转基因动物和高血压研究

肾素—血管紧张素系统在血压调节中起重要作用。业已发现,不同类型遗传性高血压鼠的肾素基因有改变,研究其改变和功能的关系。可为揭示高血压发生机制提供新线索。本文着重介绍用转基因技术及转基因动物模型对肾素、血管紧张素原等基因进行研究的进展。转基因动物技术和应用的基本原理,是将目的     

肝衰竭分期联合MELD评分对肝衰竭短期预后判断的研究

目的 探讨肝衰竭分期联合MELD评分对乙型肝炎病毒(HBV)相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)短期预后判断的临床意义.方法 将该院感染消化科2013年7月至2015年7月收治的110例HBV-ACLF纳入研究,将患者分为早、中、晚期3组,比较各组3个月时的病死率.按照入组时的MELD分值,分为MELD＜ 20分、20分≤MELD＜ 30分、30分≤MELD＜ 40分、40分≤MELD 4个组,比较各组3个月病死率.将肝衰竭分期为中期的患者按照△MELD(△MELD=MELD1周-MELD基线)＜0分或＞0分分为两组,比较两组3个月病死率.结果 早(n=18)、中(n=48)、晚期(n=44)患者3个月病死率为0、50％、95％ (P＜0.05);MELD＜20分(n=24)、20分≤MELD＜30分(n=54)、30分≤MELD＜40分(n=28)、40分≤MELD(n=4),各组的病死率为31.58％、66.67％、85.71％、100％ (P＜0.05).肝衰竭分期为中期的患者中,按照△MELD＜0分或＞0分,两组的病死率分别为41.18％和85.71％ (P＜0.05).结论 肝衰竭早期患者生存概率大,而肝衰竭晚期以及△MELD＞0的中期患者3月死亡风险高.     

法洛四联症患者ZFPM2/FOG2基因编码区突变检测

目的 探讨心脏正常发育相关基因改变导致法洛四联症（TOF）的发生机制.方法 通过聚合酶链反应,并结合DNA测序分析方法检测散发106例TOF患者ZFPM2/FOG2基因编码区的突变或单核苷酸多态性位点.结果 在16例不同的患者ZFPM2/FOG2基因的外显子2、6、8上,分别发现多个位点基因改变,并将新发现的基因改变位点在110名健康人中进行验证,证实其改变位点均为突变位点.结论 ZFPM2/FOG2基因新位点的突变可能通过不同的机制进一步导致转录蛋白的改变,推测是法洛四联症发病的重要遗传基础.     

卒中型高血压大鼠心肌线粒体Ca~（2＋），Mg~（2＋）—ATPase及膜流动

本文比较了卒中型自发往高血压鼠（ＳＨＲｓｐ）和京都Ｗｉｓｔａｒ正常血压鼠（ＷＫＹ）心肌线粒体Ｃａ￣（２＋），Ｍｇ￣（２＋）－ＡＴＰａｓｅ活力及膜流动性。用定磷法测得ＷＫＹ和ＳＨＲｓｐ的Ｃａ￣（２＋），Ｍｇ￣（２＋）－ＡＴＰａｓｅ活力（２５℃）分别为０．２８７±０．０１６及０．２１８±０．０１７μｍｏｌ／（ｍｉｎ．ｍｇ）（－ｘ±Ｓｘ）。ＳＨＲｓｐ心肌线粒体Ｃａ￣（２＋），Ｍｇ￣（２＋）－ＡＴＰａｓｅ活力降低２４．７％，两组比较有显著差异（Ｐ＜０．０１，ｎ＝９）．以ＤＰＨ标记心肌线粒体膜，测得ＷＫＹ和ＳＨＲｓｐ的荧光偏振值分别为０．１８７±０．００３及０．１８１±０．００３（Ｐ＞０．０５，ｎ＝６）。     

小鼠肾素－Ⅱ全长基因的物理图谱

小鼠肾素－Ⅰ（Ｒｅｎ－１）和肾素－Ⅱ（Ｒｅｎ－２）的ｃＤＮＡ有９６％的同源性。以ＸｈｏⅠ从重组质粒ｐＫＧ－Ｒ２Ｄ上切取包含Ｒｅｎ－２全长基因及周围序列的２４ｋｂ片段。该片段分别经单、双酶切后，用Ｒｅｎ－１ｃＤＮＡ半长（７３５ｂｐ）及全长序列（１４００ｂｐ）为探针进行分子杂交，据片段大小及杂交带的位置关系构建出此２４ｋｂ片段的物理图谱。     

