天津地区临床分离株结核分枝杆菌分子流行病学研究

目的探讨天津地区结核分枝杆菌临床分离株分子流行病学特征。方法连续收集天津市海河医院2005年8月16日～11月25日就诊病人痰培养阳性的结核分枝杆菌100株，采用间隔区寡核苷酸分型（Spoligotyping）和数目可变串联重复序列（VNTR）两种方法进行基因分型，并运用软件对二者的结果进行分析。依据北京分化支的定义。运用多重和实时定量PCR方法将其区分为W菌/典型北京家族菌株和非典型北京菌株，x^2检验分析两种亚群与患者年龄和耐药性之间的联系。结果排除污染菌株，共对96株结核分枝杆菌临床分离株进行两种方法的基因分型，Spoligotyping结果为91．7％为北京基因型（含3株类北京基因型）结核分枝杆菌（88／96）。VNTR分型可将北京基因型分为60种基因型。在北京分化支结核分枝杆菌中，W菌/典型北京家族菌株占93．2％（82／88）。两种北京分化支亚群与患者年龄和耐药性没有显著性统计学差异（P〉0.05）。结论天津地区结核病患者临床分离的结核分枝杆菌中，北京基因型呈现较为明显的优势。VNTR的分辨率明显高于Spoligotyping。北京分化支的两种亚群在天津地区临床结核病患者中均存在流行，但以W菌/典型北京家族菌株为主。     

结核分枝杆菌DNA分型技术及其应用

在结核分枝杆菌基因组插入序列中，IS6110是最有特点的插入序列，同时结核分枝杆菌基因组内除IS6110插入序列外。还有多个插入序列和重复元件。如IS1081、PGRS、VNTR、DR等等，利用这些插入序列或重复序列，通过扩增或酶切杂交获得象人体指纹一样的特异带型，即DNA指纹图谱，由此建立的方法就称为DNA指纹技术。     

北京市复治结核病患者非北京基因型菌株谱系及耐药分析

目的 了解北京市复治结核病患者非北京基因型菌株谱系及耐药情况,为复治非北京基因型结核病患者有效防治提供科学依据。方法 采用RD105基因缺失法对复治患者所分离的结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis, MTB）进行检测,筛查出非北京基因型菌株,使用可变数目串联重复序列基因分型实验分析非北京基因型菌株的遗传特征,再使用比例法药敏实验及全基因组测序分析其耐药情况。结果 134例复治结核病患者所分离的MTB中,北京基因型为 125例（93.3%）,非北京基因型为9例（6.7%）。9例非北京基因型MTB呈现9种不同的基因型,均不成簇,为独特型。9例非北京基因型MTB均为谱系4,其中,亚谱系L4.4有4株,亚谱系L4.5有5株。耐药预测结果显示,9例非北京基因型中,6例为全敏感菌株（66.7%）,1例单耐异烟肼,耐药突变位点为ahpC_c.-48G>A,1例同时耐异烟肼与乙硫异烟胺, 耐药突变位点为fabG1_c.-15C>T,1例单耐氟喹诺酮,耐药突变位点为gyrA_p.Asp94Asn与gyrA_p.Ala90Val。全基因组测序预测耐药结果与比例法药敏结果完全一致。结论 复治结核病患者非北京基因型菌株主要为谱系4,呈明显的多态性。耐药突变位点均为常见突变位点。     

NRAMP1基因3′UTR多态现象与汉族结核病易感性的研究

目的 研究人类自然抵抗相关巨噬细胞蛋白(NRAMP1)基因3’UTRR多态现象与汉族结核病易感性的关系。方法 选取汉族活动性结核病患147例，正常对照145人，用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR—RFLP)的方法对NRAMP1基因3’UTR进行基因分型，根据基因型对样本分组，经统计学处理，研究3’UTR多态现象与结核病易感性的关系。结果 在活动性结核病患中3’UTR TGTG／TGTG基因型95例(64．6％)，TGTG／TTTG缺失基因型50例(34．0％)，TGTG缺失／TGTG缺失基因型2例(1．4％)；正常对照TGTG／TGTG基因型则为115例(79．3％)，TGTG／TGTG缺失基因型29例(20．0％)，TGTG缺失／TGTG缺失基因型1例(0．7％)。正常对照组TGTG／TGTG基因型明显高于结核病患(x^2＝7．79；P＜0．01)。研究发现TGTG的等位基因频率为0．85，TGTG缺失的等位基因频率为0．15。结论 NRAMP1基因3’UTR多态现象与结核病易感性相关，汉族3’UTR TGTG缺失等位基因频率明显高于白种人，可部分解释汉族比白种人更易患结核病。     

