数量和形态均不同程度恢复。AD模型组中大鼠海马组织中p-CREB,Bcl-2蛋白水平较假手术组明显降低(P0.01);给予α硫辛酸干预后大鼠海马p-CREB,Bcl-2蛋白水平较模型组明显增多(P0.01)。结论α硫辛酸能够提高AD模型大鼠的学习记忆能力,可能是通过CREB-Bcl-2信号通路的活化来实现的。     

大蒜素对大鼠深Ⅱ度烧伤创面微循环的改善作用

目的:探讨大蒜素对大鼠深Ⅱ度烧伤创面微循环的改善作用。方法:将150只Wistar大鼠随机分为假烧伤组、模型组、大蒜素(低、中、高剂量)组(5 mg·kg^-1、10 mg·kg^-1、20 mg·kg^-1),每组30只。采用加压0.03 MPa、高温106℃持续5 s的方法制备大鼠深Ⅱ度烧伤模型;模型制备成功后,各组腹腔注射给予相应药物,假烧伤组、模型组给予同体积生理盐水,疗程14 d。各组大鼠烧伤创面行肉眼观察及HE染色病理学检查,计算创面愈合率;检测创面组织微循环血流灌注值(microcirculation perfusion valued, MPD)和含水量;测定血小板聚集率,ELISA法检测血清可溶性血管细胞黏附分子1(soluble vascular cell adhesion molecule-1,sVCAM-1)、血管紧张素-Ⅱ(angiotensin-Ⅱ,Ang-Ⅱ)含量;硝酸还原酶法测定血清一氧化氮(nitric oxide, NO)含量;Western blot法检测创伤面内皮素1(endothelin-1,ET-1)、一氧化氮合成酶(nitric oxide synthase, NOS)蛋白表达。结果:与模型组比较,大蒜素各剂量组大鼠创面缩小、创面愈合状况及病理学改变呈不同程度改善;大蒜素中、高剂量组创面愈合率升高,MPD升高而含水量降低,血小板聚集率降低,血清sVCAM-1、Ang-Ⅱ、NO含量降低,创面组织ET-1蛋白表达量降低、NOS蛋白表达量升高,差异均具有统计学意义(P<0.05;P<0.01),且大蒜素高剂量组效果最优。结论:大蒜素能够通过改善局部微循环而促进大鼠深Ⅱ度烧伤创面愈合,其机制可能与降低血小板聚集、抑制内皮细胞黏附、促进血管扩张有关。     

