渗透压负荷对兔椎间盘器官培养模型的影响

目的:建立一种可用于体外研究椎间盘退变的椎间盘器官培养模型,探讨渗透压负荷对模型椎间盘细胞活力和代谢的影响.方法:4～6月龄新西兰大白兔10只,均分为两组,处死后立即手术切取胸腰段椎间盘,每只9个,分别在等渗(300mOsm/kg,等渗组)或高渗(410mOsm/kg,高渗组)培养基中进行整体器官培养,在培养前和培养后第7、14、21、28天,利用Mitotracker Green荧光探针、组织化学和生物化学方法评估两组椎间盘髓核细胞的活力、结构的完整性以及蛋白多糖含量的变化.结果:取材后培养前椎间盘髓核细胞的荧光强度为11503±402,在体外培养过程中,高渗组第14天荧光强度为9202±907,与培养前比较差异有显著性意义(P＜0.05),第7、21和28天分别为10504±710、10860±711、10713±953,与培养前相比较无显著性差异(P＞0.05);等渗组第7、14、21、28天分别为11350±351、11207±385、10914±300、10862±229,与培养前比较无显著性差异(P＞0.05);两组在第7、21和28天时无显著性意义(P＞0.05).在培养过程中,两组椎间盘髓核和纤维环的组织结构能够基本保持完整,髓核蛋白多糖含量在培养第7天高渗组和等渗组分别为3.33±0.28m/100mg和2.83±0.25m/100mg,均较培养前(5.03±0.37m/100mg)明显降低(P＜0.01),第14、21、28天时与第7天相比下降不明显(P＞0.05).两组相同时间点的差异无显著性意义(P＞0.05).结论:椎间盘器官培养模型可以在等渗或高渗环境中有效维持兔椎间盘结构的完整性和髓核细胞的活力至少4周.     

Tenascin-C : 骨肉瘤预后标志物

背景：在过去的数十年间,转移性骨肉瘤的治疗一直是亟待解决的临床难题。细胞外基质蛋白作为肿瘤微环境关键组成成份,在骨肉瘤进展过程中发挥着重要作用。在此,我们通过基因芯片技术分析不同转移能力骨肉瘤细胞系基因表达,在编码细胞外基质蛋白基因中寻找与骨肉瘤进展相关的基因,并通过免疫组化技术检测这些基因在骨肉瘤标本中的表达,以评价其与临床预后的关系。 方法：通过基因芯片技术分析骨肉瘤细胞系MG63-wt及其高转移亚系MG63-A1的基因表达差异。对两个细胞系间表达差异达4倍以上的基因通过Gene Ontology方法筛选编码细胞外基质蛋白的基因。通过RT-PCR和western blot验证候选基因的表达水平,免疫组化检测候选基因在骨肉标本中的表达以分析其与临床预后的关系。 结果：基因芯片检测和Gene Ontology分析发现一个重要的细胞外基质蛋白――Tenascin-C的表达在高转移骨肉瘤细胞系MG63-A1中明显降低。RT-PCR和western blot分别在mRNA水平和蛋白质水平证实其表达水平。免疫组化检测发现Tenascin-C在骨肉瘤标本中的阳性表达见于细胞外间隙。Tenascin-C低表达组（＜20％）患者的预后较差,差异有统计学意义。 结论：Tenascin-C的表达水平与骨肉瘤患者预后呈正相关。Tenascin-C在骨肉瘤进展中的生物学作用有待进一步的体外细胞模型研究和更大样本临床研究。     

青少年特发性脊柱侧凸再手术原因分析与策略

【摘要】 目的：分析青少年特发性脊柱侧凸初次术后再手术常见原因,并探讨治疗策略及预防措施。方法：2003年1月～2008年12月我院收治的特发性脊柱侧凸再手术病例10例,收集其初次矫形术前、术后随访及再手术术后的相关影像资料、初次手术和再手术策略等资料进行回顾性分析。结果：10例中5例因侧凸进展而采用延长融合范围治疗;1例因近端交界后凸加剧而需向近端延长融合范围;3例感染患者接受了清创及抗生素治疗,其中2例保留了内固定,1例为控制感染而取出内固定;1例假关节形成患者采用更换断裂内固定及局部植骨治疗。所有患者经随访12～33个月（平均21.5个月）,脊柱平衡保持良好,无侧凸进展、失代偿、内固定失败等并发症。结论：特发性脊柱侧凸术后常见再手术原因包括侧凸进展、感染、假关节形成、近端异常交界后凸等,选择合适的再手术策略可以取得满意的疗效。     

