多西环素多克隆抗体的制备及鉴定

目的:采用人工偶联方法构建多西环素完全抗原,制备多克隆抗体。方法:分别采用直接偶联法、甲醛一步法、重氮法+混合酸酐法和重氮法+碳二亚胺法等4种方法将多西环素与牛血清白蛋白(bull serum albumin,BSA)或鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA)分别偶联,构建人工完全抗原。选择最好偶联效果制备的抗原免疫BALB/c小鼠,通过直接ELISA法检测多克隆抗体效价,竞争抑制ELISA法分析其灵敏性及特异性。结果:重氮法+碳二亚胺法偶联的多西环素人工完全抗原效果最好,其与BSA的偶联比为8.37∶1,与OVA的偶联比为4.92∶1。采用该方法偶联的抗原免疫小鼠获得的多克隆抗体效价在1∶8 000以上;该抗体对多西环素的半数抑制浓度(IC50)为98.89~120.32μg/L,与其他四环素类药物的交叉反应性较低。结论:重氮法+碳二亚胺法的偶联效率最高,获得的多西环素多克隆抗体效价较高,特异性和灵敏度均较理想。     

胃癌患者外周血单个核细胞RORγt和IL-17 mRNA水平的检测及临床意义

目的 检测胃癌患者外周血中单个核细胞(PBMC)中转录因子RORγt和细胞因子IL-17的表达水平及血浆IL-17的表达,探讨Th17细胞特异性RORγt及IL-17的变化在胃癌临床监测中的意义.方法 收集43例胃癌患者外周血标本,40例健康志愿者标本;实时荧光定量PCR(QRT-PCR)检测患者PBMC中RORγt和IL-17 mRNA的表达水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆IL-17的表达;采用直线相关检验方法对健康人群和胃癌患者转录因子RORγt和IL-17表达水平进行相关性分析.结果 胃癌患者外周血PBMC的RORγt、IL-17 mRNA表达水平均明显高于健康对照组(P＜0.05),且二者呈现明显正相关(P＜0.01);胃癌转移组与未转移组相比,RORγt和IL-17 mRNA明显升高(P＜0.05),此外,血浆IL-17的表达也明显升高(P＜0.01).结论胃癌患者PBMC中RORγt和IL-17 mRNA表达水平及血浆IL-17明显升高,提示Th17细胞与胃癌的发生发展可能存在着一定的关系.     

刍议科学文献在免疫学多媒体理论教学中的应用

免疫学以研究生物体免疫系统的组织结构、生理病理条件下的免疫应答规律及机制,以及应用免疫学进行诊断与防治,是医学生的重要主干课程之一。因而,学好免疫学对于临床医学生在学习后续临床课程,正确理解掌握人体疾病的发生发展规律     

一种新的细胞因子——白细胞介素—15

白细胞介素１５（ＩＬ－１５）是新发现并克隆的细胞因子，已在酵母菌中表达成功。ＩＬ－１５含１１４个氨基酸，由非淋巴细胞分泌。尽管ＩＬ－１５与ＩＬ－２氨基酸序列上无同源性，但二者蛋白三级结构和功能相似。ＩＬ－１５能引起ＰＨＡ活化的Ｔ细胞、Ｂ细胞、ＮＫ细胞及ＣＴＬＬ细胞的增殖，也能诱导ＬＡＫ细胞。ＩＬ－１５通过与ＩＬ－２Ｒ的β、γ亚单位及另一未知亚单位组成的ＩＬ－１５Ｒ结合而引起靶细胞被激活，实现其免疫     

血管内皮细胞生长因子的研究进展

血管内皮细胞生长因子又称血管通透因子，是近年来发现的一种促血管生长因子。它地下沉生理性血管生成和异常病理性血管形成都有着重要的调节作用本文就近年来对此因子的研究进展作一综述。     

淋巴细胞转基因的基因载体

在转基因技术常用受体细胞中，淋巴细胞因具有来源丰富，取材及回输方便，易体主增，可特异性结合体内特异性抗原位点等优点，而备受关注。其基因转移系统常采用重组的逆转录病毒，腺病毒ＥＢ病毒等。本文仅对此作一综述。     

脂质血管生长因子粗制品对小鼠脾细胞增殖及ConA诱导的IL—2水平？…

建立了脂质血管生长因子（ＬＡＦ）的乳化方法，并研究了乳化的脂质血管生长因子对小鼠脾细胞及ＣｏｎＡ诱导的ＩＬ－２水平的影响，结果显示：ＬＡＦ能明显抑制小鼠脾细胞的增殖用降低ＩＬ－２的产生水平，而对照的皮下脂肪抽提物则无此效应，同时发现，乳化过程中加入的Ｔｗｅｅｎ－８０有一定的细胞毒性。     

细菌菌落标本的制备

细菌菌落标本的制备黄锡全，李良菊，夏圣（镇江医学院微生物学和免疫学教研室，２１２００１）每种细菌有它一定的菌落形态，对识别和鉴定细菌有一定的帮助。为了让学生掌握菌落特点，常用的方法是观察平板上新培养的菌落，但必须新鲜培养。我们采用漂浮法及挖取琼脂法，...     

TIL细胞对不同肿瘤细胞的细胞毒活性研究

B7分子是提供协同刺激信号的重要分子，包括B7－1（CD80）、B7－2（CD86），其相应配体为CD28、CTLA－4。B7－1分子与CD28结合后能诱导协同刺激信号的产生，癌性胸水来源的淋巴细胞体外用重组人IL-2（rhIL－2）激活后，对肿瘤细胞也具有较强的细胞毒性；也被认为是一类TIL。本文观察了B7分子在TIL细胞的细胞毒中的作用，发现B7－1基因转化MDA-453肿瘤细胞后，能增强TIL细胞对此转化肿瘤细胞的细胞毒活性。     

逆转录病毒载体PLIL-2SN转导人CD3AK细胞方法的建立

目的 :探讨CD3AK细胞在基因治疗中的应用 ,并对逆转录病毒载体转导CD3AK细胞IL 2基因的方法进行研究。方法 :利用逆转录病毒载体PLIL 2SN向人CD3AK细胞中导入IL 2基因。结果 :从转导细胞中RT PCR扩增出 347bpNeoR 基因特异性片段 ,并测出培养上清液中IL 2浓度为 3 .2 76 μg·L-1。结论 :转导的IL 2基因得到表达 ,转导成功。这有助于进一步研究转导后淋巴细胞的功能 ,以开展基因免疫治疗的研究