芹菜素对大鼠烧伤创面微循环改善作用的研究

目的探讨芹菜素对大鼠烧伤创面微循环的改善作用及机制。方法 180只雄性Wistar大鼠按随机数字表法随机分为假烧伤组、模型组、磺胺嘧啶银软膏单药组和磺胺嘧啶银软膏+芹菜素低、中、高剂量组,各30只,采用压力0.03MPa、106℃持续5s的方法制备深II度烧伤大鼠模型。假烧伤组和模型组腹腔注射0.9%氯化钠溶液2mL,每天1次;磺胺嘧啶银软膏单药组于烧伤皮肤涂抹磺胺嘧啶银软膏,每2天换药1次,腹腔注射0.9%氯化钠溶液2mL,每天1次;磺胺嘧啶银软膏+芹菜素低、中、高剂量组于烧伤皮肤涂抹磺胺嘧啶银软膏,每2天换药1次,腹腔注射相应浓度芹菜素溶液(12.5、25、50mg/kg),疗程14天。观察各组大鼠创面大体情况、HE染色法行创面组织病理学检查,计算烧伤创面愈合率,检测创面组织微循环血流灌注值(MPD)、微血管密度(MVD)和创面组织含水量,Western blot法检测表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞因子(b-FGF)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达量。结果与模型组比较,磺胺嘧啶银软膏+芹菜素低、中、高剂量组烧伤大鼠创面新生上皮生长活跃、病理性形态结构明显改善,创面愈合率增加[(61.09±6.85)%、(65.41±7.32)%、(71.70±8.74)%比(30.24±4.58)%,P均0.01];创面组织MPD、MVD表达上调[MPD:(482.64±115.07)PU、(648.25±130.64)PU、(936.27±189.61)PU比(362.48±75.93)PU,P均0.01;MVD:(24.17±1.75)piece/mm~2、(29.62±2.28)piece/mm~2、(34.16±2.53)piece/mm~2比(21.19±1.24)piece/mm~2,P均0.01];创面组织EGF、bFGF、VEGF表达显著上调[EGF:(0.49±0.09)、(0.57±0.11)、(0.63±0.13)比(0.39±0.05),P均0.01;bFGF:(0.21±0.06)、(0.39±0.09)、(0.52±0.14)比(0.15±0.02),P均0.01;VEGF:(0.35±0.10)、(0.51±0.14)、(0.68±0.17)比(0.27±0.05),P0.05或P0.01];磺胺嘧啶银软膏+芹菜素中、高剂量组创面组织含水量显著低于模型组[(68.69±1.19)%、(68.27±1.20)%比(70.41±1.28)%,P均0.01];与磺胺嘧啶银软膏单药组比较,磺胺嘧啶银软膏+芹菜素中、高剂量组创面组织病理性形态结构改变改善更明显,创面愈合率增加[(65.41±7.32)%、(71.70±8.74)%比(58.37±7.01)%,P0.05或P0.01];创面组织MPD、MVD表达上调[MPD:(648.25±130.64)PU、(936.27±189.61)PU比(445.35±90.18)PU,P均0.01;MVD:(29.62±2.28)piece/mm~2、(34.16±2.53)piece/mm~2比(22.78±1.39)piece/mm~2,P均0.01];创面组织EGF、bFGF、VEGF表达显著上调[EGF:(0.57±0.11)、(0.63±0.13)比(0.42±0.07),P均0.01;bFGF:(0.39±0.09)、(0.52±0.14)比(0.17±0.04),P均0.01;VEGF:(0.51±0.14)、(0.68±0.17)比(0.31±0.07),P均0.01]。结论芹菜素能够通过改善大鼠深II度烧伤创面微循环而促进创面愈合,其机制可能与促进创面血管新生有关。     

腹腔镜及医用OB胶在小儿肠套叠中的应用

目的:探讨腹腔镜及医用OB胶在小儿肠套叠中的应用价值.方法:2002年9月至2010年6月为28例肠套叠患儿施行腹腔镜肠套叠复位OB胶固定术.均气管插管全麻,腹腔镜下判断套叠类型及严重程度,发现继发性肠套叠或有肠坏死等则中转开腹,并采取相应的手术方式.结果:26例采取腹腔镜复位OB胶固定成功.1例发生肠坏死、1例合并美...     

64例高血压脑出血患者微创血肿清除术的术后护理

【目的】总结高血压脑出血患者微创血肿清除术后的护理经验。【方法】对64例高血压脑出血患者采取微创手术治疗,术后密切观察病情,加强护理,积极防治并发症。[结果]64例中20例治愈出院,33例好转出院,有效率82．8％,3例无变化,3例恶化而放弃,5例死亡。【结论】高血压脑出血微创手术治疗后配合以密切的观察、精心的护理,使治疗达到良好的效果。     

