外周血中CD4~-CD8~-T细胞的分离及生物学特性检测

目的分离和培养外周血中CD4-CD8-T细胞,检测其生物学活性。方法应用免疫磁珠法分离CD4-CD8-T细胞,流式细胞仪检测CD4-CD8-T细胞纯度,ELISA法检测CD4-CD8-T细胞分泌的IL-4、IFN-γ含量。结果CD4-CD8-T细胞分离后纯度为82.77%,CD4-CD8-T细胞分泌IFN-γ的量为(159.28±38.16)pg/ml,而IL-4含量未能检测出。结论CD4-CD8-T细胞可分泌IFN-γ,基本不分泌IL-4。     

链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠尿podocalyxin排泄的动态变化

目的观察链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠足细胞标志蛋白podocalyxin随尿排泄的动态变化并探讨其意义。方法 STZ 65 mg/kg腹腔注射后建立糖尿病大鼠模型,正常大鼠注射等量枸橼酸缓冲液作为对照组(NC组)。分别于0周、2周、4周和8周监测两组大鼠血糖、尿白蛋白(UALB)及尿沉渣中PCX含量(UPCX)和8周末HbA1c,为消除尿量影响分别用尿肌酐(UCr)校正称为UACR(UALB/UCr)及UPCR(UPCX/UCr)。结果 (1)与健康对照组比较,糖尿病大鼠各时间点血糖和8周时HbA1c显著增高,P<0.01;(2)与健康对照组比较,2周时糖尿病大鼠UACR及UPCR即显著增高,并随时间不断增长;(3)糖尿病大鼠UPCR与UACR呈正相关(r=0.86,P<0.01)。结论足细胞损伤参与糖尿病肾脏病变的发生,尿PCX检测可作为反映糖尿病早期肾损害的指标之一。     

高敏C反应蛋白与代谢综合征患者颈动脉粥样硬化的关系

目的探讨高敏C反应蛋白(hs-CRP)与代谢综合征(MS)及其颈动脉粥样硬化的关系。方法88例研究对象MS诊断标准分为MS组44例、亚MS组23例以及对照组21例。应用酶联免疫吸附法检测血清hs-CRP水平,多普勒超声测定受试者颈总动脉(CCA)内膜-中层厚度(IMT),并观察颈动脉斑块的有无。结果(1)与对照组比较,MS组血清hs-CRP水平显著升高(P<0.01)。随着MS代谢组分的增多,血清hs-CRP水平逐渐升高;(2)与对照组及MS亚组比较,MS组CCA-IMT明显增厚(P<0.05);(3)血清hs-CRP与体质量指数、腰臀比以及稳态模型胰岛素抵抗指数呈显著正相关,与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)呈显著负相关(P<0.05);(4)颈动脉IMT增厚组(IMT≥0.9mm)血清hs-CRP水平显著高于颈动脉IMT正常组(IMT<0.9mm)(P<0.05),有颈动脉粥样斑块组hs-CRP水平明显高于无斑块组(P<0.05)。(5)hs-CRP是IMT的独立影响因素(P<0.05)。结论血清hs-CRP水平与MS代谢组分及其数量密切相关,血清hs-CRP水平增高是MS发病的危险因素。血清CRP水平升高可能参与了MS患者颈动脉粥样硬化的进程。     

流式细胞术用于念珠菌快速药敏试验的研究

目的探讨应用流式细胞术(FCM)进行念珠菌快速药敏试验的方法及其应用价值。方法应用FCM检测氟康唑(FCZ)对念珠菌的抗菌活性,药物作用时间3 h后,用碘化丙啶(PI)染色,分别检测10株念珠菌阴性对照管和M IC药物浓度作用管的平均荧光强度(MFI),计算两者比值,据此,设定流式细胞药敏试验(FCST)检测M IC的判断值,并根据该判断值对16株临床菌株同时进行常规药敏和FCST双盲测定。结果10株念珠菌测得的MFI比值为2.03,CV为6.9%;将MFI大于阴性对照管2倍(增加100%)的最低药物浓度定义为该菌的M IC;16株临床菌株中,有15株念珠菌两种方法测得M IC值相差在1个倍比稀释度以内,两者差异无统计学意义(P>0.05)。结论FCST与常规药敏试验结果有很好的一致性,并且具有快速、敏感、准确、便于自动化等优势。     

肿瘤患者血清血管内皮生长因子检测意义

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)与肿瘤的细胞学分型、细胞分化程度及其与肿瘤发生、转归、预后的相关性。方法采用ELISA法,用SLT酶标扫描仪扫描计算结果,数据分析采用SPSS 11.0统计软件。结果多种肿瘤患者体内高表达VEGF,其表达水平与肿瘤细胞的分化程度有关(P<0.01),但与细胞学分型无相关性;患者血清VEGF含量改变与肿瘤的转归及预后有显著的相关性(P<0.01)。结论检测患者血清VEGF水平对判断肿瘤的发生、转归、预后及研究细胞分化程度具有重要价值,同时有助于指导临床合理使用抗血管新生治疗。     

获得性维生素K依赖性凝血因子缺乏症

临床上经常会碰到一些原因不明的活化凝血活酶时间(APTT)和凝血酶原时间(PT)明显延长的出血患者,对维生素K治疗有效,停药后易于复发,称之为获得性维生素K依赖性凝血因子缺乏症.     

