载脂蛋白E基因多态性与星形胶质细胞损伤后兴奋性氨基酸变化的关系

目的探讨载脂蛋白E(apolipoprotein E,蛋白:ApoE,基因:APOE)基因多态性与星形胶质细胞损伤后兴奋性氨基酸(excitatory amino acids,EAAs)变化的关系。方法提取APOE敲除鼠新生2 d内乳鼠大脑皮层星形胶质细胞,并以GFAP-FITC免疫荧光法对所获细胞进行鉴定。脂质体介导重组体pEGFP-N1-APOEε2、pEGFP-N1-APOEε3、pEGFP-N1-APOEε4分别转染入星形胶质细胞中,RT-PCR鉴定该基因在转染后的细胞中的表达,荧光显微镜观察该基因的亚细胞定位及转染效率。制备3种基因型星形胶质细胞划伤模型,采用氨基酸分析仪分别测其中氨基酸的含量,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果星形胶质细胞划伤后谷氨酸(Glu)和天冬氨酸(Asp)的释放较早,在划伤后30 min即达到高峰,在伤后30、60 min APOEε4型显著高于APOEε2、APOEε3型(P<0.05)。细胞早期凋亡率在24 h达到高峰,在伤后12、24 hAPOEε4型显著高于APOEε2、APOEε3型(P<0.05)。结论 APOE以亚型特异性的方式影响星形胶质细胞创伤后EAAs的释放,APOEε4携带体可能通过EAAs毒性作用导致创伤性脑损伤急性期伤情加重及不良预后。     

自拟丹参钩藤汤为主治疗原发性高血压312例疗效观察

该文报道治疗427例原发性高血压患者，以自拟丹参钩藤汤加减为主、配合常规西药治疗312例，单纯常规西药治疗115例，4周为1个疗程并观察疗效，结果2组有效率分别为85．9％、73．0％，2组疗效比较，治疗组明显优于对照组（P＜0．01）。     

载脂蛋白E基因多态性在星形胶质细胞缺氧性损伤后早期凋亡中的作用

目的 探讨载脂蛋白E(apolipoprotein E,APOE)基因多态性在星形胶质细胞缺氧性损伤后早期凋亡中的作用.方法 原代培养APOE基因野生鼠、APOE转基因鼠(ε3、ε4)的星形胶质细胞,并纯化鉴定;利用缺氧法构建星形胶质细胞缺氧损伤模型,透射电镜观察细胞及线粒体形态变化,流式细胞仪检测细胞早期凋亡率及线粒体膜电位变化情况.结果 缺氧6h后,通过电镜观察到各组细胞足突肿胀,线粒体形态不规则、空泡化、嵴不规则,各组细胞之间形态变化无明显差异;APOEε4组细胞早期凋亡率、线粒体膜电位下降程度明显高于APOEε3组、APOE野生组(P＜0.05).结论 缺氧损伤后早期,与APOEε3组、APOE野生组比较,APOEε4组星形胶质细胞线粒体膜电位下降程度更大,这可能是导致更多的星形胶质细胞凋亡的原因之一.     

湘潭制槟榔与幽门螺杆菌感染关系研究

目的本文针对湘潭制槟榔与幽门螺杆菌(Hp)感染关系进行研究.方法我们首先随机将105例无临床症状的人群分成食槟榔组55例,不食者50例,做血清抗Hp-IgG检查;男外,在内镜室对1814例有消化道症状的城乡人群随机分成嚼湘潭制槟榔观察组956例和不嚼者的对照组858例.然后,通过内镜对每位患者进行镜下胃窦部取2～3块标本做尿素酶检测,并进行实验室体Hp抑菌试验.结果血清学调查,嚼槟榔组55例中,抗Hp-IgG阴性者43例(占78.18%)、阳性者12例(占21.82%),不嚼食50例抗Hp-IgG阴性者22例(占44%),阳性28例(占56%).另外,内镜调查,两组1814例中,观察组Hp阳性率26.46%,对照组71.95%(P<0.005).体外小剂量湘潭制槟榔对Hp有明显的杀灭作用.结论湘潭制槟榔对Hp有很强的抑菌作用.     