髋关节假体陶瓷内衬碎裂误诊为异位骨化一例报告

患者男,59岁,因双侧髋关节发育不良骨关节炎分别于2002年12月和2003年11月在我院行右侧和左侧全髋关节置换术.术前右侧和左侧Harris髋关节评分分别为42分和48分.均采用陶瓷-陶瓷全髋关节假体(蛇牌,德国),生物型股骨柄,髋臼杯外径48 mm.陶瓷组配为BioloxForte,直径28mm中号陶瓷头.     

软骨终板通透性对体外培养大鼠髓核细胞生物学特性的影响

目的:观察软骨终板营养通路通透性对外培养大鼠髓核细胞生物学特性的影响。方法:4周龄雄性SD大鼠20只,处死后立即手术切取腰段椎间盘(包括邻近的软骨终板),每只6个,随机分为A、B、C 3组,其中A组为正常对照组,B组用骨蜡封闭上软骨终板,C组用骨蜡封闭上、下软骨终板,3组椎间盘在体外进行整体器官培养。于培养前和培养7d、14d时,分别用Mitotracker Green荧光探针和RT-PCR方法评估椎间盘髓核细胞的活力和髓核Ⅱ型胶原及蛋白多糖mRNA的表达;于培养前和培养14d时用免疫组化方法观察髓核蛋白多糖、Ⅱ型胶原和基质金属蛋白酶3(MMP-3)的表达。结果:取材后培养前髓核细胞的荧光强度最高;在体外培养7d,3组髓核细胞的荧光强度较培养前变化均不明显,3组之间无显著性差异(P>0.05);培养14d时A、B、C组荧光强度较培养前分别降低约19%、22%和30%,与培养前比较差异均有显著性(P<0.05),其中C组与A、B两组比较有显著性差异(P<0.05),A、B两组比较差异无显著性(P>0.05)。免疫组织化学观察显示在培养14d时3组髓核蛋白多糖和Ⅱ型胶原的染色强度与培养前比较均有所降低,MMP-3阳性染色增加,蛋白多糖、Ⅱ型胶原和MMP-3染色强度的变化以C组最为明显。3组髓核细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖mRNA的表达在培养7d和14d时均较培养前显著降低(P<0.05),其中7d时3组之间无显著性差异(P>0.05),14d时A、B两组间无显著性差异(P>0.05),C组与A、B组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:降低体外培养大鼠椎间盘上下软骨终板的通透性,可在短期内影响髓核细胞的生物学特性,加速椎间盘的退变。     

椎间盘退变模型的研究进展

椎间盘退变过程是对因遗传因素、老化、椎间盘营养受损及负荷异常等引起的不断进展的局部稳定结构失效所导致的一种异常的、细胞介导的反应~([1]).     