microRNA-125b在脓毒症急性肺损伤中的表达及其与炎症因子水平相关性

摘要：目的探讨microRNA-125b（miR-125b）在脓毒症急性肺损伤中的表达及其与炎症因子的相关性。方法 腹腔注射脂多糖（LPS）诱导急性肺损伤大鼠模型,对照组注射等量的生理盐水（n=20）;各模型组（n=20）大鼠注射LPS 4、8、12及24 h后取其肺组织,HE染色观察病理学变化;PCR检测各组各时点肺组织中miR-125b、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）与白细胞介素-6（IL-6）变化。Pearson相关性分析实验组肺组织中miR-125b的表达与TNF-α、IL-6水平的相关性。NR8383细胞培养后分组,对照组不进行LPS刺激,实验组加入LPS刺激4 h、8 h、12 h及24 h时收集细胞,检测各组miR-125b、TNF-α与IL-6的含量变化。另NR8383细胞设3组,阴性对照组只转染空表达质粒,miR-125b mimic组转染miR-125b mimic表达质粒,miR-125b inhibitor组转染miR-125b inhibitor质粒。PCR测各组细胞中miR-125b 表达情况,Western blot测Notch1的表达情况。结果LPS各处理组大鼠模型肺组织严重出血、水肿及大量炎症细胞浸润。与对照组比较,在注射LPS 4、8、12以24 h后,实验组大鼠肺组织中miR-125b显著降低;而肺组织中TNF-α与IL-6水平则升高,其中在LPS注射4 h后,TNF-α与IL-6的表达水平达到峰值（P＜0.05）。实验组肺组织中miR-125b的表达与TNF-α及IL-6呈负相关（r 分别为-0.599、-0.580;P＜0.05）。在LPS诱导的第4、8、12、24 h,实验组NR8383细胞系miR-125b表达水平均低于对照组,而TNF-α、IL-6的表达水平均高于对照组（P＜0.05）。与阴性对照组比较,miR-125b mimic组miR-125b 相对表达量升高、Notch1蛋白相对表达量则降低（P＜0.05）,miR-125binhibitor组miR-125b 相对表达量降低、Notch1蛋白相对表达量升高（P＜0.05）;与miR-125b mimic组比较,miR-125binhibitor组miR-125b 相对表达量降低、Notch1蛋白相对表达量升高（P＜0.05）。结论在脓毒症急性肺损伤中,microRNA-125b可能通过调控Notch1蛋白的表达,影响炎症因子TNF-α与IL-6的表达,参与其免疫炎症调控过程。     

肾素基因在乳鼠心肌与非心肌细胞的转录表达及调节

利用ＲＮＡ狭缝杂交技术，观察了肾素基因在体外培养的乳鼠心肌细胞与非心肌细胞的表达以及血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）对其表达的影响，同时还观察了血管紧张素转换酶抑制剂－卡托普利对这两类细胞ＤＮＡ合成的作用。结果表明：这两类细胞中均有肾素基因的表达；ＡｎｇⅡ对其表达具有负性调节作用。而卡托普利可抑制非心肌细胞的３Ｈ－ＴｄＲ掺入率且呈明显的剂量依赖关系，但对心肌细胞３Ｈ－ＴｄＲ掺入率只在效高浓应时有抑制作用。以上结果提示：心肌与非心肌细胞中均有ＲＡＳ的存在，并于细胞水平上被隔室化，对细胞生长具有不同的调节作用。     

有效移植转基因后的受精卵

有效移植转基因后的受精卵田小利，刘红，陈兰英，方福德（中国医学科学院心血管病研究所生化研究室，北京１０００３７）受精卵的移植是一项精心、细致的显微操作技术，在转基因动物的制备中，具有连接受精卵和个体发育的桥梁作用。实际工作中尽管工作者细心操作，但移植...     

DC-CIK细胞对人肝癌HEPG2细胞周期、凋亡的影响

目的 探讨细胞因子从肝癌患者外周血贴壁单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)诱导的树突状细胞( dendritic cells,DCs)与杀伤细胞(cytokine induced killer,CIK)对人肝癌HEPG2细胞系周期、凋亡的影响.方法 用肝癌患者肝...     

干扰素诱导蛋白10在病毒性肝炎中的意义及相关研究进展

病毒性肝炎是我国慢性肝病的主要类型,也是威胁人类健康的主要疾病之一,然而其病理过程及发病机制尚不完全明确,治疗效果仍不甚满意.近年来的研究发现,干扰素诱导蛋白10(IP-10)作为一种免疫学指标,在慢性肝脏疾病的病理过程中具有重要意义,尤其对IFN抗病毒治疗有无应答的判断有较高的预测价值.本文就IP-10在病毒性肝炎中的意义及相关研究进展作一综述.