猪丘脑、小脑和延髓内Leptin长形受体mRNA的分布定位

目的 :研究猪丘脑、小脑和延髓内leptin长形受体 (longformleptinreceptor,Ob Rb)mRNA的分布定位 ,比较长白猪和眉山猪上述脑区内Ob RbmRNA分布的差异。方法 :原位杂交法。结果 :在丘脑内 ,Ob RbmRNA标记神经元几乎见于所有核团 ,在中线核、丘脑室旁核和丘脑前核内出现大量的Ob RbmRNA标记神经元 ,其余核团内Ob RbmRNA标记神经元分布较少。在小脑皮质三层中均有Ob RbmRNA标记神经元 ,以梨状神经元层和颗粒层分布较密集。在延髓下橄榄核、孤束核、迷走神经背核和舌下神经核有Ob RbmRNA标记神经元出现。结论 :猪丘脑、小脑和延髓内均有Ob RbmRNA分布 ,其分布定位在长白猪与眉山猪未见明显的差异。     

应激性血压升高对大鼠下丘脑肾上腺髓质素水平的影响

目的 探讨应激性血压升高对下丘脑肾上腺髓质素编码基因表达及水平的影响.方法 58只雄性SD大鼠随机分为对照组(n=23)和应激组(n=35),应激组给予噪声或噪声加足底电击随机组合输出刺激制备应激性高血压动物模型.48只动物在实验第1、5、10、15天以及实验结束后5、10天测量尾动脉压后处死(每个时间点对照组和应激组分别为n=3和n=5).分离下丘脑并制备组织匀浆后分别采用逆转录聚合酶链反应检测肾上腺髓质素编码基因表达变化,放射免疫法检测肾上腺髓质素水平变化.另外10只在实验第10天后断头取下丘脑制备冰冻切片,采用免疫组织化学法检测肾上腺髓质素免疫阳性细胞分布变化.结果 应激5天后动物血压开始明显升高,15天达到高峰(156.3±3.3 mmHg比114.0±2.6 mmHg,P<0.01),应激结束10天血压仍维持在较高水平.与对照组相比较,肾上腺髓质素编码基因mRNA表达在应激10天内逐渐上调(第5天0.99±0.05比0.92±0.04,P<0.05;第10天1.26±0.04比0.92±0.04,P<0.01),而后表达下调,在应激第15天仍高于对照组(1.00±0.04比0.92±0.04,P<0.05).应激结束后5天表达仍高于对照组,但差异无统计学意义;与同时间点对照组相比较,肾上腺髓质素水平在应激10天内逐渐增加(第1天1.25±0.22比0.93±0.19,P<0.05;第5天1.69±0.29比0.97±0.21,P<0.01;第10天2.00±0.28比0.94±0.24,P<0.01).应激组(n=5)大鼠下丘脑室旁核区域肾上腺髓质素阳性细胞的光密度明显高于对照组(n=5),由正常的110.21±3.10增加到127.56±3.50(P<0.01),而其他区域无明显变化.结论 应激性血压升高过程中,下丘脑肾上腺髓质素编码基因mRNA表达和肾上腺髓质素水平均发生相应变化,尤其以室旁核明显,提示下丘脑室旁核肾上腺髓质素可能通过维持血压平衡及内环境稳态参与应激致高血压发生的病理生理过程.     

Nitric oxide inhibits excitatory vagal afferent input to nucleus tractus solitarius neurons in anaesthetized rats

Objective

Endogenous nitric oxide (NO) has been implicated in the regulation of neuronal activity which mediates cardiovascular reflexes. However, there is controversy concerning the role of NO in the nucleus tractus solitarius (NTS). The present study aims to elucidate the possible physiological role of endogenous NO in modulating the excitatory vagal afferent input to NTS neurons.

Methods

All the experiments in the rat were conducted under anaesthetic conditions. Ionophoresis method was used for the application of NO donor or nitric oxide synthase (NOS) inhibitor, and single unit recording method was employed to detect the effects of these applications on vagal afferent- or cardio-pulmonary C-fibre reflex-evoked neuronal excitation in NTS.

