固相红细胞凝集试验检测HBsAg

1979年Bradburne 等首创的固相红细胞凝集试验(SPACE),用特异性抗体包被固相载体(V 型孔底),加入待检标本(可含相应抗原)孵育一段时间后,再加相应抗体致敏的红细胞,观察血凝结果.我们借助此原理,建立检测HBsAg 的试验,取得满意效果.一、材料和方法1.抗-HBs 及ELISA 检测HBsAg 药盒:上海医化所.2.冻干HBsAg 诊断血球:北京生研所.     

早期亚低温治疗与护理干预在重型颅脑外伤患者术后昏迷中的应用

目的探讨早期亚低温治疗与护理干预在重症监护室重型颅脑外伤患者术后昏迷中的应用效果。方法选取2016年1月至2017年12月我院重症监护室收治的92例重型颅脑损伤患者(GCS 8分),按照入院顺序将患者等分成研究组和对照组,对照组采用常规护理,研究组在常规护理基础上采用早期亚低温治疗及护理,治疗后6个月,比较两组的GCS评分、治疗期间并发症、预后分级。结果两组患者GCS评分比较,两组均有提高,但研究组明显高于对照组(P 0. 05);治疗期间并发症比较,研究组发生率明显低于对照组(P 0. 05);治疗6个月,预后分级比较,研究组明显优于对照组(P 0. 05)。结论亚低温治疗及护理干预能够降低脑组织的耗氧量,减轻脑水肿,保护脑细胞,促进患者肢体运动、语言等功能恢复,有效控制并发症的发生,减轻患者的伤残率,对患者的脑功能保护与恢复有积极的作用。     

NK细胞的发育分化与功能极化

近十年来,NK细胞的研究有两大重要进展,一是发现NK细胞的受体多样性,二是发现NK细胞的功能多样性[1,2]。NK细胞受体主要由两个基因复合体集中编码,分别是人第19号染色体上的白细胞受体复合体(Leukocyte receptor complex,LRC)和第12号染色体上的NK细胞受体复合体(NK re-     

辐照后基因修饰自然杀伤细胞的特征及对卵巢癌细胞杀伤活性的研究

目的探讨800cGy辐照后人白细胞介素15基因修饰的自然杀伤细胞(NKG-IL15)表面分子特征及其对卵巢癌细胞的杀伤活性。方法收集NKG-IL15细胞,800cGy进行辐照,100cGy/分,流式法检测辐照前后NKG-IL15细胞表型;利用51cr释放法检测辐照前后NKG-IL15细胞对靶细胞的杀伤活性,同时3H掺入法检测照射后细胞的增殖能力。结果 800cGy辐照前后NKG-IL15细胞表型均为CD56强阳性,CD19和CD3为阴性;对卵巢癌HO-8910细胞杀伤结果显示,0、800cGy组杀伤率分别在70.0%～23.7%、69.4%～22.6%之间,杀伤无明显差别;800cGy照射后NKG-IL15细胞24h增殖能力为0。结论 800cGy辐照后的NKG-IL15细胞具有人自然杀伤细胞的特征,无增殖能力,对人卵巢癌细胞HO-8910有较高的杀伤活性,可成为卵巢癌过继性免疫治疗的方法 。     

重组人白细胞介素12的纯化与鉴定

目的探索重组人白细胞介素12(rhIL-12)的纯化与鉴定方法。方法采用Millipore超滤浓缩系统对含rhIL-12的无血清培养上清进行浓缩,用阴离子交换色谱柱,阳离子交换色谱柱和尺寸排阻色谱柱纯化出rhIL-12;并对rhIL-12的纯度、活性及氨基酸序列进行检测。结果纯化后产物经Western blot鉴定(P35、P40)为rhIL-12,毛细管电泳法测得其纯度在98%以上;生物学活性达8.0×106IU/mg,且氨基酸序列与已报道的序列相一致。结论建立了获得高纯度、高生物活性的rhIL-12的纯化与鉴定方法。     

