水栀子及京尼平苷抑制RBL-2H3细胞脱颗粒作用的代谢组学研究

目的 基于细胞代谢组学的方法研究水栀子Gardenia jasminoside及其主要有效成分京尼平苷对RBL-2H3细胞脱颗粒模型的干预作用。方法 利用UPLC-QTOF-MS高分辨质谱检测RBL-2H3细胞的代谢轮廓改变，并应用主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）筛选出引起这种差异的代谢标志物；同时应用MEV软件对差异标志物水平的变化进行聚类分析和热图绘制。结果 分别得到与水栀子和京尼平苷作用相关的代谢标志物54和46个，其中共有标志物31个，且在2个给药组中变化趋势相同。由共有代谢标志物富集得到了受干扰的5条代谢通路：甘氨酸、天冬氨酸、谷氨酸代谢，谷胱甘肽代谢，组胺代谢，能量代谢，烟酰胺代谢。结论 水栀子和京尼平苷通过调节组胺代谢、氧化应激和能量代谢而抑制RBL-2H3细胞脱颗粒过程，且京尼平苷是水栀子发挥作用的主要药效物质基础之一。     

栀子标准汤剂的质量评价方法考察

目的:建立栀子标准汤剂的质量评价方法,为所有源于栀子水提液的制剂的质量标准制定提供参考。方法:制备15批栀子标准汤剂,测定其出膏率、指标成分转移率和pH;建立栀子标准汤剂的UPLC指纹图谱并对主要色谱峰进行质谱鉴定,离子化模式为正、负离子,离子源温度150℃,脱溶剂气体为高纯度氮气,温度550℃,流速800 L·h~(-1),毛细管电压1.0 kV,锥孔电压30 V,扫描范围m/z 50~1 200。结果:栀子标准汤剂的平均出膏率28.4%,栀子苷转移率77.7%,p H均为4。所有样品的指纹图谱相似度均0.99,栀子标准汤剂的主要成分为栀子苷。结论:建立的栀子标准汤剂的质量评价方法稳定可行、重复性好,该评价方法灵敏、准确,为所有源于栀子水煎剂的制剂的质量控制提供参考。     

基于主成分分析和聚类分析的栀子种质资源评价

目的:通过探讨栀子种质资源之间的理化品质差异,为新品种选育及定向育种提供理论支持。方法:对24个种质来源的栀子种苗的主要农艺性状进行测定,采用UPLC对栀子药材中栀子苷和西红花苷-Ⅰ,西红花苷-Ⅱ的含量进行测定,并采用描述性统计、主成分和聚类分析方法对栀子种质来源和品质关系进行了分析。结果:24个来源的栀子的根系长度、叶形指数、叶片数和地径4项指标未表现出差异。江西1,2,4,浙江1,3,4等6个药材质量不合格,栀子苷质量分数未达到2015年版《中国药典》的规定(1.8%)。对存在差异的11项品质指标进行了主成分分析,根据主成分解释总变量和碎石图提取了4个主成分反映原来变量85.14%的信息。第1主成分主要综合了叶长、叶宽指标的信息,即种苗叶形因子;第2主成分主要综合了栀子苷,西红花苷-Ⅰ,西红花苷-Ⅱ和西红花苷类指标的信息,即药材内在品质因子;第3主成分主要综合了种苗鲜重和干重的信息,即种苗质量因子;第4主成分主要综合了苗高、苗高与根长比、叶片张开程度的含量信息,即种苗苗型因子。结合主成分分析综合评分表直观地反映出栀子品质的优良顺序;聚类分析将24个种质的栀子分为3类,聚类分析与综合评分排序表对种质资源类别的判定结果较为一致。结论:本研究表明四川1,3,4以及江西7等栀子品质较好,可作为新品种选育及定向育种的优良材料。     

基于UPLC-Q-TOF-MS分析通络清脑注射剂在大鼠体内的代谢产物

目的:研究大鼠尾静脉注射通络清脑注射剂后尿液中的代谢产物,为该制剂的作用机制分析提供参考。方法:大鼠尾静脉注射通络清脑注射剂,收集0~12 h尿液,采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)分析尿液样品,流动相0.1%甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱,流速0.3 m L·min~(-1),电喷雾离子源,正离子模式,扫描范围m/z 100~1 400。结果:检测并鉴定到7个原型成分(黄芩苷,栀子苷,三七皂苷R1,人参皂苷Rg1,Rb1,Rd和Re)及10个可能的代谢产物(其中4个来源于黄芩苷,6个来源于栀子苷)。10个可能的代谢产物分别为葡萄糖基化代谢物(B-M1,G-M2和G-M4),葡萄糖醛酸化代谢物(B-M2),甲基化代谢物(B-M3),水解代谢物(B-M4),去甲基化代谢物(G-M1),脱氢代谢物(G-M3)和羟基化代谢物(G-M5和G-M6),而人参皂苷类成分则暂时未能在尿液中检测到代谢产物。结论:尾静脉注射通络清脑注射剂后,大鼠尿液中能检测到黄芩苷和栀子苷的原型及不同途径的10个代谢产物,而三七总皂苷各成分则只检测到药物原型,暂时未能检测到代谢产物。     

