7例骨髓坏死的细胞形态学及临床分析

骨髓坏死 (ＢＭＮ)是指骨髓中的造血组织和基质大面积坏死 ,而灶性坏死和骨坏死所致者则不包括其中。现将我院所遇 7例报告如下。1　临床资料1.1一般资料　 7例骨髓坏死者均系我院住院病人。其中男 5例 ,女 2例 ,年龄 2 0～ 5 5岁 ,平均 37 5岁。1.2临床症状及体征　 7例患者中     

医学生学习积极主动性的民族特征研究

目的了解汉区少数民族与汉族医学生学习积极主动性的差异,为探索提高医学生学习积极主动性的干预措施提供依据。方法采用便利取样法,对中国医科大学一~四年级的248名医学生(少数民族99人,汉族149人)进行学习积极主动性问卷的调查,应用方差分析、Kruskal-Wallis H检验、t检验、聚类分析法对数据进行统计学分析。结果少数民族医学生和汉族医学生在学习积极主动性问卷的评分分别为(48.20±7.24)、(50.76±7.82),差异有统计学意义(P0.05);少数民族医学生在深入学习、控制学习、扎实学习维度得分以及学习积极主动性问卷总分显著低于汉族医学生(P均0.05)。不同年级的少数民族医学生的学习驱动力、学习目标的评分差异有统计学意义(P均0.05)。不同年级汉族医学生的学习驱动力以及学习积极主动性问卷的评分差异有统计学意义(P0.05)。医学生学习积极主动性可归为四类,其中1类学生在学习积极主动性最佳,2类和3类居中,4类最差,少数民族医学生1~4类的比例分别为9.09%、26.26%、36.36%、28.28%,汉族医学生1~4类的比例分别为18.12%、32.21%、28.19%、21.62%。结论少数民族和汉族医学生学习积极主动性的特点有共性但也存在个性的差异,医学教育工作者应结合汉族、少数民族医学生学习积极主动性的特点和规律,展开有针对性的教育,从根本上提高学生的学习积极主动性,促进学生的发展。     

NF-κB抑制与X射线诱导的人非霍奇金淋巴瘤细胞凋亡的研究

目的 探讨NF-κB p65对X射线诱导人非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin lymphoma, NHL)细胞凋亡的作用及其调控机制。方法 以NF-κB p65抑制剂quinazoline(QNZ)处理人NHL细胞。将NHL细胞株Namalwa、Ramos和 Raji细胞分为空白对照组、单纯照射组(IR)和X射线+QNZ实验组(IR+QNZ),采用Annexin-Ⅴ染色方法检测肿瘤细胞凋亡水平的变化,采用Western blot方法检测各细胞株中Survivin及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Cleaved Caspase-3的表达水平;应用实时定量PCR方法检测Survivin mRNA水平。结果 应用流式细胞仪检测凋亡细胞百分比,结果显示,QNZ处理后进行照射与单纯照射组相比凋亡细胞明显增加,且具有药物浓度依赖性(t=2.93~12.52, P<0.05),Western blot法检测结果显示,电离辐射可显著增加人NHL细胞中Survivin蛋白的表达。而应用1、10和50 nmol/L QNZ处理人NHL细胞24 h后进行照射,可显著下调电离辐射所诱导的NHL细胞中的Survivin蛋白表达。随药物浓度增加其作用更为明显(t=3.29~16.72,P<0.05)。同时凋亡相关蛋白Bcl-2表达减低,而Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达增加,Bcl-2/Bax比值明显降低,与单纯照射组相比,差异有统计学意义(t=6.20~9.91, P<0.05)。预处理QNZ后射线诱导的3种NHL 细胞Survivin mRNA均不同程度下降。结论 抑制NF-κB能够增加X射线诱导的NHL细胞凋亡,其机制可能与下调Survivin蛋白表达水平及对凋亡相关蛋白Bcl-2家族的调节有关。     

定量^99Tc^m—MIBI心肌断层显像评估左室重构

目的：应用^99Tc^m-甲氧基异丁基异腈（MIBI）心肌断层显像方法对左室重构进行定量评估。材料和方法：对18例正常人和57例冠心病（CHD）患进行^99Tc^m-MIBI心肌断层显像,分析两组间尖部和中央部纵径比（LR）和横径比（T）及二者之差（LR－TR）的差别。结果：病人LR和TR值明显高于正常组,其中陈旧性心梗和心绞痛患者的LR－TR值明显高于正常组,病人组LR和TR值与缺损计分,缺血面积佰分比以及异常节段数明显相关,与冠脉狭窄支数相关性较弱,与左冠状动脉前降支单支的狭窄程度无明显相关,结论：心肌^99Tc^m-MIBI断层显像通过LR和TR两种参数的选定,可对左室重构的发生进行定量的评估。     

