痰中结核分枝杆菌DNA提取方法的比较及在LAMP检测中的应用

目的:对5种DNA提取方法进行比对,为选择适用于痰中结核分枝杆菌DNA的提取方法提供依据。方法:采用PureLink genomic DNA kits(PLKm)、苯酚与氯仿法(PCm)、Chelex-100法(Cm)、磷酸盐缓冲液法(PBm)及硅珠法(SBm)5种方法提取痰标本中的DNA,对提取产物的浓度、纯度等技术指标进行分析,并对核酸扩增结果进行统计。结果:DNA浓度均值由高到低依次是PBm、Cm、PCm、SBm、PLKm,组间比较差异有统计学意义,两两比较发现PLKm与PCm、Cm、PBm之间差异有统计学意义,但Cm与SBm间的比较有统计学意义;5种提取方法的OD260:OD280比值均值与1.8的接近程度依次是PLKm、PCm、Cm、PBm、SBm,组间比较差异有统计学意义,两两比较发现除SBm与另外4种方法间存的差异具有统计学意义外,其余各组间的比较均无统计学意义;采用PLKm、PCm及Cm提取的产物均扩增出阳性结果,而PBm、SBm提取产物分别有18例和11例未获得阳性结果,经Mc-Nemar x2检验方法间的差异有统计学意义。结论:Chelex-100提取痰标本中结核分枝杆菌DNA是一种简便、省时、廉价适用于基层结核病实验室进行核酸检测的方法。     

长沙市成人血细胞分析参考值范围的验证和建立

目的验证长沙地区引用WS/T 405-2012行业标准血细胞分析报告指标参考值范围并建立适宜该地区的研究参数的参考值范围。方法按照《临床实验室检验项目参考区间的制定》程序分析3 138例参考人群的血细胞分析结果,并与WS/T405-2012行业标准比较。结果报告参数中WBC、Neu#、Mon%、MCHC、PLT、MPV、PCT、P-LCC、P-LCR、InR‰和研究参数中的WBC-D、PDW-SD在男性和女性间差异不具有统计学意义(P0.050);WBC、Neu#、Mon%、MCHC和PLT等5项性别间无差异,指标较标准中的参考值范围变窄;男性血细胞分析指标中的Neu%、RBC、HGB、MCV和MCH等5项指标参考值范围变窄,Bas%、Lym#、Mon#和HCT等4项指标参考值范围下限升高,Bas%、Lym#、Mon#和HCT等4项指标参考值范围上限升高,Eos#和Eos%指标参考值范围上限减低,Lym%下限减低;女性血细胞分析指标中的Neu%、Lym#、Mon#和RBC指标变窄,Bas#和Bas%下限升高,Eos%、Lym%、HGB、MCV和MCH下限减低,Eos#、Eos%、Lym%、HGB、MCV和MCH上限减低而HCT上限升高。结论长沙地区应该有选择性的引用标准的参考值范围,并根据需要建立适用于该地区或本实验室的参考值范围。     

5种前处理方法对痰中结核分枝杆菌DNA提取的影响

目的 比较5种痰标本前处理方法,选择适用于基层结核病实验室痰中结核分枝杆菌DNA提取的痰标本前处理方法. 方法 分别采用DDT、NaOH、NALC-NaOH、Trypsin、Chymotrypsin等5种方法对所收集标本进行前处理,比较提取DNA模板的浓度、纯度和核酸扩增结果. 结果 经过5种前处理方法处理后,所提取DNA浓度(ng/μl)的最小值依次是27.30、4.10、9.30、18.60和14.80,最大值依次是84.10、40.20、26.10、111.00和159.00,均值依次是(52.84±19.17)、(16.69±12.72)、(14.38±4.57)、(48.65±25.75)和(53.79±46.27);以OD260/OD280的比值衡量DNA纯度,其最小值依次是1.75、1.60、1.64、1.60和1.62,最大值依次是1.86、1.85、1.79、1.88和1.84,均值依次是(1.80±0.29)、(1.66±0.88)、(1.74±0.40)、(1.76±0.86)、(1.73±0.74);16份已知阳性标本采用DDT、NALC-NaOH两种方法处理后扩增结果全部阳性,而采用NaOH、Trypsin、Chyrnotrypsin处理后分别出现了3、8和5份标本阴性. 结论 在基层结核病实验室,对拟进行结核分枝杆菌DNA提取的痰标本应首选二硫代苏糖醇进行前处理,其次选择N-乙酰-L-半胱氨酸-氢氧化钠.     

