中西医结合治疗椎-基底动脉供血不足临床疗效观察

目的 观察中西医结合治疗椎-基底动脉供血不足(VBI)的疗效.方法 选择我院VBI患者1200例,随机分为治疗组与对照组.治疗组在常规治疗基础上加用中药煎服,疗程15d.结果 治疗组总有效率明显优于对照组.结论 中西医结合治疗VBI有利于中西药发挥协同作用而取得较好效果,而且安全性高,值得推广应用.     

细胞因子基因转导入肿瘤细胞的方法及鉴定

含细胞因子cDNA的缺陷型逆转录病毒载体质粒分别经大肠杆菌扩增、CsCl超离心法大量抽提纯化后,采用磷酸钙共沉淀法转染逆转录病毒包装细胞系PA317。分别收集到含IFN-γ、TNF-α和IL-2基因的缺陷型逆转录病毒上清及只具空白载体质粒pLXSN的病毒上清,这四种病毒颗粒用于转导人肝癌、胃癌细胞,由此建立了感染人肝癌、胃癌细胞株的转基因方法,该方法简便有效,可获得单克隆化的细胞因子基因修饰株,基因修饰株细胞抽提的DNA经PCR扩增后确证其含有细胞因子基因的逆转录病毒基因组存在,SacI酶切后用相应细胞因子探针作Southern杂交证明其未发生重排,抽提的mRNA经逆转录PCR及Northern杂交证明有相应细胞因子及筛选标记基因的表达,生物活性分析也证实各基因修饰细胞培养上清液中有一定活性的相应细胞因子,     

肿瘤坏死因子基因转导肿瘤浸润淋巴细胞的初步研究及应用

用单纯疤疹病毒(HSV)的缺陷株作为载体,感染肿瘤细胞治疗脑瘤的研究已取得了不少进展.本文报道将HSV—tk基因转移联合抗瘤药物GCV可使荷脑瘤大鼠长期存活.9L神经纤维肉瘤细胞用HSV载体hrR3转染,hrR3缺乏RNA还原酶,只能在肿瘤细胞中复制而不能在神经细胞中复制存活,同时还携带病毒胸苷激酶(tk)基因,RH105无tk基因,转染hrR3的9L细胞体外培养,加入GCV1μg/ml共孵育,结果发现9L细胞被杀死的数目比单纯感染hrR3的细胞死亡数目增加23%.GCV加到不表达tk基因的RH105载体转染的9L细胞体系中没有杀伤作用.将神经纤维肉瘤9L细胞4×10~4接种到Fischer 344CD大鼠脑前叶,5天后将hrR3载体2×10~7PFU/10μl直接定位注射至脑瘤部位.结果发现hrR3载体治疗可使20%的大鼠存活时间超过5个月,而生理盐水组全部死亡.接种病毒后同时用GCV7.5mg/kg治疗7天,可使48%的荷9T肿瘤细胞的大鼠存活时间超过5个月PH105感染的治疗组大鼠全部死亡,组织化学检查证明外源性的tk基因在肿瘤细     

PA317产生高滴度带有人TNF-α基因逆转录病毒的研究

逆转录病毒介导的基因转移技术要过渡到临床应用，主要解决如何使病毒载体具有高滴度而不具有复制活性．本文旨在探索建立一种合适的方法，能产生高滴度而且是安全的逆转录病毒载体。采用带有人肿瘤坏死因子基因的LXSN载体转染PA317包装细胞，建立产病毒的包装细胞株，结果表明：病毒载体滴度受包装培养液体积和胎牛血清浓度影响：包装细胞在32℃产生的病毒滴度比37℃高，而且比较稳定。产病毒包装细胞和被感染的靶细胞经PCR分析显示．被转染和被转导的细胞都有病毒基因的整合．而且包装细胞不会产生具有复制活性的逆转录病毒，因此能进一步用于临床研究．     

IL-2基因转导小鼠肝癌细胞的实验研究

将细胞因子基因导入肿瘤以制备能用于肿瘤治疗的新型瘤苗．是近几年来肿瘤免疫治疗和基因治疗研究的热门课题。该方法通过基因修饰以提高肿瘤细胞的免疫原性，可被机体免疫系统识别，同时由死亡肿瘤细胞产生的细胞因子，激活免疫效应细胞，以改变肿瘤局部的微环境，提高机体的抗肿瘤免疫功能，     

IL-2基因转导小鼠肝癌细胞的实验研究

用重组人白细胞介素-2(IL-2)含信号肽cDNA的缺陷型逆转录病毒,将IL-2基因转导入小鼠H_(22)肝癌细胞株,经PCR和RT-PCR检测证实了转导后的细胞DNA内确有NeoR和IL-2基因的存在的表达。分别用光镜和电镜观察了经IL-2基因转录的H_(22)细胞体外形态,MTT法检测细胞体外增殖能力以及皮下接种H_(22)-IL-2细胞后观察肿瘤生长能力。结果表明经IL-2基因转导的鼠肝癌细胞体外增殖能力没有明显变化,但体内致瘤性却显著下降,丝裂霉素处理后作为瘤苗接种能抑制其后野生型H_(22)细胞的再次攻击。本研究为制备新型瘤苗打下了基础。     