PCNA在卵巢颗粒细胞瘤中的表达及意义

目的 :探讨增殖细胞核抗原 (PCNA)在卵巢颗粒细胞瘤 (GCT)中的表达及临床意义。方法 :S P法检测5 2例卵巢GCT中PCNA表达水平。每例切片 3张 ,厚度 4 μm ,分别进行HE染色及PCNA测定。结果 :PCNA在卵巢GCT中强阳性表达率晚期明显高于早期 (P <0 .0 1) ;弥漫型明显高于其他病理类型 (P <0 .0 1) ;核分裂数≥ 3/HPF明显高于 <3/HPF (P <0 .0 1) ;瘤体 >10cm明显高于≤ 10cm (P <0 .0 1) ;术后复发者明显高于无复发者 (P<0 .0 1) ;死亡者明显高于存活者 (P <0 .0 1)。结论 :PCNA的表达与卵巢GCT的生物学行为及预后有关。     

电离辐射诱导NF-κB-HIF-1α通路在人淋巴瘤细胞中的活化

目的 观察电离辐射对恶性淋巴瘤细胞中NF-κB-HIF-1α通路的活化状态的影响,探讨恶性淋巴瘤放射抗拒的可能机制.方法 采用Western blot免疫印迹分析方法,检测5 Gy X射线照射1、4、10和20 h后,Namalwa、Ramos和Raji 3种恶性淋巴瘤细胞系中NF-κB、HIF-1α及其相关蛋白IKK的表达水平,观察1、10和50 nmol/L NF-κB抑制剂QNZ对HIF-1α等蛋白表达的影响.结果 照射4 h后,3种淋巴瘤细胞中IKK蛋白表达增加(t=8.01、5.14和5.42,P＜0.01).10 h后,3种淋巴瘤细胞核p-P65蛋白表达增加(t=11.25、17.43和22.09,P＜0.01),至20 h时表达开始下降.10～20 h时,3种淋巴瘤细胞HIF-1α蛋白表达增加,与0 h相比,差异均有统计学意义(t=19.05、12.44和12.88,P＜0.01).与单纯照射组相比,采用NF-κB抑制剂预处理3种肿瘤细胞24 h后,HIF-1α蛋白表达下降,且随药物浓度的增加而下降(t=18.69、19.35和12.26,P＜0.01).结论 电离辐射能够活化恶性淋巴瘤细胞中的NF-κB-HIF-1α通路,可能是肿瘤放射抗拒的机制之一.

Abstract：

Objective To observe the effect of X-ray radiation on NF-κB-HIF-1α pathway activation in three malignant lymphoma and to explore the mechanism of radioresistance mediated by this pathway.Methods Expression levels of p-P65,IKK and HIF-1α in Namalwa,Ramos and Raji cells were determined by Western blot 1,4,10 and 20 h after 5 Gy X-ray irradiation.The effect of QNZ on HIF-1α expression was also observed.Results Expression level of IKK protein was up-regulated 4 h after irradiation in the 3 lymphoma cell strains( t = 8.01,5.14,5.42,P ＜ 0.01 ),followed by up-regulation of p-P65 protein expression level at 10 h and HIF-1α at 10-20 h after X-ray irradiation (t = 11.25,17.43,22.09,P ＜ 0.01 ).Pretreatment of QNZ 24 h before X-ray irradiation significantly reduced the upregulation of HIF-1α protein expression induced by simple ion radiation ( t = 18.69,19.35,12.26,P ＜0.01 ).Conclusion NF-κB - HIF-1α pathway was activated in human lymphoma cells after ion radiation and may be involved in the mechanism of radioresistance.     