淋巴肿大敷六神丸

孩子吃了几天的消炎药后,烧退了,炎症也下去了,可颈下的淋巴结依然肿大,该怎么办？用白开水或醋将六神丸溶化调成泥状,外敷在淋巴结肿大的地方,一天两次,一般3—4天就能消肿。 如果孩子皮肤过敏,可用金银花、蒲公英、马齿苋等中草药,任选其一,取十克左右煎成浓汁。用一块医用消毒纱布蘸取浓汁,外敷在孩子肿大的淋巴结上。一天两次,每次外敷一个小时,一般3～4天,肿大的淋巴结就会变小、变软,直到慢慢消失。     

发光二极管荧光显微镜在基层实验室诊断结核分枝杆菌的应用评价

目的 评价发光二极管荧光显微镜(LED)在基层实验室诊断结核分枝杆菌的应用情况. 方法 收集中国卫生部-盖茨基金会结核病防治项目结核病新诊断工具可行性子项目(即发光二极管荧光显微镜应用评估项目)湖南省宁乡县项目点的相关数据,运用回顾性的研究对萋尔-尼尔逊(Z-N)和LED在痰涂片直接镜检结核分枝杆菌阳性检出能力、报告结果的差异及两种方法受痰标本性状的影响等方面进行分析. 结果 初诊病例通过不同的染色和镜检方法阅片,Z-N阳性检出率为21.38％(388/1815),LED阳性检出率为22.42％ (407/1815),LED比Z-N提高1.05％(19/1815);随访患者Z-N、LED及LED比Z-N提高的阳性检出率分别为2.62％ (48/1831)、3.66％ (67/1831)和1.04％(19/1831);Z-N和LED在初诊病例和随访患者两部分人群检查结果差异有统计学意义(x2=1678.990、1214.956,P＜0.001);两种方法在阳性结果分级报告上差异有统计学意义,尤其表现在涂片结果以实际观察到细菌条数进行描述的和阳性等级为4+以上的痰涂片上,但两种镜检方法所评定的阳性分级报告结果一致性尚可(McNemar-Bowker检验,x2=103.145,P＜0.001,kappa=0.777);痰标本性状在一定程度上影响着Z-N和LED两种检查方法在初诊病例涂阳患者的发现,Pearsonx2=56.707、57.549,P＜0.001,但在随访患者中表现出的差异无统计学意义;初诊病例和随访患者留取痰标本的性状差异有统计学意义(Pearson x2=59.614,P＜0.001). 结论 Z-N和LED两种检查方法一致性较好,且LED在一定程度上优于Z-N,在基层肺结核患者的发现和治疗检测上有一定的应用价值.     

HIV-1感染者/AIDS患者T淋巴细胞亚群检测分析

目的探讨HIV-1感染者/AIDS患者外周血T淋巴细胞亚群与性别、年龄、检测时间与确认时间间隔之间的关系,了解该人群的免疫状况。方法采用FACSCalibur流式细胞仪及其配套试剂TriTEST CD4 FITC/CD8PE/CD3PerCP测定369例HIV-1感染者/AIDS患者外周血标本并对结果应用SPSS 18.0统计软件进行统计和分析。结果男性CD3+Abs Cnt和CD3+CD8+Abs Cnt明显高于女性,男性TH/S明显低于女性(P均<0.05);不同年龄组T淋巴细胞亚群检测数据进行方差分析发现CD3+Abs Cnt、CD3+CD4+Abs Cnt和TH/S差异有统计学意义(P=0.000、0.000和0.049);不同检测时间与患者确认时间间隔对T淋巴细胞亚群检测结果的影响差异无统计学意义(P均>0.05);≤20岁年龄组CD4+细胞≥500/mm3(12.7%)和41~50岁年龄组CD4+细胞<200/mm3(28.9%)明显高于其他年龄组。结论 HIV-1感染者/AIDS患者T淋巴细胞亚群检测结果受性别、年龄影响,各年龄组研究对象免疫抑制程度不同。     

