免疫组织化学法检测三阴乳腺癌Ki-67抗原的改良方法研究

目的优化免疫组织化学法检测三阴乳腺癌(TNBC)组织中Ki-67抗原实验条件,实现检测技术标准化。方法 20例诊断为TNBC的组织标本,使用标准免疫组织化学检测Ki-67抗原。针对不理想的结果对实验条件进行调整,直至获得最佳结果。使用图像分析软件对阳性染色细胞计数分析。结果通过对脱蜡、孵一抗、分化时间控制等因素的优化,得到更为理想的免疫组织化学结果。阳性细胞数和总细胞数通过软件灰度值分析来获得。最终20例标本均为Ki-67阳性高表达。结论改良的免疫组织化学染色法对TNBC组织中Ki-67抗原检测结果较传统法更加精准、结果更为可靠。     

疏血通脉胶囊治疗脑梗死恢复期效果研究

目的：探讨疏血通脉胶囊治疗脑梗死恢复期的效果进行分析。方法选取脑梗死患者135例，经CT或MRI诊断为脑梗死恢复期。将135例患者随机分为西药组、中药组、观察组，各45例；西药组给予常规治疗方法，中药组在此基础上加用利脑心胶囊进行治疗，观察组在西药组基础上采用疏血通脉胶囊进行治疗，3组均为4周1个疗程。结果西药组、中药组、观察组治疗总有效率分别为53.33%、75.55%、93.34%，观察组治疗总有效率高于中药组和西药组（P＜0.05）；观察组与中药组和西药组治疗后相比，中医证候疗效明显改善，且临床研究过程中未出现不良反应。结论采用疏血通脉胶囊进行脑梗死恢复期治疗安全有效。     

紫癜性肾炎患儿针对性护理及延伸护理的研究

[目的]探讨依据临床监测情况实施针对性护理干预及出院后进行延伸护理措施对紫癜性肾炎患儿的综合护理效果。[方法]选择我院确诊并住院治疗的紫癜性肾炎患儿共120例,随机分为两组。对照组60例实施常规护理,研究组60例根据患儿病情变化实施针对性护理及出院后的延伸护理措施,比较两组患儿的住院时间、并发症情况及护理满意度评分,出院后用药依从性、复查率以及复发再次住院治疗情况。[结果]研究组患儿平均住院时间为(8.72±2.31)d,并发症2例,显著低于对照组;护理满意评分为(96.30±2.72)分,显著高于对照组;出院后研究组患儿用药依从性高(98.3%),复查率100%,均显著高于对照组,具有统计学意义(P0.05);研究组住院平均次数与平均住院时间为(0.89±0.26)次、(6.11±2.36)d,均显著低于对照组,具有统计学意义(P0.05)。[结论]住院期间密切监测患儿病情并实施针对性护理能够有效减少并发症,提高治疗效率,帮助患儿提前出院。出院后对患儿进行延伸护理,可加强患儿及家属对疾病的认知,提高服药依从性及复查率,从而降低疾病的复发及再入院。     

非酒精性脂肪肝与钙稳态关系的研究进展

钙离子（Ca²⁺）是细胞内重要的第二信使,其主要储存在内质网和线粒体中,参与调控细胞多种生理功能及维持内质网、线粒体功能。内质网和线粒体对钙离子的摄取与释放直接影响胞内钙离子水平的变化,继而影响细胞正常生理功能。病理条件下,细胞内钙离子稳态失衡,可引发细胞生理功能异常并进一步影响内质网、线粒体功能。非酒精性脂肪肝（NAFLD）是临床常见病和多发病,其主要病理特征是：肝脏脂肪样变性、内质网应激、线粒体损伤和非特异性炎性反应等。其中持续的内质网应激及线粒体功能障碍是NAFLD发生发展的重要诱因。而细胞内钙稳态的变化可直接导致内质网及线粒体功能异常,继而影响NAFLD的发生发展。本文主要从钙稳态的主要影响因素以及钙稳态变化与NAFLD的关系两方面进行阐述,为寻求和研发防治NAFLD的药物提供新的方向。     

苦参碱抑制Akt信号通路诱导结肠癌SW480细胞凋亡

目的:研究苦参碱对人结肠癌SW480细胞的促凋亡作用及其可能的分子机制。方法:噻唑蓝比色法(MTT)测定苦参碱对SW480细胞株增殖的影响;Hoechst33258染色检测苦参碱对SW480细胞凋亡的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测苦参碱对SW480细胞中总蛋白激酶B(Akt),磷酸化蛋白激酶B(p-Akt),B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达的干预作用。结果:苦参碱(0.25,0.5,1.0,1.5,2.0 g·L~(-1))能浓度和时间依赖性地抑制SW480细胞增殖。作用24,48,72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为1.72,1.08,0.67 g·L~(-1),Hochest33258染色和流式细胞术结果显示苦参碱能显著诱导细胞凋亡(P0.01),随着药物质量浓度的提高,细胞凋亡率逐渐上升。Western blot检测显示,SW480细胞加入苦参碱后,胞内总Akt的含量无显著变化,但p-Akt的生成被显著抑制,凋亡抑制性蛋白Bcl-2表达降低,促凋亡蛋白Bax表达增高(P0.05)。结论:苦参碱能够诱导SW480细胞凋亡,该药理作用可能与苦参碱对Akt信号通路的抑制有关。     