白介素33基因多态性与脓毒症的关联研究

目的 探讨中国汉族人群中白介素33(IL-33,interleukin-33)基因单核苷酸多态性(SNP,single nucleotide polymorphism)与脓毒症发生风险及疾病严重程度的相关性.方法 采用病例-对照研究设计,通过白介素33基因的连锁不平衡结构选择标签SNP(tagging SNP,tagSNP),应用Sequenom MassARRAY SNP检测技术完成对IL-33基因的标签SNP分型.采用非条件Logistic回归分析,并对性别、年龄、吸烟、饮酒、APACHEⅡ评分和慢性病状态等混杂因素进行校正后,评估IL-33单核苷酸多态性与脓毒症易感性的关系,以及脓毒症继发的严重脓毒症、脓毒症休克、死亡等表型的相关性.结果 在所选的7个IL-33标签SNP (rs10118795 C/T,rs16924159 G/A,rs1891385 A/C,rs2210463 A/G,rs72614079 A/G,rs76864631 G/A,rs7849201 C/T)中,rs76864631不符合HaZy-Weinberg平衡定律,其余6个多态位点及单体型与脓毒症的发生风险和疾病的严重程度均无明显相关性(P＞0.0 125).结论 IL-33基因多态性可能与中国汉族人群脓毒症的发生、发展和病程转归无关.     

大黄NFDA1虫丸对肺纤维化大鼠形成阶段的影响

目的:探索大黄虫丸对肺纤维化形成阶段的干预作用机制。方法:将48只普通级健康wistar大鼠用平阳霉素复制肺纤维化模型大鼠后,分为正常对照组、模型对照组、大黄虫丸组和强的松对照组。大黄虫丸剂量1.2 g.kg-1,从第14 d开始按15 mL.kg-1体重ig,造模28 d后处死,测定、比较各组大鼠血清和支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果:模型组大鼠血清及BALF中SOD活性低于正常对照组、MDA含量高于正常对照组,大黄虫丸组SOD活性均高于模型组,MDA含量均低于模型组;大鼠BALF中SOD活性、MDA含量与血清SOD活性、MDA含量呈正相关。结论:大黄虫丸有抑制模型大鼠肺及血清中SOD活性下降及MDA含量增高的作用;血清SOD活性和MDA含量可间接反映肺部脂质过氧化与抗氧化水平。     

γ—干扰素基因修饰人肿瘤细胞的研究

将人γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）念信号肽ｃＤＮＡ构建入可表达逆转录病毒载体质粒ｐＬＸＳＮ，体外包装成缺陷型逆转录病毒后分别感染人胃癌细胞株ＭＫＮ－４５及人肝癌细胞株ＨＨＣＬ，经筛选后得到ＩＦＮ－γ基因修饰的肿瘤细胞，流式细胞仪分别检测了基因修饰肿瘤细胞的细胞周期及ＨＬＡ－Ｉ，Ⅱ类抗原表达；裸鼠皮下接种观察其致瘤性是否变化；结果发现经ＩＦＮ－γ基因修饰后细胞增殖减慢；ＨＬＡ－Ｉ，Ⅱ类表达都有不同程度的增     

甲状腺功能亢进对妊娠结局的影响

目的探讨妊娠期甲状腺功能亢进对妊娠结局的影响。方法回顾性分析80例妊娠合并甲状腺功能亢进症患者（甲亢组）的临床资料,按照妊娠期治疗是否规范分为治疗组（61例）及未治组（19例）;同时按照1：2比例随机选择160例健康妊娠妇女为对照组。比较三组间分娩情况、母体及围生儿结局等差异。结果甲亢组妊娠高血压疾病发病率10．0％、心力衰竭发生率3．8％、剖宫产率61．4％、早产发生率7．6％、窒息发生率7．6％、甲状腺功能低下发生率3．8％、病死率3．8％,与对照组的1．3％、41．3％、1．3％、0．6％、0、0相比较,差异均有统计学意义（均P〈0．05）,两组新生儿畸形发生率无差异（P〉0．05）;治疗组妊娠高血压疾病、心力衰竭、早产、窒息等发生率分别为3．3％、3．3％、3．3％、0,病死率0,与未治组的31．6％、15．8％、21．1％、15．8％、10．5％相比较,差异均有统计学意义（均P〈0．05）,而两组甲状腺功能低下发生率、刮宫产率、畸形发生率等差异无统计学意义。结论甲状腺功能亢进可增加妊娠并发症的发生率,规范治疗可改善妊娠结局。