藻酸钠微球介导髓核细胞对骨髓间充质干细胞诱导分化的影响

背景：椎间盘退行性变的理想治疗方法是利用组织工程技术修复退行性变的椎间盘，而修复所需的髓核细胞来源十分有限。 目的：观察在藻酸盐微球的介导下，髓核细胞与骨髓间充质干细胞非接触共培养时，髓核细胞对骨髓间充质干细胞的诱导作用。 设计、时间及地点：细胞学体外观察，实验于2007-10/2008-08在华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科实验室和中心实验室进行。 材料：4月龄健康新西兰大耳白兔5只，取髓核细胞与骨髓间充质干细胞原代培养，利用传代法分离纯化。 方法：①将纯化的骨髓间充质干细胞经胰蛋白酶消化、收集，并与适量的藻酸钠溶液混合，形成109 L-1的单细胞悬液，将混合好的单细胞悬液经注射器滴加至35 g/L的CaCl2溶液中，形成海藻酸钙凝胶珠。②将海藻酸钠凝胶微球与髓核细胞共培养。在7 d和15 d时，分组溶解海藻酸钙凝胶珠，收集骨髓间充质干细胞。 主要观察指标：利用免疫组化技术、RT-PCR技术和Western blot技术检测骨髓间充质干细胞中Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达，用以判断髓核细胞对骨髓间充质干细胞在非接触条件下的诱导作用。 结果：在骨髓间充质干细胞的细胞爬片免疫组化染色中可见，Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖染色阳性，RT-PCR和Western blot结果显示经诱导后骨髓间充质干细胞中已有Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖基因的表达，且诱导15 d组的目的条带明显亮于诱导7 d组的目的条带。 结论: 在藻酸盐微球的介导下，体外非接触共同培养时髓核细胞能够实现对骨髓间充质干细胞的诱导作用。     

电磁导航系统结合Stagnara投照法在特发性脊柱侧凸手术中的应用

目的:探讨在特发性脊柱侧凸三维矫形术中应用电磁导航系统结合Stagnara投照法采集C型臂X线透视图像对椎弓根螺钉置入准确性与安全性的影响.方法:2006年4月～2008年12月在电磁导航辅助下行特发性脊柱侧凸三维矫形术47例(导航组),共置入椎弓根螺钉492枚:2004年6月～2006年4月在C型臂X线机透视下行特发性脊柱侧凸三维矫形术39例(透视组),共置入椎弓根螺钉454枚,两组均采用Stagnara投照法采集C型臂X线透视图像.术后行CT薄层平扫加椎弓根矢状面二维重建,通过测量椎弓根皮质外缘与穿出的螺钉边缘的垂直距离对椎弓根螺钉位置进行评价,并分为A、B、C、D级,以A级和B级合并计算优良率.结果:导航组的手术时间为165～420min,平均233.7min,透视组为175～365min.平均236.1min,两组比较无显著性差异(P>0.05);导航组术中出血量为450～1650ml,平均712.2ml.透视组为550～1900ml,平均794.9ml,两组比较有显著性差异(P<0.05).导航组术后椎弓根螺钉位置A级476枚,B级9枚,C级5枚,D级2枚,优良率为98.5%;透视组A级411枚,B级14枚,C级17枚,D级12枚,优良率为93.6%,两组置钉优良率比较有显著性差异(P<0.05).导航组无神经、血管并发症发生.透视组2例在术中发生螺钉损伤硬膜囊,1例术后发现螺钉刺激神经根.结论:在特发性脊柱侧凸三维矫形术中应用电磁导航系统结合Stagnara投照法采集C型臂X线透视图像可降低椎弓根螺钉的误置率,减少术中出血量,提高手术安全性.     

微创经椎间孔减压腰椎融合内固定治疗老年腰椎退行性病变患者的近期效果

目的 探讨微创经椎间孔减压腰椎融合内固定术(MIS-TLIF)治疗老年腰椎退行性病变的临床效果。方法 选取邯郸市第一医院2019年7月至2021年7月收治的老年腰椎退行性病变患者92例,按照随机数字表法分为对照组和观察组,各46例。对照组患者给予传统后路开放经椎间孔椎间融合内固定术(TLIF)进行治疗,观察组患者给予MIS-TLIF进行治疗,2组均于术后随访6个月。比较2组手术指标,术前及术后1 d凝血功能、疼痛介质,术前及术后1个月疼痛及骨骼功能各项评分指标,术后6个月并发症发生情况。结果 观察组手术时间、术后下床活动时间、住院时间短于对照组,术中出血量均低于对照组;与术前比,2组术后1 d血浆凝血酶原时间(PT)延长,但观察组短于对照组(P<0.05);血浆纤维蛋白原(FIB)、血浆D-二聚体(D-dimer)、血清β-内啡肽(β-EP)、前列腺素E₂(PGE₂)、降钙素基因相关肽(CGRP)水平均升高,但观察组低于对照组;与术前比,2组术后1个月日本骨科协会评估治疗(JOA)评分均升高,且观察组高于对照组,视觉模拟量表(VAS)及...