转化生长因子β1促进骨髓间充质干细胞Snail表达的信号转导通路

目的 探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)-Akt信号转导通路在转化生长因子β1(TGF-β1)引起骨髓间充质干细胞(BMSCs)Snail表达改变中的调控作用. 方法 采用密度梯度离心结合贴壁法分离、培养大鼠BMSCs,用免疫荧光法对培养第3代的细胞进行鉴定.应用Western blotting检测TGF-β1对p-ERK1/2及p-Akt表达的影响,以不同浓度ERK特异性抑制剂(PD98059)或PI3K通路特异性抑制剂(Wortmannin)干预后检测BMSCs ERK、Akt磷酸化水平变化,确定PD98059和Wortmannin分别抑制Snail诱导的BMSCs ERK和Akt磷酸化的有效浓度,进而用RT-PCR、Western blotting技术证实TGF-β1诱导骨髓间充质干细胞Snail mRNA及蛋白表达的影响. 结果 密度梯度离心结合贴壁法能有效分离、纯化大鼠BMSCs,免疫荧光检测显示,培养的细胞CD29、CD44表达阳性,而CD34、CD45表达阴性;Western blotting分析显示,TGF-β1作用6h后BMSCs p-Akt和p-ERK水平较对照组明显增高;Wortmannin和PD98059可分别以剂量依赖性抑制BMSCs p-Akt和p-ERK水平;可有效抑制TGF-β1诱导的BMSCs ERK及Akt的磷酸化,PD98059和Wortmannin相应浓度分别为30 μmol/L和40 nmol/L.PD98059(30 μmol/L)、Wortmannin(40 nmol/L)明显抑制了TGF-β1诱导的Snail mRNA及蛋白水平,而两者联合应用对骨髓间充质干细胞Snail mRNA及蛋白表达的抑制作用具有协同作用,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 TGF-β1能促进BMSCs的Snail的转录及蛋白的表达,且ERK1/2及PI3K转导通路的激活在此过程中具有调控作用.     

球麻痹合并肺部感染患者不同时间雾化吸入临床观察

<正>吞咽困难是球麻痹的常见并发症,而吞咽困难常见的并发症为误吸/误咽引起的吸入性肺炎〔1〕,严重者可发生呼吸衰竭或呼吸窘迫综合征。球麻痹合并肺部感染的早期治疗临床上大多进行氧气雾化吸入来协助患者稀释痰液促进其排出。本研究观察球麻痹合并肺部感染患者不同时间氧气雾化吸入的效果及舒适度。1资料与方法1.1一般资料2011年6月至2012年6月在我科住院的吞咽障碍合并肺部感染的患者48例,年龄60⁹5岁,随机分为     

JAK2-STAT3途径介导凝血酶诱导的小胶质细胞TNF-α的激活

目的 探讨Janus激酶2/信号转导和转录激活子3（JAK2/STAT3）途径可否介导凝血酶诱导的小胶质细胞肿瘤坏死因子（TNF-α）激活。方法 采用20U/mL凝血酶或AG490预处理（10μmol/L）＋凝血酶（20U/mL）处理原代培养的小胶质细胞,经Western Blot法检测细胞Janus激酶1（JAK1）、磷酸化（P）-JAK1、P-JAK2、磷酸化-信号转导和转录激活子3（P-STAT3）、STAT3表达,酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清上清液TNF-α水平。结果 经凝血酶处理2-12h后JAK2、STAT3发生了磷酸化,3-48h后TNF-α表达增加。经JAK激酶抑制剂AG490预处理后再经凝血酶处理的小胶质细胞的JAK2和STAT3激活显著减少,且TNF-α释放被抑制。结论 JAK2-STAT3途径可介导凝血酶诱导的小胶质细胞TNF-α激活。     

凝血酶诱导的小胶质细胞激活促进多巴胺能神经元变性

目的探讨凝血酶（Thrombin）诱导小胶质细胞（Micoglia）激活与黑质多巴胺能神经元变性的关系。方法采用立体定向术注射凝血酶至大鼠黑质,在不同时间点观察酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase,TH）神经元的表达及小胶质细胞的激活情况;同时检测黑质NO量及iNOS mRNA表达。结果（1）凝血酶注入大鼠黑质导致明显的黑质多巴胺能神经元变性,呈时间依赖性,TH阳性细胞数在第3d开始下降,第7d有大量的TH阳性细胞丢失,与对照侧相比下降达约53％（P〈0．01）;高倍镜下可见胞体皱缩、突起明显缩短或减少;14d时细胞数下降至21％,30d时下降至12％（P〈0．01）。（2）凝血酶注射入黑质4h后小胶质细胞开始呈现为“灌木丛样”或少量呈现“阿米巴样”：12h后小胶质细胞数目明显增加且绝大部分呈现“阿米巴样”;24h后细胞已完全激活,“阿米巴样”细胞达高峰;3d维持高峰;14d后小胶质细胞染色变淡,体积变小,“阿米巴样”细胞数目下降。（3）与对照组相比,iNOSmRNA表达明显上调及NO合成增加（P〈0．05）,并且有iNOS在小胶质细胞表达。结论凝血酶对多巴胺能神经元具有一定的损毁作用,小胶质细胞的激活先于多巴胺能神经元变性,其激活后释放的NO有可能参与多巴胺能神经元变性。     