载脂蛋白E亚型通过细胞外信号调节激酶途径影响轴突生长锥的生长

目的观察载脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)各个亚型对神经元轴突生长锥的影响并探索其机制。方法体外培养小鼠皮质神经块,加入重组人类ApoE到神经块培养基中,免疫荧光和Western blot检测重组人类ApoE能否进入轴突及其生长锥;鬼丙环肽染色生长锥观察重组人类ApoE2、3、4对生长锥的影响;加入细胞外信号调节激酶(extracel-lular signal-regulated kinase,ERK)信号通路抑制剂,观察ERK信号通路是否参与ApoE亚型对生长锥的影响。结果免疫荧光和Western blot显示加入重组人类ApoE后的神经块轴突及其生长锥中ApoE为阳性;加入重组人类ApoE2、3、4组的荧光强度分别为(50.7±19.4)、(58.5±15.4)、(23.4±13.5),其中加入重组人类ApoE4的轴突生长锥荧光强度低于加入重组人类ApoE2、3的生长锥荧光强度(P<0.05);同时加入重组人类ApoE4和ERK信号通路抑制剂的实验组生长锥荧光强度为(32.8±13.2),而仅加入重组人类ApoE4的实验组生长锥荧光强度为(21.9±6.9),实验组生长锥荧光强度高于对照组(P<0.05)。结论重组人类ApoE能进入轴突及其生长锥,ApoE4能负性影响生长锥生长,阻断ERK信号途径能抑制ApoE4对生长锥的负面影响。     

编码大鼠Nogo受体mRNA的shRNA重组腺病毒载体的构建和鉴定

目的:构建Nogo受体(NgR)特异性shRNA重组腺病毒载体,为应用基因沉默技术从转录后水平进行缺血性脑损伤的基因治疗研究奠定基础.方法:将前期构建的大鼠Nogo受体mRNA的shRNA特异性真核表达载体pGenesil-1-shRNA的表达启动子U6连同shRNA亚克隆至穿梭质粒pAdTrack,酶切及DNA测序鉴定后,将含NgR基因的重组穿梭质粒pAdTrack-U6-shRNA经PmeI线性化后转化入pAdEasy-1感受态细菌.将pAd-U6-shRNA质粒经PacI线性化后转染293细胞,包装重组腺病毒Adeno-U6-shRNA,并进行PCR鉴定、PCR产物测序及病毒滴度测定.结果:结果证实pAdTrack-U6-shRNA及pAd-U6-shRNA质粒构建正确,收获病毒后的PCR及DNA测序结果证明Adeno-U6-shRNA包被成功.结论:成功构建了大鼠Nogo受体mRNA的shRNA重组腺病毒载体Adeno-U6-shRNA,将为应用基因沉默技术研究NgR在缺血性脑损伤后神经再生中的作用奠定基础.     

甲亢灵片的制备与临床应用

甲亢灵片是我公司采用现代科学工艺生产,治疗甲亢的中药制剂,现将其制备方法及临床应用报告如下。１制备方法１．１处方墨旱莲９０ｇ,丹参９０ｇ,夏枯草９０ｇ,山药９０ｇ,龙骨（煅）１８０ｇ,牡蛎（煅）１８０ｇ,约压制成９０片。１．２制备方法取山药９ｇ,粉碎成细粉,过筛;龙骨、牡蛎加水煎煮３次,每次２小时,合并煎液,滤过;剩余的山药与墨旱莲、丹参、夏枯草加水煎煮３次,每次２小时,合并煎液,滤过,滤液浓缩至相对密度约为１．１０（６０～７０℃）,加乙醇２倍量,搅匀,放置约１０小时,滤过,滤液回收乙醇至无醇味,加入上述龙骨、牡蛎煎液,…     

脑动静脉畸形直径与载脂蛋白E启动子基因多态性相关性研究

目的本研究从启动子基因多态性的角度探索脑动静脉畸形(AVM)直径与载脂蛋白E基因(APOE)启动子亚型-219 G/T、-427 T/C和-491 A/T之间的关系。方法行颅脑CT血管造影(CTA)检查患者AVM病变,同时取患者静脉血液使用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)技术来检测APOE启动子基因型,并使用χ2检验和Logistic回归分析其相关性。结果纳入137例AVM的患者,其中51例患者AVM直径3 cm,携带-491 A的患者AVM直径3 cm的比例显著高于携带-491 T的患者,经Logistic回归分析揭示-491 A是AVM大于3 cm的危险因素。结论脑内大于3 cm的AVM的发病可能与患者携带有APOE启动子-491 A相关。     

体外培养大鼠海马神经元糖氧剥夺/复氧轴突损伤模型的建立

目的 建立体外培养大鼠海马神经元糖氧剥夺/复氧轴突损伤模型.方法 取体外培养7 d的海马神经元,分为正常对照组和糖氧剥夺/复氧组.后者分别在糖氧剥夺0.5、1.0、1.5 h再复糖复氧.常氧状态下检测各组复氧后1、5、24、48、72 h培养液中的LDH活性,并观察神经元形态和轴突长度的变化.结果 糖氧剥夺/复氧后的神经元折光性降低,胞体肿胀,并且轴突逐渐变短,同时LDH水平随时间延长增加.其中糖氧剥夺0.5 h再复氧组效果最佳,其轴突缩短明显且神经元存活率较高.结论 成功建立了体外培养SD大鼠海马神经元糖氧剥夺/复氧轴突损伤模型.