不同放射性强度铱-192照射对SGC7901细胞增殖的影响

不同放射性强度铱－１９２照射对ＳＧＣ７９０１细胞增殖的影响沈世人邹长木炎张秀春苏颖高频王衡汪相如实验用铱－１９２后装源体外照射人胃癌细胞株（ＳＧＣ７９０１），观察不同放射源强度照射对ＳＧＣ７９０１细胞集落生成数的影响。１９２Ｉｒ为我院１９９６年引进的...     

hTRT催化功能区基因克隆及其在肿瘤中的表达

目的 研究端粒酶蛋白ｈＴＲＴ基因在肿瘤中的表达及其意义。方法 用ＲＴ－ＰＣＲ法检查Ｈｅｌａ细胞与ＰＧ细胞的ｈＴＲＴ表达水平,将Ｈｅｌａ细胞的ｈＴＲＴ催化功能克隆,并进行测序比较,应用原位杂交技术对肿瘤组织中的ｈＴＲＴ和ｈＴＲ（端粒酶ＲＮＡ组分）基因进行检测。结果 Ｈｅｌａ细胞与ＰＧ细胞均有ｈＴＲＴ表达,Ｈｅｌａ细胞ｈＴＲＴ催化功能区ｃＤＮＡ序列与文献报道一致,原位杂交结果显示ｈＴＲＴ与ｈＴＲ的协同     

潘生丁,凡拉帕米对逆转K562／ADM耐药性的研究

本研究结果提示:潘生丁、凡拉帕米均有增强ADM和VCR对K562和K562/ADM的作用,在ADM为0.01μg/ml时,对K562的抑制率为35.9％,当同时含有潘生丁6.25μg/ml～50.0μg/ml或凡拉帕米1.8μg/ml～14.4μg/ml时,使细胞的抑制率可分别再提高20.8％～34.50％和7.7％～29.5％,而对K562/ADM,潘生丁和凡拉帕米分别使细胞抑制率提高21.6％～70.9％和40.3％～61.1％。在VCR为0.1μg/ml时,对K562的抑制率为58.4％,当含有潘生丁或凡拉帕米时,抑制率可分别提高19.1％～24.9％和18.7％～22.6％,而对K562/ADM,在VCR8.0μg/ml时,抑制率为18.8％,当含有潘生丁或凡拉帕米时,抑制率可分别提高32.5％～45.1％和23.8％～35.4％。从上述结果可看出,潘生丁或凡拉帕米在逆转K562/ADM的耐药性是有益的。     

TAT-ASPP2融合蛋白的制备及其对胶质瘤细胞增殖的抑制作用

目的:制备TAT-ASPP2融合蛋白,探讨其对人胶质瘤U-87MG细胞和U251细胞增殖的抑制作用。方法:设计TAT-ASPP2引物,应用IN-Fusion技术构建原核表达质粒pET-TAT-ASPP2,双酶切、DNA测序鉴定后转化大肠杆菌E.coliBL21,IPTG诱导TAT-ASPP2融合蛋白的表达,SDS-PAGE和Western blotting鉴定TAT-ASPP2融合蛋白。MTT法检测TAT-AS-PP2融合蛋白对U-87MG和U251细胞增殖的作用。结果:成功构建了原核表达质粒pET-TAT-ASPP2,转化E.coli BL21后成功表达TAT-ASPP2融合蛋白,其相对分子质量约为128000,并可被ASPP2特异性抗体所识别。TAT-ASPP2融合蛋白对U-87MG和U251细胞增殖的抑制率分别为(65.0±3.0)%和(64.7±2.5)%,而ASPP2蛋白则不能抑制U-87MG和U251细胞的增殖。结论:成功地克隆、表达及纯化TAT-ASPP2融合蛋白,该融合蛋白可抑制胶质瘤细胞的增殖。     

