慢性丙型肝炎肝纤维化无创性诊断模型的建立

目的建立由血清学指标组成的慢性丙型肝炎(丙肝)肝纤维化无创性综合诊断模型。方法收集慢性丙肝肝纤维化患者91例,随机分成模型组(68例)和验证组(23例),对年龄、性别以及27项血清学参数行单因素方差分析和多因素Logistic回归分析,筛选出独立预测因子并构建指数模型(FMIC模型),采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)评估模型的诊断能力。同时将FIMC模型与其他模型进行比较。结果建立了一个由血小板(PLT)、总胆红素(T-Bil)和透明质酸(HA)3项指标构成的判别丙肝肝纤维化程度的诊断模型FMIC。肝纤维化S2、S3、S4分期的cut off值分别为3.1、4.7、8.9,其ROC曲线下面积(AUC~(ROC))分别为0.900、0.943、0.860;FMIC模型联合指标的AUC~(ROC)明显高于单独使用PLT、T-Bil、HA指标(AUC~(FMIC)=0.905,AUC~(PLT)=0.611,AUC~(T-Bil)=0.805,AUC~(HA)=0.789);FIMC模型的诊断效率高于其他模型(AUC~(FMIC)=0.943,AUC~(Forns index)=0.629,AUC~(APRI)=0.446,AUC~(CDS)=0.682,AUC~(API)=0.582,AUC~(AAR)=0.405)。结论建立的丙肝肝纤维化程度的诊断模型FMIC,提高了诊断效率,避免了不必要的肝脏活检。     

人感染高致病性H5N6禽流感病毒的分子生物学特征

目的分析2014-2015年3例新型人感染高致病性禽流感(HPAI)H5N6毒株的血凝素(HA)与神经氨酸酶(NA)基因序列,探讨该病毒的遗传变异及分子生物学特征。方法收集Gen Bank、全球共享禽流感数据倡议组织(GISAID)及浙江大学传染病诊治国家重点实验室提供的H5N6病毒基因序列,利用生物信息软件MEGA6.0及Net Nglyc服务器对基因序列进行遗传进化和分子变异特征分析。结果 3例感染HPAI-H5N6患者毒株的HA与NA氨基酸序列的同源性分别为96.5%~98.7%和90.1%~98.2%;HA氨基酸序列比对分析发现A/Guangzhou/39715/2014(H5N6)和A/Sichuan/26221/2014(H5N6)与A/duck/Eastern China/1111/2011(H5N2)同源性最近,分别为97.7%和98.5%;A/Yunnan/0127/2015(H5N6)与A/muscovy duck/Vietnam/LBM631/2014(H5N1)同源性最近(97.2%);NA氨基酸序列比对分析发现A/Guangzhou/39715/2014(H5N6)和A/Yunnan/0127/2015(H5N6)与A/swine/Guangdong/K6/2010(H6N6)同源性最近,分别为97.2%和97.6%,A/Sichuan/26221/2014(H5N6)与A/duck/Guangdong/S3073/2010(H6N6)同源性最近(97.4%);进化树分析显示3例患者毒株处于2个不同的分支;HA基因包含有S137A、T160A等突变,糖基化分析显示有6~7个N-糖基化位点。结论新型人感染HPAI-H5N6病毒是一种重组病毒,其HA基因来源于亚洲禽类H5亚型,NA基因来源于亚洲禽类H6N6;HA基因位点突变及N-糖基化改变可能有助于增强对人类的感染。     

长链非编码RNA在急性髓细胞白血病中的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)可以从表观遗传学层面实现对基因表达的调控,从而影响正常细胞或疾病细胞的发育或发展。新近的研究表明,许多lncRNA在恶性血液系统疾病中可出现特异性地表达失调,与急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)的发生和发展密切相关。lncRNA不仅可作为AML诊断和预后的标志物,还可作为AML治疗的新靶标。本文就近年来lncRNA在AML中的研究进展作一综述。     