HPLC同时测定玉叶金花清热片中3种有效成分的含量

目的建立同时测定玉叶金花清热片中栀子苷、穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯含量的HPLC。方法采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速为1.0 m L·min?1,检测波长:238 nm(0~10 min,栀子苷),225 nm(10~22 min,穿心莲内酯),254 nm(22~35 min)。结果栀子苷在0.166~2.981μg内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为99.4%(RSD=1.2%);穿心莲内酯在0.146~2.621μg内线性关系良好(r=0.999 9,平均回收率为99.2%(RSD=1.3%);脱水穿心莲内酯在0.222~3.992μg内性关系良好(r=0.999 7),平均回收率为100.1%(RSD=1.4%)。结论该方法简便、快捷、准确,可用于该制剂的质量控制。     

清肺抑火口腔喷雾剂中栀子苷、黄芩苷含量测定

目的：建立清肺抑火口腔喷雾剂中栀子苷和黄芩苷含量的测定方法。方法：采用HPLC法,以依利特C18柱（4.6mm×200mm,5μm）分离,以乙腈-水（11∶89）和甲醇-水-磷酸（45∶55∶0.2）为流动相,238nm和280nm为检测波长,流速1.0mL.min-1,柱温30℃。结果：栀子苷和黄芩苷分别在1.19~3.95μg（r=0.9998）和1.61~5.63μg（r=0.9998）范围内呈良好的线性关系,平均回收率分别为100.62%（RSD=1.70%）和100.32%（RSD=1.58%）。结论：该方法简便、快速、灵敏度高,可作为清肺抑火口腔喷雾剂中栀子苷和黄芩苷含量的测定方法。     

多波长高效液相色谱法同时测定消肿止痛酊中3种有效成分的含量

目的:利用多波长高效液相色谱法,建立消肿止痛酊中3种有效成分(栀子苷、丹皮酚、樟脑)的含量测定方法,考察该产品在有效期内不同生产日期的内在质量。方法:采用Waters SunFire C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,柱温30℃;甲醇(A)-水(B)为流动相,以1 mL.min-1流速梯度洗脱;检测波长:238 nm(0～14 min,检测栀子苷)、274 nm(15～32 min,检测丹皮酚)、288 nm(33～60 min,检测樟脑)。结果:在60 min内消肿止痛酊中栀子苷、丹皮酚、樟脑3种有效成分被完全分离,峰面积与其浓度呈良好的线性关系(r=0.9999);加样回收率(n=6):栀子苷为100.9%(RSD=0.6%),丹皮酚为100.2%(RSD=1.4%),樟脑为100.6%(RSD=1.0%)。结论:本方法操作简单,结果准确,为有效控制消肿止痛酊质量,提升质量标准,提供了一种可靠的检测方法。     

小儿早熟抗胶囊质量标准研究

目的建立小儿早熟抗胶囊的质量标准。方法采用薄层色谱法对制剂中黄柏、栀子、当归、牡丹皮进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定栀子中栀子苷的含量。结果薄层色谱斑点清晰,阴性对照无干扰;栀子苷在3.625~580.0μg.mL-1（r=1.0000;n=7）范围内线性关系良好;平均回收率为97.97%（RSD=1.3）。结论该方法简便、准确,重复性好,可用于控制小儿早熟抗胶囊的质量。     

高效液相色谱法测定鼻窦炎口服液中栀子苷含量

目的建立鼻窦炎口服液中栀子苷的含量测定方法。方法采用高效液相色谱(HPLC)法。以岛津Shimpack VP-ODS C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,以乙腈-0.2%磷酸(12∶88)为流动相,柱温25℃,流速1.0 mL/min,检测波长为238 nm。结果栀子苷进样量在0.235～1.767μg范围内与峰面积有良好的线性关系,r=0.999 9(n=6);平均加样回收率为99.11%,RSD=0.67%(n=6)。结论该方法灵敏、简便、结果准确、重现性好,可用于鼻窦炎口服液的质量控制。     

高效液相色谱法测定小儿早熟抗胶囊中栀子苷含量

目的建立测定小儿早熟抗胶囊中栀子苷含量的高效液相色谱(HPLC)法。方法采用Eclipse-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(12∶88)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为238 nm。结果栀子苷质量浓度在3.625～580.0μg/mL(r=1.000 0,n=7)范围内与峰面积线性关系良好;平均回收率为97.91%,RSD=1.33%(n=9)。结论所建立的HPLC法操作简便、准确,重复性好,可用于小儿早熟抗胶囊的质量控制。