大蒜素对大鼠深II度烧伤创面细胞凋亡的抑制作用及其机制

目的 探讨大蒜素对大鼠深II度烧伤创面细胞凋亡的抑制作用及其机制。方法 将150只实验用Wistar大鼠随机分为假烧伤组，模型组，大蒜素低、中、高剂量组（5、10、20 mg/kg）5组，每组30只。采用加压0.03 MPa、高温106 ℃持续5 s的方法复制大鼠深II度烧伤模型；1次/天腹腔注射液给药（假烧伤组、模型组给予0.9%氯化钠溶液），疗程14天。观察各组大鼠烧伤创面大体情况并经HE染色行创面组织病理学检查，计算创面愈合率；TUNEL法检测细胞凋亡状况、计算凋亡指数（AI），Western blot法检测bcl-2、Bax、PI3K、p-Akt及NF -B蛋白表达；生化分析法检测创面组织中SOD、CAT活性及MDA含量。结果 与模型组相比，大蒜素各剂量组烧伤创面呈不同程度缩小，新愈合皮肤红润且病理性形态结构改变呈不同程度改善，以大蒜素高剂量组最为显著；大蒜素中、高剂量组创面愈合率升高，创面组织凋亡细胞数明显减少、AI显著降低，bcl-2、PI3K、p-Akt蛋白表达显著上调而Bax、NF-B表达显著下调、bcl-2/Bax比值升高，SOD、CAT活性显著升高且MDA含量显著降低,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论 大蒜素能够通过抑制细胞凋亡而促进大鼠深II度烧伤创面愈合，其机制可能与调控凋亡相关蛋白表达、激活PI3K/Akt信号通路以及抑制氧化应激等有关。     

CEA,CA 19-9与CA 125联合检测对良恶性腹水的鉴别诊断价值

目的探讨联合检测腹水和血清CEA,CA 19-9和CA 125对良恶性腹水鉴别诊断的价值。方法应用蛋白质芯片技术分别测定良性和恶性腹水病人腹水和血清的CEA、CA 19-9和CA 125水平,并评价多项肿瘤标志物联合检测对良恶性腹水的诊断价值。结果恶性腹水组腹水和血清CEA,CA 19-9水平较良性腹水组升高(P0.01),恶性腹水组腹水CA125水平较良性腹水组升高(P0.05),但两组血清CA 125水平没有显著性差异(P0.05)。腹水CEA、CA 19-9、CA 125联合检测诊断恶性腹水的敏感性、特异性和准确性分别为81.8%、68.0%和85.1%;血清CEA、CA 19-9联合检测的敏感性、特异性和准确性分别为77.3%、56.0%和83.0%。结论检测肿瘤标志物CEA、CA 19-9及CA 125有助于良恶性腹水的鉴别诊断,腹水利血清CEA、CA 19-9和CA 125联合检测可提高诊断恶性腹水的敏感性和准确性。     

大蒜素对大鼠深Ⅱ度烧伤创面氧化应激和炎症反应的影响

目的:研究大蒜素对大鼠深Ⅱ度烧伤创面氧化应激、炎症反应的影响及其对创面愈合的促进作用。方法:150只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组及大蒜素低、中、高剂量(5、10、20 mg·kg^-1)组,每组30只;采用加压0.03 MPa、高温106℃持续5 s的方法复制大鼠深Ⅱ度烧伤模型;腹腔注射液给药,每日1次,假手术组、模型组给予0.9%氯化钠溶液,共给药14 d;分别通过苏木精-伊红(HE)染色、DNA断裂原位末端标记法(TUNEL)行创面组织病理学检查和细胞凋亡状况观察,计算创面愈合率和含水量;生化分析法检测创面组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、髓过氧化物酶(MPO)活性和丙二醛(MDA)水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清炎症细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-8水平;蛋白免疫印迹法(Western blotting)法检测创面组织中磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达水平。结果:与模型组比较,大蒜素低、中、高剂量组大鼠烧伤创面组织病理形态结构呈不同程度改善,其中大蒜素高剂量组最为显著;大蒜素中、高剂量组大鼠创面愈合率升高且含水量降低,创面组织中凋亡细胞数明显减少,凋亡指数(AI)显著降低;SOD、CAT、MPO活性升高且MDA含量降低,血清炎症细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8水平降低,p-PI3K、NF-κB表达量显著下调,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:大蒜素能够通过抑制氧化应激、炎症反应促进大鼠深Ⅱ度烧伤创面愈合,其机制可能与改善抗氧化酶活性、抑制p-PI3K/NF-κB信号通路有关。