胶原酶浓度对大鼠胰岛分离纯化产量的影响

目的观察胶原酶浓度对大鼠胰岛分离纯化产量的影响,筛选出获取高产量胰岛的最佳消化液的胶原酶浓度。方法 75只雄性SD大鼠按胶原酶浓度分为5组：Ⅰ组（0.5 mg/ml）、Ⅱ组（0.75 mg/ml）、Ⅲ组（1.0 mg/ml）Ⅳ组（1.2 mg/ml）和Ⅴ组（1.5 mg/ml）,每组15只。通过胆灌注胶原酶V来消化大鼠胰腺,分离胰岛,采用不连续密度梯度Ficoll离心法纯化胰岛,根据胰岛直径计数所获胰岛的数量及胰岛当量,并利用葡萄糖刺激胰岛素释放试验评估胰岛功能。结果分离的大鼠胰岛具有较好的质量,胰岛纯度为95%左右,活性率为90%左右,体外培养生长良好。随着胶原酶的浓度增加,胰岛数量和胰岛当量明显增加（P〈0.05）,并且最大直径的胰岛数量也在增加（P〈0.05）,在胶原酶浓度1.0 mg/ml时获得的胰岛产量最高,其次为1.2 mg/ml,在其他浓度时,胰岛产量都较低（P〈0.05）。在低糖和高糖刺激下胰岛素的释放分别为（1.346±0.128）ng/ml和（2.565±0.208）ng/ml,差异具有显著性意义（P〈0.05）,刺激指数为（1.908±0.152）,提示胰岛细胞功能良好,电镜照片显示胰岛生长状况良好。结论进行大鼠胰岛分离纯化时最适宜的胶原酶浓度为1.0~1.2 mg/ml,可获得稳定高产量的胰岛,过低和过高的浓度都是不适宜的。     

经皮水冷式微波固化术在肝脏恶性肿瘤治疗中的应用

目的微波固化范围能否覆盖整个目标肿瘤是其能否取得根治性疗效的关键,本研究探讨经皮水冷式微波固化对于提高其固化范围的作用及其在肝肿瘤治疗中的作用。方法从2009年7月至2010年12月,58例肝肿瘤患者（49例原发性肝癌,9例转移性肝癌,肿瘤最大直径≤5cm且肿瘤数目≤3）接受经皮水冷式微波固化术,探讨其固化范围及其疗效。结果58例患者共96个肿瘤[肿瘤直径介于1．2～4．8cm,平均直径为（3．8±1．1）cm）]接受微波水冷式微波固化术,水冷式微波固化范围为（5．2±1．4）cm（固化范围介于3．6～6．3cm）,共89个肿瘤取得完全消融,完全消融率为92．7％。全组患者无严重并发症发生．2例患者术后出现右侧胸腔少量积液。结论水冷式微渡固化术能产生较大固化范围,对于直径≤5cm肝肿瘤基本能达到完全固化的目的．是安全的微创治疗手段。     

改良三孔法腹腔镜阑尾切除术与传统阑尾切除术的比较

目的:比较改良三孔法腹腔镜阑尾切除术(LA)和开腹阑尾切除术(OA)的优缺点.方法:回顾性分析我院普通外科2011年1月至2011年8月收治的手术治疗急性阑尾炎66例的临床资料,其中36人行LA,30人行OA.结果:LA组及OA组的手术时间分别为(25.7±3.8)min及(45.3±6.4)min,住院时间分别为(3.1±1.5)d及(7.5±3.4)d.住院费用分别为(10350.9±1060.4)元及(6534.8±745.6)元,各指标比较均有统计学差异(P<0.05).结论:改良三孔法腹腔镜阑尾切除术较开腹阑尾切除术在治疗费用上虽不具优势,但在阑尾炎诊治的全面性、手术时间、术后恢复、伤口感染率及伤口美观性等方面具有明显优势,值得推广.     

彩色多普勒超声对门静脉广泛血栓肝移植患者围手术期监测的临床意义:附四例分析

目的探讨术前存在广泛门静脉血栓肝移植患者采用彩色多普勒超声(CDI)进行围手术期监测的临床作用。方法对4例术前存在广泛门静脉血栓肝移植患者于术前、术后进行CDI检查。术后首次CDI检查在移植术后24h内进行,术后第1周和第2周隔天1次,以后每周1～2次;主要监测指标包括门静脉主干最大内径、平均血流速(TAMX)、最大流速(Vmax)、血流频谱、侧支循环。结果 4例病例术前CDI检查发现门静脉主干血流缓慢、整段狭窄、完全堵塞、无血流及门静脉内膜严重病变等情况;并探测到多支侧支循环血流丰富、肠系膜上静脉扩张和无法找到满意的门静脉重建部位。这些情况在手术中证实,并指导了肝移植特殊类型手术中供肝门静脉灌注重建。术后2周隔天进行1次的CDI检查显示4例患者门静脉内径、血流方向及流速都呈现正常,取得较好重建效果和良好的肝功能恢复。结论 CDI对监测肝移植术后门静脉并发症具有较好效果,对术前门静脉系统广泛血栓患者,CDI对指导术者在术前思考手术可能遇到问题、设计和准备应变手术方式具有一定价值。     