三例输入性卵形疟的实验室诊断

目的分析3例输入性疟疾的实验室诊断,减少卵形疟的误诊与漏诊。方法采用形态学检查、巢氏聚合酶链反应(PCR)及序列分析等方法确诊3例输入性疟疾病例。结果 3例患者形态学检查结果分别是未检出疟原虫(实验室初次检查)、检出卵形与恶性疟原虫和检出卵形疟原虫;巢氏PCR检测结果依次是卵形疟原虫感染、卵形与恶性疟原虫混合感染和卵形与间日疟原虫混合感染。结论需加强疟疾消除地区疟原虫形态学检查技术的培训和推广。应用分子生物学检查技术可减少输入性卵形疟的误诊与漏诊。     

嗜酸性粒细胞增高在职业健康检查中的价值

目的了解长沙市职业健康检查人群嗜酸性粒细胞绝对值和百分数增高情况,分析嗜酸性粒细胞绝对值和百分比增高者体检结果异常的分布情况。方法统计分析职业健康体检人员22 135例血细胞分析结果和体检异常表现情况。结果嗜酸性粒细胞绝对值和(或)嗜酸性粒细胞百分数增高者中,大部分存在心电图异常、脂肪肝等变化,小部分为反应性和克隆性增高,同时不明原因嗜酸性粒细胞升高者亦占较大一部分比例。结论建议进行大量试验及临床研究进一步探讨嗜酸性粒细胞增高在职业健康检查中的意义。     

小儿用药剂量的折算

很多药物说明书上所标示的剂量,大多是成人的1次剂量,小儿剂量往往未标示。而小儿用药的安全性十分重要,不同年龄的孩子用药剂量又有所不同。家长为此犯了难,该怎么给孩子吃药呢。有几种方法来解决这个问题。一是按每公斤体重多少(毫克、克、毫升)计算,此法较准确。另一种方法是按成人剂量折算,下表是《中国药典》制定的《老幼剂量计算(折算)表》可供参考。若以成人剂量为1,不同年龄儿童的药物剂量为:初生至1个月1/18至1/41个月至6个月1/14至1/76个月至1岁1/7至1/51岁至2岁1/5至1/42岁至4岁1/4至1/34岁至6岁1/7至2/56岁至9岁2/5至1/29岁至14岁1/2至2/314岁至18岁2/3至全量以上只是一般情况下的基本规律,但由于药品剂型、制剂工艺等的不同,许多药品是不能按以上比例折算服用的,特别是对于儿童这一特殊的人群,由于其智力、身体素质发育还不完全,因此他们的用药更要小心谨慎。如药品中没有儿童用法用量,最好向专业人员请教,或直接购买专为儿童准备的药品。家庭护士小儿用药剂量的折算@文岚     

小儿推拿五经穴之心肝同清加捏脊法治疗夜惊夜啼临床研究

目的：探讨小儿推拿五经穴之心肝同清加捏脊法治疗夜惊夜啼的疗效。方法：选取2019年5月～2020年5月在本院确诊的440例夜惊夜啼患儿,随机将患儿分为4组,每组各110例。a组采用心肝同清推拿法治疗,b组采用捏脊法治疗,c组采用心肝同清联合捏脊法治疗,d组采用腹部热敷治疗,以上各组均以5天1个疗程,共计治疗4个疗程。评估四组患儿的临床疗效,采用改良匹兹堡睡眠质量指数问卷(PSQI)和改良儿童睡眠紊乱量表(SDSC)评估四组患儿治疗前后的睡眠质量,观察四组患儿入睡所需时间、睡眠总时长和夜啼次数,比较四组患儿治疗前后的中医证候积分和治疗期间的不良反应发生率。结果：四组有效率分别为76.36%、78.18%、83.64%、74.55%,差异无统计学意义(P>0.05)。c组治疗后改良PSQI和改良SDSC评分均显著低于a、b、d组(P<0.05)。c组治疗后入睡所需时间显著短于a、b、d组,睡眠总时长显著长于a、b、d组,夜啼次数短于a、b、d组(P<0.05)。c组治疗后中医证候积分显著低于a、b、d组(P<0.05)。四组治疗期间不良反应发生率分别为11.82%、...