Results

Ionophoresis applications of L-arginine (L-Arg), a substrate of NOS, and sodium nitroprusside (SNP), a NO donor, both attenuated the vagal afferent-evoked discharge by (51.5±7.6)% (n = 17) and (68.3±7.1)% (n = 9), respectively. In contrast, application of D-Arg at the same current exerted no overall effect on this input. Also, both L-Arg and SNP inhibited spontaneous firing of most of the recorded neurons. In contrast, ionophoresis application of NG-nitro-Larginine methyl ester (L-NAME) enhanced vagal afferent-evoked excitation by (66.3±11.4)% (n = 7). In addition, ionophoresis application of L-Arg and SNP significantly attenuated cardio-pulmonary C-fibre reflex-induced excitation in the tested NTS neurons.

Conclusion

Activation of local NO pathway in the NTS could suppress vagal afferent-evoked excitation, suggesting that NO is an important neuromodulator of visceral sensory input in the NTS.     

Leptin长型受体与生长抑素共存于猪前脑内

目的：研究三元杂交猪和梅山猪仔猪前脑内Leptin长型受体(Ob-Rb)mRNA与生长抑素(SS)免疫反应阳性物质的共存关系。方法：用原位杂交与免疫组织化学相结合的方法。结果：Leptin长型受体mRNA和生长抑素免疫反应阳性神经元分布于下丘脑室周核、背内侧核、腹内侧核、室旁核、海马杏仁核及大脑皮质。上述结构内一些表达Leptin长型受体mRNA的神经元也含有生长抑素免疫反应阳性物质。结论：两种猪前脑内Ob-Rb mRNA与SS免疫反应阳性物质的共存情况无明显差异。Leptin可直接作用于下丘脑的生长抑素免疫反应阳性神经元调节动物的能量代谢生长和繁殖等活动。     

慢性应激刺激致高血压大鼠下丘脑肾上腺髓质素特异性受体组件基因表达变化

目的探讨慢性应激致高血压过程中肾上腺髓质素特异性受体组件降钙素受体样受体、受体活性修饰蛋白2和受体活性修饰蛋白3在下丘脑的动态变化。方法将48只大鼠分为对照组(18只)和应激组(30只),应激组给予噪声加足底电击刺激,分别在刺激开始后的第1、5、10和第15d以及停止刺激后的第5和第10d处死动物,分离下丘脑,抽提总RNA,用逆转录聚合酶链式反应检测降钙素受体样受体、受体活性修饰蛋白2和受体活性修饰蛋白3的基因表达变化。结果与对照组相比较,应激组动物降钙素受体样受体基因表达10d内逐渐上调(1.236±0.040比0.941±0.041,P<0.01),而后表达下调,在应激第15d明显低于于对照组(0.860±0.041比0.938±0.042,P<0.05)。受体活性修饰蛋白2mRNA表达在应激第1和第5d显著升高(0.975±0.023比0.880±0.035和1.160±0.045比0.897±0.036,P<0.05或P<0.01),在第5d达到高峰,而后开始下调,在应激第15d和应激结束后5d低于对照组(0.670±0.021比0.897±0.041,0.719±0.039比0.910±0.032,P<0.01)。受体活性修饰蛋白3mRNA表达在应激第1d显著升高(1.197±0.053比0.870±0.039,P<0.01),而后开始逐渐下调,在应激第10、15d后开始明显低于对照组的表达水平(P<0.05或P<0.01)。应激结束后10d受体活性修饰蛋白3mRNA表达水平仍低于对照组,但无统计学差异。结论慢性应激所致血压升高变化过程中伴随下丘脑中肾上腺髓质素特异性受体组件mRNA表达的不同时段特异性改变,提示其可能参与应激致高血压过程。     

慢性应刺激致高血压大鼠下丘脑肾上腺髓质素特异性受体组件基因表达变化

目的 探讨慢性应激致高血压过程中肾上腺髓质素特异性受体组件降钙素受体样受体、受体活性修饰蛋白2和受体活性修饰蛋白3在下丘脑的动态变化.方法 将48只大鼠分为对照组(18只)和应激组(30只),应激组给予噪声加足底电击刺激,分别在刺激开始后的第1、5、10和第15 d以及停止刺激后的第5和第10 d处死动物,分离下丘脑,抽提总RNA,用逆转录聚合酶链式反应检测降钙素受体样受体、受体活性修饰蛋白2和受体活性修饰蛋白3的基因表达变化.结果 与对照组相比较,应激组动物降钙素受体样受体基因表达10 d内逐渐上调(1.236±0.040 比 0.941±0.041,P<0.01),而后表达下调,在应激第15 d明显低于于对照组(0.860±0.041比0.938±0.042,P<0.05).受体活性修饰蛋白2 mRNA表达在应激第1和第5 d显著升高(0.975±0.023比0.880±0.035和1.160±0.045比0.897±0.036,P<0.05或P<0.01),在第5 d达到高峰,而后开始下调,在应激第15 d和应激结束后5 d低于对照组(0.670±0.021比0.897±0.041,0.719±0.039比0.910±0.032,P<0.01).受体活性修饰蛋白3 mRNA表达在应激第1 d显著升高(1.197±0.053比0.870±0.039,P<0.01),而后开始逐渐下调,在应激第10、15 d后开始明显低于对照组的表达水平(P<0.05或P<0.01).应激结束后10 d受体活性修饰蛋白3 mRNA表达水平仍低于对照组,但无统计学差异.结论慢性应激所致血压升高变化过程中伴随下丘脑中肾上腺髓质素特异性受体组件mRNA表达的不同时段特异性改变,提示其可能参与应激致高血压过程.     