人肝癌浸润淋巴细胞的分离培养及其CD8阳性亚群特性研究

目的从原发性肝癌（HCC）患者术后的肿瘤组织中提取、培养肿瘤浸润性淋巴细胞（TILs），进一步分选、扩增其CD8阳性亚群（CD8+TILs），并研究其特性。 方法标本取自38例肝癌根治术后的肿瘤组织，免疫组织化学染色观察癌巢组织和癌旁组织TILs的分布，通过机械剪碎、混合酶消化和不连续密度梯度离心法分离提取TIL前体细胞。采用重组人白介素2进行激活，抗CD3、抗CD28抗体进行共刺激扩增，用磁珠分选出CD8+TILs，CCK8法观察CD8+TILs对肝癌细胞Hep3B、HepG2生长的影响。 结果TILs富集于癌旁组织，12例成功提取TILs，6例培养并实现大量扩增，扩增17~50倍后细胞数为（1.2~2.5）×10⁸个，CD3+细胞比例为（77.53±16.37）%，CD3+CD4+比例为（27.08±21.56）%，CD3+CD8+比例（44.55±12.73）%，细胞活力为（90.5±3.0）%，CD8+TILs对肿瘤细胞系Hep3B、HepG2有较强的生长抑制作用。 结论本研究成功建立高效提取、培养CD8+TILs的方法，获得具有高抗肿瘤活性的CD8+TILs，为晚期肝癌等实体瘤的过继免疫治疗提供研究基础。     

腹腔镜与开腹肝切除术治疗肝癌的疗效对比

目的 探讨腹腔镜肝切除术(laparoscopic hepatectomy,LH)与开腹肝切除术(open hepatectomy,OH)治疗肝癌的临床疗效.方法 广州医学院第二附属医院2008年1月至2010年12月期间收治原发性肝细胞癌患者45例,将其分为2组,LH组21例,OH组24例.比较2组患者术中、术后的情况与生存率,评价其疗效.结果 本组患者术中失血量和输血量LH组显著高于OH组(分别x2=3.973,x2=4.862,均P＜0.05),近期并发症发生率LH组(2例)显著低于OH组(9例)(x2=4.746,P＜0.05);总住院天数LH组为(17.3±5.0)d,OH组为(21.5±5.1)d,2组比较差异有统计学意义(t=-2.717,P＜0.05).2组患者随访的总生存率比较差异无统计学意义(x2=0.172,P ＞0.05).LH组的无瘤生存率为52.4％,显著高于OH组(25.1％,x2=4.543,P＜0.05).结论 腹腔镜与开腹肝切除均为肝癌治疗的有效方法,腹腔镜术式近期并发症少,住院时间短,但两组总体生存率无差异.     

急性心肌梗死大鼠心脏一氧化氮合酶表达的改变

目的 通过建立大鼠心肌梗死模型，观察急性心肌梗死对大鼠心脏内皮型一氧化氮合酶mRNA和诱导型一氧化氮合酶蛋白表达的影响。方法48只健康成年SD大鼠（体重200～250g）随机分为假手术组和缺血组，取1、2、8和24h四个不同时间点观察。采用开胸结扎冠状动脉左前降支建立心肌缺血模型，逆转录聚合酶链反应检测大鼠心肌梗死后1、2及24h三个时段缺血心肌内皮型一氧化氮合酶mRNA的表达；免疫组织化学染色检测冠状动脉结扎后8h缺血心肌诱导型一氧化氮合酶蛋白的表达。结果冠状动脉结扎后2h，缺血组大鼠缺血心肌组织内皮型一氧化氮合酶mRNA表达下降（P〈0．05），并持续至结扎后24h；结扎后24h组内皮型一氧化氮mRNA的表达与结扎后2h组相比无显著性差异（P〉0．05）。冠状动脉结扎后8h，梗死区存活心肌组织细胞诱导型一氧化氮合酶蛋白大量表达，而假手术组未见诱导型一氧化氮合酶蛋白表达。结论正常大鼠心肌组织有内皮型一氧化氮合酶基因表达，无诱导型一氧化氮合酶蛋白表达。在心肌梗死早期缺血心肌内皮型一氧化氮合酶mRNA表达减少。心肌急性缺血刺激早期诱导大鼠缺血心肌组织诱导型一氧化氮合酶蛋白大量表达。     

门脉高压症合并脾功能亢进施行脾切除术的临床疗效分析

目的：分析门脉高压症合并脾功能亢进（简称门脉高压性脾亢）患者行脾切除术的近远期疗效和切脾对机体的影响。方法收集2004年1月至2014年1月收治的351例门脉高压性脾亢患者,回顾性分析病例资料以及行脾切除术后近期疗效评价,并进行远期随访调查,重点了解术后感染、肝癌、肝功能、血细胞变化以及系统疾病的控制情况等。结果患者行脾切除术后,近期内受损的肝功能和血细胞得以恢复。近期内出现黄疸者42例,腹水31例,发热34例,上消化道再出血者13例,予以积极对症处理后均康复出院。远期随访87例发现,29例在切脾约2~33（中位11.4）个月后出现肝功能下降,血清白蛋白水平下降和转氨酶水平升高;原伴发的糖尿病、高血压病和消化系统疾病切脾后较切脾前病情容易控制;继发肝癌者6例,4例死亡,未见有脾切除后凶险性感染。结论门脉高压症合并脾功能亢进患者进行脾切除术对机体有利有弊,故对于此类脾大患者不能一律予以切除。     

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目的　探讨门静脉区域化疗对原发性肝癌完全切除术后的复发和转移的预防效果。方法　 1997年10月至 2 0 0 0年 10月间 ,广州医学院附属第二医院对 4 2例原发肝癌手术切除后分别行肝动脉 (18例 )或门静脉(2 4例 )区域预防性化疗。结果　两组间的术后 1、3、5年总生存率差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ,门静脉化疗组的1、3年无瘤生存率显著高于肝动脉化疗组 (P <0 0 5 )。结论　术后门静脉区域预防性化疗可预防和延缓肝癌切除术后的复发和转移。