脑梗死患者抗磷脂抗体的测定与临床意义

目的探讨抗磷脂抗体(APA)与脑梗死之间的关系及其临床意义。方法对157例脑梗死(C I)患者和82例正常对照组(NC)采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测ACA-IgG、IgM、IgA,血浆部分凝血活酶时间-狼疮抗凝物法(PTT-LA)筛选狼疮抗凝物(LA)。结果C I组血清中ACAIgG、IgM、IgA以及LA的阳性率均明显高于NC组(P<0.05);C I组总APA阳性率(25.5%)显著高于NC组(4.9%),P<0.01;多灶性C I组APA的阳性率(36.5%)明显高于单灶性C I组(15.7%),P<0.05;在40例APA阳性脑梗死的病因分析中,≤50岁C I组单纯APA阳性率(58.3%)显著高于>50岁C I组单纯APA阳性率(14.3%),P<0.05;女性C I组与男性C I组之间APA阳性率差异无统计学意义。结论抗磷脂抗体与脑梗死密切相关,且以多灶性脑梗死多见,尤其是原因不明的脑梗死患者重要的致病危险因素。     

血管性血友病因子与血管损伤性疾病

血管性血友病因子（von Willebrand Factor，简称vWF），是血浆中的一种具有粘附功能的糖蛋白，除存在于血浆中外，还出现于血小板、内皮细胞以及内皮下组织中。在血浆中，vWF以多聚体形式存在。多聚体由几乎完全相同的成熟亚基组成。每多聚体中亚基数目可从2个到20余个不等。vwF的分子缺陷或生成不足可导致血管性血友病（vWD）。该病最先在1926年在芬兰报告。     

重症肌无力患者外周血中调节性T细胞的变化及免疫抑制剂对调节性T细胞的影响

目的评估重症肌无力（MG）患者体内的免疫紊乱,并探讨免疫抑制剂治疗MG患者的机制。方法将57例患者分为未治疗组、糖皮质激素（GC）治疗组和静脉注射免疫球蛋白（IVIg）治疗组,采用流式细胞仪的六色荧光分析技术。分析GC、免疫球蛋白（Ig）等免疫抑制剂对调节性T细胞（Tregs）的影响。结果（1）外周血CD4＋CD25＋FOXP3＋T细胞百分比在未治疗组患者外周循环中显著减少,GC治疗组有所升高,但差异无统计学意义,两者与健康对照组比较差异显著,P〈0．05;IVIg治疗组Treg比例显著升高,与健康对照组比较,P〈0．05,与其他各组比较,P〈0．01。（2）GC和Ig不同程度提升了患者外周血Tregs比例,后者更加显著。结论（1）CD4＋CD25＋FOXI＋T细胞百分比在MG患者外周循环中显著减少,可能是MG发病的原因。（2）GC和Ig的治疗作用与其提升Tregs比例有关。     

胃癌组织中抑癌基因RUNX3和CHFR启动子异常甲基化的临床意义

目的检测胃癌患者肿瘤组织中RUNX3和CHFR基因启动子区域甲基化状态,并探讨它们甲基化状态的改变与胃癌临床病理特征的关系。方法收集61例胃癌患者的肿瘤组织标本,胃癌患者术前均未行放疗和化疗。采用甲基化特异性PCR方法 (MSP法)检测RUNX3、CHFR基因启动子区的甲基化状态。分析这两个基因甲基化与胃癌患者临床病理特征之间的关系。结果 54.0%和40.9%的胃癌组织中分别存在RUNX3和CHFR基因启动子的异常甲基化,在≥5cm的胃癌组织中,RUNX3和CHFR的甲基化频率分别显著高于它们在<5cm胃癌组织的甲基化频率;RUNX3和CHFR基因的异常甲基化与其他临床病理特征如年龄、性别、病理分期、浸润深度、组织分化程度以及淋巴结转移无相关性。结论 RUNX3和CHFR基因的甲基化状态可作为评估胃癌患者临床病理特征的分子标志物。