生物学变异推导出的质量规范在肿瘤标志物检测指标质量评价中的应用

目的探讨由生物学变异推导出的允许总误差(TEa)和允许不精密度(CV)质量规范在肿瘤标志物室间质量评价(EQA)和室内质量控制(IQC)中的应用。方法收集肿瘤标志物EQA数据,同时要求各实验室上报当月IQC的CV。以基于生物学变异推导出的和EQA计划的TEa及允许CV作为质量规范,并用Excel 2010软件对EQA和IQC数据进行分析。结果EQA结果显示,所有检验指标均有80%以上的实验室能达到基于当前技术水平的TEa质量规范控制限;AFP、CEA、CA125、CA153、CA199和总PSA指标有80%以上的实验室能达到最佳的TEa质量规范评价限;铁蛋白均能达到最低的TEa质量规范评价限;β2-微球蛋白只有70%以上实验室能达到最低的评价限。IQC结果显示,所有检验指标均有80%以上实验室能达到1/3 TEa的允许CV质量要求,60%以上实验室能达到1/4 TEa的允许CV质量要求;CA125、总PSA检测指标有80%以上的实验室能达到适当的允许CV质量要求;AFP、CEA、CA199、铁蛋白检测指标有80%以上的实验室能达到最低的允许CV质量要求;而CA153和β_2-微球蛋白检测指标无法满足最低的允许CV质量要求。结论以生物学变异推导出的质量规范作为肿瘤标志物的EQA和IQC评判标准能全面客观地了解各实验室的检测质量水平,为肿瘤标志物检验指标的互认提供依据。     

2例颅内生殖细胞瘤的脑脊液细胞学诊断

<正>颅内生殖细胞肿瘤的确诊主要依靠患者的临床表现、影像学、脑脊液检查和放疗反应等~([1])。研究表明,脑脊液细胞学对脑生殖细胞瘤的诊断具有重要意义~([2]),但相关报道较少。为探讨颅内生殖细胞瘤患者脑脊液细胞学表现,并为细胞学诊断提供参考,本研究对2例明确诊断为脑内生殖细胞瘤患者的脑脊液细胞学结果进行分析,报告如下。     

间质干细胞通过调控miR-92b修复顺铂诱导的急性肾损伤

目的探讨骨髓间质干细胞(BM-MSCs)修复顺铂诱导的急性肾损伤的分子机制。方法以6 mg/kg顺铂的剂量经腹腔注射大鼠体内,24 h后经尾静脉输注BM-MSCs(BM-MSCs组)或PBS(PBS组),以未注射顺铂者作为正常对照组;HE染色及免疫组织化学染色法检测BM-MSCs对肾损伤的修复情况;体外培养NRK-52E细胞并经顺铂作用6 h后,继续培养48 h(顺铂组)或与BM-MSCs共培养48 h(细胞组),未用顺铂处理的NRK-52E细胞作为对照组;qRT-PCR检测其miR-92b及其靶基因PTEN的表达水平,western blot检测其p-Akt蛋白的表达水平。结果 HE染色结果显示,BM-MSCs组的肾小管蛋白质管型明显少于PBS组,肾小管结构明显改善;免疫组织化学染色结果表明,BM-MSCs组的增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞数[(131.0±14.4)个]明显高于PBS组[(42.2±6.1)个],差异有统计学意义(t=11.28,P0.01);qRT-PCR结果表明,体内试验中,与正常对照组miR-92b和PTEN基因的表达水平(1.11±0.78,1.01±0.21)相比,PBS组分别为4.64±1.06和0.61±0.2,差异有统计学意义(P0.05),BM-MSCs组分别为2.27±0.81和1.1±0.1,差异亦有统计学意义(P均0.05);体外实验中,与阴性对照组miR-92b和PTEN基因的表达水平(1.12±0.77,1.02±0.13)相比,顺铂组分别为7.64±0.72和0.58±0.2,差异有统计学意义(P均0.05),细胞组分别为4.38±0.50和1.15±0.23,差异亦有统计学意义(P均0.05);western blot检测结果显示,与顺铂组p-Akt蛋白的表达水平(0.96±0.18)相比,细胞组p-Akt蛋白表达水平为2.11±0.11,差异有统计学意义(P0.01)。结论 BM-MSCs能够修复顺铂诱导的急性肾损伤,可能通过下调miR-92b发挥作用。     