胃癌术后早期双路腹腔温热化疗并全身化疗的临床观察

 目的　探索胃癌术后化疗方法。方法　随机选择Ⅱ～Ⅳ期胃癌术后患者 5 6例作治疗组 ,采用早期双路腹腔温热化疗并全身化疗。对照组 ,选择Ⅱ～Ⅳ期胃癌术后 42例采用常规化疗的患者。结果　治疗组 5年生存率明显高于对照组 (P <0 .0 1 )。胃肠道反应有显著性差异 (P <0 .0 1 )。骨髓抑制两组无差异(P >0 .1 )。结论　胃癌术后早期双路腹腔温热化疗并全身化疗对胃癌术后腹腔复发和肝转移有预防作用     

双路温热化疗治疗肺腺癌胸水的临床研究

目的　探索肺腺癌胸水的治疗方法。方法　随机选择肺腺癌胸水患者 48例作治疗组 ,采用双路胸腔温热化疗治疗 ,同时随机选择肺腺癌胸水患者 44例作对照组 ,采用常规胸腔顺铂化疗治疗。结果　治疗组有效率、中位生存期明显高于对照组 ,胃肠道副反应、骨髓抑制治疗组明显低于对照组。结论　双路温热化疗方法简单、安全 ,控制胸水生长效果明显 ,副作用小     

雷公藤内酯醇对脂多糖诱导黑质多巴胺能神经元变性的保护作用

目的观察雷公藤内酯醇（triptolide,Tri）对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导黑质多巴胺能（dopamine,DA）神经元变性的保护作用。方法40只大鼠随机分为4组,每组10只,即：假手术对照组,LPS模型组,LPS加Tri组,LPS加生理盐水组。14天后观察LPS和雷公藤内酯醇对阿朴吗啡诱发的旋转行为、大鼠毁损侧纹状体DA及其代谢产物的含量和DA合成限速酶酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase,TH）阳性细胞数及小胶质细胞激活情况的影响。结果黑质注射LPS后可以模拟脑部免疫炎症反应异常现象,导致DA能神经元变性;黑质注射LPS后引起大鼠向注射侧出现旋转,雷公藤内酯醇能抑制这一作用;并能明显保护纹状体DA及其代谢产物的含量的降低及TH阳性细胞数的减少,抑制小胶质细胞的激活（P〈0．01）。结论雷公藤内酯醇可以通过抑制小胶质细胞激活,保护炎性介导的DA能神经元变性。     

凝血酶诱导小胶质细胞激活与黑质多巴胺能神经元变性关系的研究

目的探讨凝血酶诱导小胶质细胞激活与黑质多巴胺（DA）能神经元变性的关系。方法采用脑立体定向术将凝血酶注射人大鼠黑质，采用尼氏（Nissl）染色、酪氨酸羟化酶（TH）及特异性小胶质细胞表面补体受体（CR3）单克隆抗体（OX-42）标记免疫组织化学染色，观察凝血酶注射人大鼠黑质后不同时间点TH阳性多巴胺能神经元数量及小胶质细胞的激活情况。结果凝血酶注入黑质4h后小胶质细胞开始呈现“灌木丛样”或少量呈现阿米巴样；12h小胶质细胞数目明显增加且绝大部分呈现阿米巴样；24h已完全激活，“阿米巴样”细胞达高峰；3d维持高峰；14d后小胶质细胞染色变淡，体积变小，阿米巴样细胞数目下降。TH阳性细胞数在第3d开始下降，第7d有大量的TH阳性细胞丢失，与对照侧相比下降达约53％（P〈0．01），高倍镜下可见胞体皱缩、突起明显缩短或减少，14d时细胞数下降至21％，30d时约为12％（P〈0．01）。结论凝血酶对DA能神经元具有一定的损毁作用，小胶质细胞的激活先于DA能神经元变性，其活化可能参与DA能神经元变性。     

急性脑梗死患者血小板聚集功能、血管性血友病因子、抗凝血酶及 D-二聚体测定的临床意义

目的：探讨急性脑梗死患者血小板聚集功能（ PAgT）、血管性血友病因子（ vWF）、抗凝血酶（ AT）和D-二聚体（ D-dimer）水平变化及临床意义。方法选用相应的方法和仪器测定112例脑梗死及80例健康对照者血（浆） PAgT、vWF、AT和D-dimer水平变化,同时对部分患者进行治疗前、后的对比分析。结果脑梗死患者血中PAgT、vWF、D-dimer等指标均明显高于健康对照组,AT活性较对照组显著降低,差异有统计学意义（P＜0．05或P＜0．01）。选取经治疗效果明显好转的78例脑梗死患者,出院前取空腹静脉血测定PAgT、vWF、AT、D-dimer等指标,并与治疗前对照,结果治疗后PAgT、vWF、D-dimer降低,AT活性升高,差异有统计学意义（P＜0．05或P＜0．01）。结论脑梗死患者体内存在明显的凝血及纤溶功能异常,与血管内皮损伤、血小板聚集功能增强、凝血及纤溶功能亢进、抗凝功能降低等多因素有关。 PAgT、vWF、AT、D-dimer可以作为脑梗死患者诊断、治疗监测和预后判断的参考指标。     

高龄脑卒中患者不同翻身时间对压疮的预防效果

目的探讨高龄脑卒中患者使用气垫床不同翻身时间的效果。方法应用Braden评估表评分,将180例脑卒中高龄患者分为3组,即A组:2h翻身1次,B组:3h翻身1次,C组:4h翻身1次,入院后均使用交替喷气式气垫床,观察压疮发生情况。结果 A组与B组压疮发生率比较差异无统计学意义(P>0.05);C组压疮发生率高于其他2组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论脑卒中高龄患者3h翻身1次,不仅减少了压疮的发生率及频繁翻身给患者带来的痛苦,同时也减轻了护士及家属的劳动强度。