分枝杆菌的多相分类鉴定

分枝杆菌属除麻风分枝杆菌外,主要包括结核分枝杆菌复合群和非结核分枝杆菌.近年来,随着结核病(结核分枝杆菌复合群为其致病菌)的回潮,非结核分枝杆菌感染率由4%急速上升到10%,快速和准确地鉴定它们显得非常重要.在我国非结核分枝杆菌的表型鉴定一直沿用以生化实验为核心的传统鉴定方法,且欠缺数值分类的补充分析.全细胞脂肪酸气相色谱分析这种表型鉴定方法仅在有条件的省份开展.随着分子生物学的发展以及系统发育理论的提出,与之相应的基因分型方法也被用于分枝杆菌属的鉴定.本文详细阐述了系统发育的理论以及应用于非结核分枝杆菌的遗传学分类鉴定方法,即DNA-DNA杂交和16S rDNA基因序列分析.为进一步提高表型鉴定的准确性,又详细介绍了一些用于数值分类的应用软件.总之,多相分类鉴定已被广泛应用于非结核分枝杆菌的分类鉴定中.本文也介绍了一些结核分枝杆菌复合群基因分型鉴定方法及其在结核分子流行病学中的广泛应用.     

腰大池置管持续引流治疗脑脊液漏

大部分脑脊液漏经保守治疗均可治愈,超过4周仍不愈合者需考虑手术治疗,手术创伤大,复发率在6%～25%之间[1].我科自2005年10月～2007年10月采取腰大池置管持续引流治疗脑脊液漏取得了良好效果,报告如下:     

儿童急性阑尾炎与急性肠系膜淋巴结炎的鉴别诊断

198 8年 1 0月～ 1 999年 1 0月我们手术治疗儿童急性阑尾炎 (ＡＡ) 32 7例 ,其中 2 3例术后诊断为急性肠系膜淋巴结炎 (ＡＭＬ) ,现报道如下。1　临床资料男 1 4例 ,女 9例 ,年龄 2～ 1 3岁 ,其中 5～ 1 0岁 2 0例。均以右下腹痛、发热为主诉 ,5例呈转移性右下腹痛 ,6例体温在 38 5℃以上 ,右下腹均有压痛 ,反跳痛不典型 ,无明显肌紧张 ,2 1例腹痛前有上感史 ,6例ＷＢＣ >1 2× 1 0 9 Ｌ ,余无明显升高。麦氏切口进腹 ,大网膜未下移 ,1 0例阑尾轻度充血 ,1 3例无明显异常 ,肠系膜淋巴结均肿大 ,呈串珠状 ,质较硬 ,活动好 ,探查回肠末段 1 0…     

免疫学和结核菌持留现象

结核分支杆菌的耐药性和持留现象是关系结核病临床疗效和结核病流行控制的两大课题.结核杆菌能存在人体内数十年并不复制繁殖,但在一定条件下可以启动结核菌的复制,通常情况下,持留结核菌对化疗药物处于耐受状态,这对结核病在全球范围内的控制和消除是一个重要的障碍.宿主的免疫系统对结核菌持留现象的形成也起着重要的关键作用.     

结合非胶原性黏合蛋白的病原菌黏附素的研究进展

病原菌感染宿主细胞一般都依赖细菌表面的特定分子(黏附素)与胞外基质的相互作用来实现最初的吸附过程,其中细菌结合非胶原性黏附蛋白的黏附素分子主要包括两类:与纤连蛋白结合的细菌纤连蛋白结合蛋白以及与层黏连蛋门结合的层黏连蛋白结合蛋白.此文重点介绍了这两类黏附素的分子特点以及在感染过程中所起的作用.     

DNA测序、PCR-SSCP和phaB间接药敏实验检测结核分枝杆菌利福平耐药性的比较

地点:印度Chennai结核病研究中心。目的:利用表型和基因型方法快速鉴定耐多药结核分枝杆菌。设计:对两种基因型分析方法,即 DNA测序法和聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)法和一种表型分析方法,即噬菌体生物增殖法(phaB)进行了实验室内的标准化,并利用这三种方法测定101株RFPr和100株RFPs临床分离结核分枝杆菌 的利福平耐药性。结果和结论:将三种方法的检测结果与常规间接药敏实验进行比较。DNA测序法的灵敏度和特异度分别为97％和100％,PCR-SSCP法为76％和100％,而phaB实验为97％和84％。DNA测序法的灵敏度和特异度高于其它两种方法。