标本处理方法对PCR检测淋病奈瑟菌的影响

标本处理方法对ＰＣＲ检测淋病奈瑟菌的影响李韶深，朱继明（天津市长征医院检验科，３００００２１）ＰＣＲ技术是一项极敏感的体外由引物介导的特异基因扩增技术［１］，标本中靶ＤＮＡ的存在状态至关重要。因此，临床标本的处理对实验结果影响很大。我们对临床标本处理...     

检测生殖道沙眼衣原体的方法学研究进展

沙眼衣原体（简称Ct）是一种严格细胞内寄生的微生物，临床上可以引起非淋菌性尿道炎，宫颈炎，附睾炎。沙眼衣原体还可以通过母婴传染，引起新生儿结膜炎，肺炎，并可导致胎膜早破，早产，新生儿死亡等。据报道，全球每年有5千万例生殖道沙眼衣原体感染，我国的感染也呈上升趋势，在女性Ct初期感染无症状或症状较轻微，容易被忽视导致严重的合并症，Ct的临床诊断主要依赖实验室的检测，由于各地实验室条件各异，操作者水平不同，现有的检测方法多样，但是，主要有3大类：细胞培养法，免疫学方法，分子生物学方法，每种方法都有各自优势和局限性，现综述如下：     

不同方法提取和处理中华绒螯蟹组织蛋白的过敏原组分分析

目的:分析不同方法提取和处理中华绒螯蟹组织的蛋白组分及过敏原组分,为检测中华绒螯蟹特异性IgE提供最佳抗原制备方法。方法:分别采用PBS提取法、丙酮抽提法和裂解液提取法提取中华绒螯蟹组织蛋白,并用裂解液提取法分别提取加热前、后的蟹蛋白;采用SDS-PAGE和双向电泳分析蛋白组分,采用Western blot分析过敏原组分。结果:不同方法提取的蛋白组分、sIgE与蛋白结合的强度和所识别的蛋白组分存在一定差异。PBS提取液蛋白主要分布在94、85、76、66、18kD,丙酮提取液蛋白主要分布在94、85、76、36 kD,裂解液提取液蛋白主要分布在200、125、51、43、38 kD。PBS提取液与sIgE结合的阳性反应条带主要分布在76、66、53、43、38、18 kD;丙酮提取液主要分布在94、76、66、50、43、38、18 kD;裂解液提取液主要分布在200、105、94、76、43、38、18 kD。加热前、后蟹蛋白过敏原组分差别不大。结论:裂解液提取法提取的中华绒螯蟹过敏原更适于制备测定特异性IgE的抗原。加热不影响蟹过敏原组分和与特异性IgE的结合活性。     

虾有效致敏组分的提取及在sIgE检测中的初步应用*

目的 通过改善虾类包被抗原质量,提高血清sIgE检测的敏感性。方法 制备中华对虾蛋白溶液,经葡聚糖凝胶层析初步分离大于55KD蛋白组分,经SDS-PAGE技术分析其蛋白组成,采用酶免疫印迹和酶联免疫法初步评价纯化后抗原是否能够提高血清sIgE检测结果的敏感性。结果：葡聚糖凝胶层析法可初步分离>55kD的蛋白组分,其中主要包含10条明显蛋白条带;如以纯化后蛋白作为包被抗原,斑点酶免疫印迹显示,可提高弱阳性血清斑点光密度。同时,两种包被抗原的酶联免疫吸附试验结果显示,虾有效致敏成分作为包被抗原时,92.9%的虾过敏患者血清sIgE检测值升高。结论 采用中华对虾有效致敏原组分作为虾过敏检测抗原,有望提高血清sIgE检测结果的敏感性。     

对梭子蟹过敏患者血清特异性IgE抗体针对的过敏原的异质性分析

目的分析梭子蟹过敏患者血清特异性IgE(sIgE)抗体所针对过敏原的异质性。方法提取梭子蟹蛋白质溶液,经酶免疫印迹技术,分析50例梭子蟹过敏患者血清sIgE与梭子蟹蛋白质发生特异性结合的不同区带,并分析个体间的差异。结果针对分子量(Mr)36 000蛋白质的sIgE在患者人群中出现的频率高达80%(40/50),针对Mr 48 000、43 000蛋白质的sIgE分别达62%(31/50)和50%(25/50)。反应条带为3条及3条以上的患者总数占92%(46/50),6条反应条带的患者达30%(15/50)。结论对梭子蟹过敏患者血清中sIgE所针对的过敏原组分存在明显异质性。     

泌尿生殖道病原体检测结果分析

回顾性分析性病门诊就诊的1124例患者生殖道分泌物培养及免疫方法检测数据并进行统计处理。结果发现1124例患者中,检出病原体阳性者766例,阳性率为68.1%,其中淋病111例(9.9%);非淋菌感染644例(57.3%),非淋菌感染以解脲脲原体为主。男女患者病原体感染差异显著,男性以淋病奈瑟菌为主,而女性则以解脲脲原体为主。另外,检出凝固酶阴性的葡萄球菌和霉菌比例也比较高,在临床诊治时应引起高度重视。     

以特异性IgE为探针的鸡蛋过敏原成分分析

目的 分析并确定鸡蛋中引起过敏的主要蛋白成分.方法 制备蛋清、蛋黄的蛋白粗提液,从临床收集鸡蛋过敏患者血清,Western blot分析并确定鸡蛋中的过敏原组分.结果 鸡蛋清中的蛋白条带主要有4条,而其中76×103和15×103附近的2个蛋白条带与血清有阳性反应,蛋黄中蛋白条带较多,与患者血清的反应存在假阳性.结论 蛋清中卵清转铁蛋白和溶菌酶为主要过敏原,蛋黄中有些蛋白组分与人IgE具有相同表位,可能是引起交叉反应的主要原因.     

解脲支原体感染及其与人型支原体混合感染药敏情况分析

在支原体培养及药敏试验时我们发现，解脲支原体(Uu)培养阳性和解脲支原体、人型支原体(Mh)混合感染时药敏试验的结果是有区别的，我们收集了从2003年9月28日～11月6日期间解脲支原体、人型支原体两项为阳性，以及单一解脲支原体阳性病例，对药敏试验的结果做了统计学分析，使用SPS9．0软件采用秩和检验，报道如下。     

128例前列腺液常规镜检与前列腺液细菌培养结果比较

[目的]探讨前列腺炎患者前列腺液直接镜检和前列腺液培养的相关性。[方法]分别计算两种方法阳性例数，并且计算出镜检异常与对应分离出的菌属的百分比，经过统计学r检验，比较两者的相关性。[结果]经比较，两种方法没有相关性。[结论]做前列腺检查时，两种方法的检查应该同时做，以确定是哪一类型的前列腺炎。