KLF4通过Wnt信号通路抑制甲状腺癌细胞EMT及侵袭迁移的实验研究

目的 探讨Kruppel样因子4(KLF4)对甲状腺癌细胞上皮间质转化(EMT)、侵袭和迁移的影响及机制.方法 免疫组织化学(IHC)检测45份甲状腺癌标本中KLF4的表达情况.常规体外人甲状腺乳头状癌细胞株KTC1培养,将其分为空白对照组(不作任何处理)、阴性对照组(转染LipofectammeTM2000)、KLF4过表达组(转染LipofectamineTM 2000+ KLF4)、siRNA-NC组(转染LipofectamineTM 2000+ NC-siRNA)和KLF4-siRNA组(转染LipofectamineTM 2000+ KLF4-siRNA).免疫荧光检测细胞中KLF4与β-catenin的分布和共表达;Transwell检测癌细胞侵袭和迁移的能力,实时荧光定量PCR (qRT-PCR)和Western blot检测EMT和Wnt信号通路相关的基因和蛋白质表达水平.蛋白质免疫共沉淀(Co-IP)检测KLF4和β-catenin间的互作情况.结果 免疫荧光标记显示,KLF4和β-catenin在KTC1细胞质中共定位.qRT-PCR结果显示,KLF4过表达组上皮型钙黏蛋白(E-cad)mRNA表达明显高于其他组(P＜0.05),神经型钙黏蛋白(N-cad)和基质金属蛋白酶7(MMP7) mRNA表达水平明显低于其他组(P＜0.05);沉默干扰KLF4后,与其他组相比,KLF4-siRNA组中的E-cad mRNA明显降低(P＜0.05),N-cad和MMP7 mRNA明显升高(P＜0.05).Western blot结果显示,KLF4过表达组中E-cad表达较其他组明显升高(P＜0.05),而N-cad、MMP7表达则明显低于其他组(P＜0.05);当沉默干扰KLF4时,上皮标志物减少(P＜0.05),间质标志物增加(P＜0.05).Transwell结果显示,过表达KLF4可以抑制KTC1细胞的迁移和侵袭,干扰沉默KLF4可增强KTC1细胞的迁移和侵袭.Co-IP结果显示,KLF4与β-catenin之间存在相互作用.KLF4在甲状腺癌及癌旁组织中的阳性表达率分别为24.44％ (11/45)和71.11％ (32/45),二者比较差异有统计学意义(x2=19.639,P＜0.001).45份甲状腺癌标本中,伴淋巴结转移18份标本中KLF4表达4份阳性,而不伴淋巴结转移27份标本中,KLF4表达15份阳性,二者比较差异有统计学意义(22.22％ vs.55.56％,x2=4.919,P=0.027).结论 KLF4通过Wnt信号通路调节相关下游靶基因的表达,从而影响了甲状腺癌的侵袭和迁移能力.     

中西药结合治疗座疮65例临床观察

痤疮是青壮年常见疾病之一，我们从2000年5月到2003年5月采用中西药结合治疗痤疮65例，并与53例作对照，现将结果报告如下：     

针灸联合耳穴疗法配合三阶梯止痛药对癌性疼痛影响的临床观察

  目的：观察针灸联合耳穴疗法配合三阶梯止痛药治疗癌性疼痛的临床疗效。  方法：将120例癌性疼痛患者随机分为治疗组与对照组,每组60例。两者均予基础三阶梯止痛药物,治疗组加用针灸联合耳穴疗法,对照组加用假针灸联合假耳穴疗法。两组疗程均为 21日,观察三阶梯止痛药的使用情况与副反应情况,比较疼痛强度视觉模拟评分(VAS)、生存质量评分(ZPS)及自然杀伤细胞(NK)、T细胞(CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺)水平的变化情况。  结果： ①最终完成试验者114例,治疗组58例,对照组56例。②组间治疗后比较,VAS评分差异有统计学意义,治疗组明显低于对照组(P<0.05)。③疗程结束时,治疗组有58.62%的患者有效减用或降阶梯使用止痛药,对照组有17.86%的患者有效减用或降阶梯使用止痛药;组间减药有效率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。④疗程结束时,治疗组34.48%的患者止痛药副反应减少,对照组21.43%的患者止痛药副反应减少;组间减副反应有效率比较,差异有统计学意义,治疗组明显高于对照组(P<0.05)。⑤组间治疗后比较,ZPS评分差异有统计学意义,治疗组明显低于对照组(P<0.05)。⑥组间治疗后比较,CD3⁺、CD4⁺、CD4⁺/ CD8⁺水平差异有统计学意义,治疗组改善程度明显优于对照组(P<0.05)。  结论：针灸联合耳穴疗法配合三阶梯常规止痛药治疗癌性疼痛,可明显减轻癌性疼痛,提高患者的生存质量与细胞免疫功能,还可一定程度减少止痛药的使用及止痛药所致的副反应。