胃癌组织中piR-9994的表达及其与PIWIL4表达的相关性

目的探讨piR-9994在胃癌中的表达及其与临床病理特征的关系,并分析其与PIWIL4表达的相关性。方法采用qRT-PCR法检测76例胃癌及癌旁组织中piR-9994的表达,采用免疫组化En Vision法检测PIWIL4的表达,并复习相关文献。结果 piR-9994在胃癌组织中的表达比癌旁组织上调2. 3倍(P=0. 002 2)。Ⅲ+Ⅳ期胃癌组piR-9994的表达比Ⅰ+Ⅱ期胃癌组上调3. 5倍(P=0. 002),神经侵犯组比未侵犯组上升2. 5倍(P=0. 036)。PIWIL4在胃癌组织中的表达明显高于癌旁组织(χ2=18. 346,P 0. 001),其中Ⅲ+Ⅳ期胃癌组高于Ⅰ+Ⅱ期胃癌组(χ2=8. 60,P=0. 003)。胃癌组织中piR-9994的表达与PIWIL4表达呈正相关(r=0. 231,P 0. 05)。结论 piR-9994在胃癌组织中过表达并与肿瘤分期、神经侵犯密切相关,piR-9994可能通过调节PIWIL4表达促进胃癌的发生、发展,piR-9994有望成为判断胃癌恶性程度及预后的分子标志物。     

变性高效液相色谱法筛选XRCC4基因突变

目的应用变性高效液相色谱技术（DHPLC）-异源双链分析对鼻咽癌患者XRCC4基因突变进行筛查与鉴定,研究鼻咽癌患者XRCC4的基因突变情况,探讨DHPLC在筛查相关基因突变、预测放疗敏感性方面的应用。方法采用聚合酶链反应（PCR）和DHPLC筛查88例鼻咽癌患者XRCC4基因的突变。结果对DHPLC图形异常的PCR扩增片断进行DNA测序鉴定突变位点及性质,检测出28例XRCC4基因8号外显子第377位C变成T,导致126号密码子的ser→phe,导致氨基酸残基的替代变化（丝氨酸→苯丙氨酸）。结论用PCR—DHPLC筛查结合测序分析检测XRCC4突变是一种高效、经济、简便、可靠的方法。     

维甲酸逆转K526／ADM耐药细胞株耐药性的研究

维甲酸逆转Ｋ５２６／ＡＤＭ耐药细胞株耐药性的研究沈世人王衡邹长木炎苏颖高频关键词维甲酸Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞多药耐药逆转中图号Ｒ７３－３６肿瘤患者反复用药引起耐药性的产生是治疗失败的重要原因，研究如何克服耐药性是提高癌症化疗效果的关键之一。本实验结果提...     

氧化砷诱导人小细胞肺癌细胞凋亡的研究

目的 研究砷剂（As2O3)对人小细胞肺癌细胞凋亡诱导作用以及干扰素（IFNα－2b)对As2O3作用的影响。方法 采用DNA电泳、TUNEL原位末端标记和免疫细胞化学染色检测不同浓度As2O3作用不同时间对人小细胞肺癌细胞凋亡诱导作用及相关主相关基因蛋白的表达。结果 在一定的浓度范围内,As2O3可诱导人小细胞肺癌细胞凋亡,并且随浓度的升高和作用时间的延长,凋亡细胞数增加,相关基因蛋白Bcl-2、PCNA表达降低。联合使用IFNα-2b可增强凋亡诱导作用。结论 As2O3可诱导人小细胞肺癌细胞凋亡,且与药物浓度和作用时间有关。IFNα-2b可增强此作用。     

三氧化二砷及干扰素联用对K562及K562/ADM耐药细胞系的作用

目的 研究三氧化二砷(As2O3)对K562及其耐药细胞K562／ADM细胞株几种耐药机制的作用，以及干扰素(IFNα-2b)与之联用的效应。方法 采用免疫细胞化学染色及TUNEL原位末端标记检测不同浓度As2O3作用不同时间或与IFNα-2b联用，对K562及K562／ADM细胞相关耐药基因蛋白(P-gp、GST-x、Bcl-2)表达的影响及凋亡诱导作用。结果 K562、K562／ADM细胞表面P-gp蛋白表达无明显改变；As2O3(5，10，20μmol／mL)作用72h可降低K562、K562／ADM细胞GST-π的表达，与对照组比较P＜0．05；As2O3抑制K562、K562／ADM细胞Bcl-2蛋白的表达，诱导细胞凋亡，并有计量时间效应；IFNα-2b与As2O3联用可增强对K562细胞的作用，对K562／ADM细胞未见明显增强效应。结论 As2O3具有抑制K562、K562／ADM细胞GST-π、Bcl-2蛋白的表达及诱导细胞凋亡作用；对P-gp蛋白表达无明显影响；IFNα-2b可增强其对K562细胞的这种作用。