小脑顶核刺激对急性心肌梗死大鼠心脏神经功能的影响

目的:观察小脑顶核刺激(FNS)对急性心肌梗死(AMI)大鼠自主神经功能的影响。方法:成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠100只,分为:①AMI组(30只),单纯结扎大鼠左冠状动脉(LCA);②FNS组(30只):结扎大鼠LCA,1h后电刺激左侧小脑顶核1h;③FNL组(30只),鹅膏氨酸毁损两侧小脑顶核,5d后再按②方法操作;④Sham组(10只),即假手术组,开胸手术后仅在LCA下穿线但不结扎,电极插入小脑顶核,不予刺激。各组在开胸术后6h、24h、7d、21d4个时间点,进行心率变异性(HRV)的频域分析。21d记录心脏血流动力学参数并计算心肌梗死面积。结果:结扎6h后FNS组频域分析指标-低频(LowFrequency,LF)低于AMI和FNL组(P<0.01),同时FNS组高频(HighFrequency,HF)明显高于其他干预组(P<0.01)。结扎1d后,FNS组仍然呈现HF成分的增加和LF成分的下降(P<0.05)。7d后只有假手术组保留了较高的HF和较低的LF,各干预组之间的差别消失。21d后各组之间HRV参数无差别。FNL组与AMI组比较,各时间点HRV参数差异无统计学意义(P>0.05)。结扎后21d比较各组血流动力学指标,心肌梗死面积也无差别(P>0.05)。结论:FNS可改善AMI后大鼠心脏神经功能。     

小脑顶核刺激对急性心肌梗死大鼠心率变异性的影响

目的观察电刺激小脑顶核(FNS)对急性心肌梗死(AMI)大鼠心率变异性(HRV)的影响。方法成年雄性SD大鼠100只随机分为:AMI组(n=30),单纯结扎左冠状动脉(LCA);小脑顶核刺激(FNS)组(n=30),结扎LCA,1h后电刺激左侧小脑顶核1h;小脑顶核损毁(FNL)组(n=30),先用鹅膏氨酸毁损两侧小脑顶核,5d后再按FNS组方法操作;假手术组(n=10),开胸手术后仅在LCA下穿线但不结扎,电极插入小脑顶核,但不予刺激。各组又分开胸术后6h、1d、7d、21d4个时间点,分别采用大鼠HRV记录分析系统进行HRV频域分析。结果结扎6h,FNS组频域分析指标—低频成分明显低于AMI和FNL组(P<0.01),高频成分明显高于其他干预组(P<0.01);结扎1d后,FNS组仍然呈现高频成分的增加和低频成分的下降(P<0.05);7d后,只有假手术组保留了较高的高频功率,各干预组之间的差别消失;21d后,各组HRV参数之间无差别。FNL组与AMI组比较,各时间段HRV参数比较无显著性差异(P>0.05)。结论电刺激小脑顶核可改善AMI大鼠的HRV。     

urocortinⅢ的分布与生理作用

促肾上腺皮质激素释放因子（CRF）家族包括CRF,硬骨鱼紧张肽urotensin Ⅰ,蛙皮降压肽（sauvagine）,urocortin,以及新近发现的urocortin Ⅱ和urocortinⅢ。CRF不仅在中枢调节应激反应,而且在外周组织中也参与炎症、免疫等反应的调节。在发现urocortin之后,相继发现了urocortinⅡ和urocortinⅢ,它们与CRF家族的其他成员有着高度的同源性,被认为是CRF家族的新成员。以下就UcnⅢ的分布及作用的研究进展做一简要综述。