NF-κB p65对人非霍奇金淋巴瘤细胞凋亡调控的研究

目的:研究NF-κB p65对人非霍奇金淋巴瘤(NHL)细胞凋亡的作用及其调控机制。方法:以NF-κB p65抑制剂quinazoline(QNZ)处理人NHL细胞,采用Annexin-Ⅴ染色方法检测肿瘤凋亡水平的变化,蛋白质印迹法检测各细胞系中Survivin蛋白及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Cleaved Caspase-3的表达水平;进一步应用实时定量PCR方法检测Survivin mRNA水平。结果:NF-κB p65抑制剂QNZ能够诱导NHL细胞的凋亡(P<0.05),具有时间-剂量依赖性。10nmol/L QNZ作用72h后Namalwa、Ramos和Raji细胞凋亡率分别为(13.5±2.7)%、(16.4±2.8)%和(15.8±2.5)%。抑制NF-κB p65的表达能够显著下调淋巴瘤细胞中Survivin蛋白的表达水平,10nmol/L QNZ作用72h后Namalwa、Ramos和Raji细胞中Survivin蛋白表达为0.58±0.06、0.54±0.03和0.51±0.09。同时,凋亡相关蛋白Bcl-2表达减低而Bax和Cleaved Caspase-3蛋白表达增加,Bcl-2与Bax蛋白比值明显降低,与对照组相比差异均有统计学意义,P<0.05。预处理QNZ后3种NHL细胞Survivin mRNA均不同程度下降,随浓度增加其作用更为明显,P<0.05。结论:抑制NF-κB p65能够诱导NHL细胞凋亡,其机制可能与下调Survivin蛋白表达水平及对凋亡相关蛋白Bcl-2家族的调节有关。     

NF-κBp65对人非霍奇金淋巴瘤细胞HIF-1α-VEGF途径调节及其机制的探讨

目的:研究NF-κB对人非霍奇金淋巴瘤(NHL)HIF-1α-VEGF途径的调控及其机制。方法:应用Echinomycin(EC)处理人NHL细胞,将HIF-1α反义质粒转染至肿瘤细胞中,采用蛋白质印迹法检测经两种方法处理后各细胞系中VEGF表达水平。以NF-κB特异性抑制剂quinazoline(QNZ)及Bay11-7082预处理人NHL细胞,检测各细胞系中HIF-1α蛋白的表达水平,同时采用实时定量PCR方法检测HIF-1αmRNA变化。应用QNZ处理NHL细胞后检测HIF-1α下游调控靶点VEGF的蛋白表达水平。结果:通过应用HIF-1α特异性抑制剂和转染反义质粒两种方法均能够抑制HIF-1α,明显下调了VEGF蛋白表达水平,与对照组相比差异均有统计学意义,P<0.05。NF-κB抑制剂QNZ及Bay11-7082能够降低NHL细胞HIF-1α蛋白及基因水平的表达,同时下调其下游调控靶点VEGF蛋白的表达,P<0.05。结论:抑制NF-κB可阻断人NHL细胞HIF-1α-VEGF通路,其机制可能与NF-κB调控HIF-1α的基因与蛋白表达有关。     

HIF-1α对电离辐射诱导入非霍奇金淋巴瘤细胞凋亡作用及其机制的探讨

目的：探讨HIF-1α对电离辐射诱导入非霍奇金淋巴瘤（NHL）细胞凋亡的作用及其调控机制。方法：以HIF-1α抑制剂Echinomycin（EC）预处理人NHL细胞后给予5Gy X线照射,采用Annexin V染色方法检测肿瘤细胞凋亡水平的变化,采用蛋白质印迹法检测各细胞系中凋亡相关蛋白Bax、Bel-2和Caspase-3的表达水平。将HIF-1asiR—NA反义转染至NHL细胞中,检测转染后细胞凋亡分数及Caspase-3蛋白表达水平。结果：流式细胞仪检测结果显示,Namalwa细胞空白对照组、单纯照射组（RI）、RI＋EC 2nmol／L组的凋亡率分别为5．27±1．13、13．81±3．12和39．96±6．81,Ramos细胞分别为6．02±1．26、12．98±3．07和40．76±11．58,Raji细胞则为7．16±0．46、17．62±4．94和47．85±10．22,P〈0．01。电离辐射后,转染vector和HIF-1α siRNA的Namalwa细胞凋亡率分别为15．32±3．64和20．20±1．87,Ramos细胞分别为15．05±2．46和21．02±3．12,t值分别为3．99和3．19,P〈0．05;而Raji细胞则为10．90±1．65和17．26±0．69,t=5．98,P〈0．01。蛋白质印迹法结果显示,通过EC预处理抑制HIF-1α的表达能够明显上调射线诱导的各NHL细胞系中Caspase-3蛋白表达水平,同时凋亡相关蛋白Bcb2表达减低而Bax蛋白表达增加,Bcl-2／Bax比值明显降低,与单纯照射组相比差异均有统计学意义,P〈0．05。结论：抑制HIF-1α能够增加射线诱导的NHL细胞凋亡,其机制可能与增加Bax蛋白表达而下调Bcl-2蛋白表达有关。