单纯疱疹病毒2型抗原DNA的克隆及在大肠杆菌中的表达

目的：在大肠杆菌中表达重组单纯疱疹病毒2型(HSV-2)抗原。方法：用PCR方法从单纯疱疹病毒中扩增HSV-2DNA片段，约500bp，克隆到pMD18T载体并对克隆的DNA片段进行序列分析。用限制酶EcoRI和BamHI消化pMD18T／HSV-2重组质粒，分离HSV-2片段，并插入质粒表达载体pBV220的相应限制酶位点，酶谱分析鉴定重组表达载体pBV220／HSV-2。转化菌株经42℃诱导，用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达的重组蛋白。结果：PCR扩增的DNA片段与HSV-2的目的片段大小一致。重组质粒pMD18T／HSV-2的DNA序列分析显示克隆的DNA序列与文献报道的HSV-2 DNA序列一致。SDS—PAGE表明重组蛋白相对分子量为18000，表达量达菌体总蛋白的20％左右，Western blot分析显示重组蛋白能特异地与抗HSV-2抗体结合。结论：已成功构建了表达具有功能的重组HSV-2抗原的工程菌株。     

小鼠子宫uNK细胞的分离及其特性研究

目的：建立小鼠子宫淋巴细胞分离方法，并初步观察小鼠子宫uNK细胞的特性。方法：分别用机械法和酶消化法制备单细胞悬液分离小鼠子宫淋巴细胞，用二色或三色荧光标记技术检测子宫uNK细胞的比例及相关特征。结果：机械法分离淋巴细胞技术相对稳定、纯度较高；酶消化法未降低DX5 细胞所占的比例，但酶的消化过程容易使淋巴细胞活化水平升高，表现为活化分子CD69的表达上调。子宫中存在大量的uNK细胞(NK1．1 CD3-或DX5 CD3-细胞)，小鼠怀孕早期和中期，uNK细胞占子宫淋巴细胞的比例随着怀孕天数的增长而增长，到怀孕的第10天达到高峰(uNK细胞比例达到48.74％)，之后比例开始迅速下降。结论：成功建立了小鼠子宫uNK细胞分离方法，子宫uNK细胞作为重要的天然免疫淋巴细胞，可能参与妊娠子宫对半同种异体胚胎的保护性免疫反应。     

肝脏天然免疫系统对HBV感染及肝脏免疫致病的新解释

近期研究表明，肝脏NK细胞、NKT细胞、γδT细胞占肝脏淋巴细胞总数的2／3左右，如此庞大的肝脏天然免疫淋巴细胞在乙型肝炎病毒(HBV)感染及其免疫致病中发挥何种效应，引起了学者们的高度关注。传统理论认为CD4^ T细胞和CD8^ T细胞在抗HBV感染及其引起的免疫损伤中起主导作用，但仅占肝脏淋巴细胞总数1／3的这类T细胞能否承担肝脏抗HBV免疫与损伤的全部职责，值得重新定位。     

结肠癌病人血清中TGF-β1水平的变化

尽管ＴＧＦβ１可以抑制正常上皮细胞的生长,但大量的资料显示ＴＧＦβ１与多种肿瘤的发展有关,ＴＧＦβ１随着肿瘤的发展,转变成肿瘤生长的刺激因子,这种转变可能与ＴＧＦβ１的信号传导途径中断有关,如ＴＧＦβ１的两型受体的编码基因发生了突变或两型受体的表达量下降。不少报道显示结肠癌病人的ＴＧＦβ１表达量和疾病的进展有关,但这些资料不太全面和系统。作者用酶联免疫吸附法比较观察１２１例结肠癌病人和３１名正常人血清ＴＧＦβ１水平的情况。作者按Ｄｕｋｅｓ分级,将病人分成Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ４类,分别抽取…     

CD28／CTLA4：B7在T细胞激活和效应过程中的共刺激作用

抗原特异性Ｔ细胞的激活需要ＴＣＲ－ＣＤ３复合体接受抗原提呈细胞提呈的抗原信息，同时还需多种辅助分子提供的共刺激信号。ＣＤ２８／ＣＴＡＬ４：Ｂ７介导的共刺激信号在ＣＤ４Ｔ细胞激活、ＣＤ８Ｔ细胞杀伤活性的诱导和效应过程中起重要作用。本文综述了ＣＤ２８／ＣＴＬＡ：Ｂ７的分子特性，在Ｔ细胞激活、效应过程中的共刺激作用，ＣＤ２８介导的信号传导途径及在肿瘤免疫、移植免疫研究中的意义。