大鼠原代脑微血管内皮细胞氧糖剥夺/复氧模型中内参基因的选择

目的筛选大鼠原代脑微血管内皮细胞氧糖剥夺/复氧(OGD/R)模型中合适的内参基因。方法实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测3种常用管家基因:3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)、β-肌动蛋白(ACTB)、核糖体蛋白L13A(RPL13A)在大鼠原代脑微血管内皮细胞中的表达水平;并采用Ge Norm程序分析得到最稳定的内参基因。结果 RPL13A、GAPDH、ACTB基因表达稳定度的平均值(M值)分别为0.590、0.570、0.397。结论在大鼠原代脑微血管内皮细胞OGD/R模型中表达最不稳定的内参基因是RPL13A,最稳定内参基因是ACTB。     

国际参考实验室能力验证样品的均匀性评价

目的评价国际参考实验室能力验证样品(RELA-A/B)的均匀性是否满足参考实验室比对的要求。方法参照CNASGL03《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》,用Roche Modular P800生化分析仪测量2014至2016年连续3年RELA-A/B的14个项目,即丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、L-γ-谷氨酰基转移酶(GGT)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、总蛋白(TP)、总胆红素(T-Bil)、尿素(Urea)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、葡萄糖(Glu)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)。计算测量结果均值()、标准差(s)和变异系数(CV),用单因素方差分析和SS≤0.3σ准则分析评价其瓶间差异。结果 RELA 2014A和2014B样品AST测量结果 CV2.0%。除RELA 2016B样品CK测量结果 CV2.0%外,其他样品CK测量结果 CV均2%。单因素方差分析结果显示,所有样品中CK测量结果 F均临界值4.39,差异有统计学意义(P0.05);2015B样品ALT和T-Bil,2014A样品Cr测量结果 F均临界值4.39,差异有统计学意义(P0.05);其他测量结果 F均临界值4.39,差异无统计学意义(P0.05)。S_S≤0.3σ准则分析结果显示,所有样品CK测量结果 S_S0.3σ,CK测量结果存在瓶间差异;其他项目测量结果 S_S均≤0.3σ,其他项目测量结果无瓶间差异。结论国际参考实验室能力验证样品CK项目存在瓶间差异,值得注意;其他项目均匀性能满足参考实验室能力验证要求。     

新生儿遗传代谢病筛查数据实验室间比对和监测平台的应用

目的用新生儿遗传代谢病筛查数据比对和监测平台分析新生儿疾病筛查实验室数据,用实验室数据进行质量控制并实现筛查数据的实验室间比对。方法用开发的新生儿筛查数据比对和监测平台收集全国45家新生儿遗传代谢病筛查实验室2016年6月苯丙氨酸(Phe)和促甲状腺激素(TSH)每日检验结果的中位数并进行统计分析。结果大多数实验室使用Perkin Elmer检测系统。Phe筛查数据中位数分布在0.17~1.21 mg/d L,TSH筛查数据中位数分布在0.90~4.56μIU/m L。Phe中位数百分差值满足1/2TEa(允许总误差)要求的实验室比例在97.8%以上,TSH约有1/3的实验室可以满足1/2TEa要求。结论新生儿遗传代谢病筛查数据比对和监测平台是新生儿筛查质量管理的有益补充,能帮助实验室使用筛查数据进行质量控制,同时实现筛查数据的实验室间比对,为检验结果互认提供参考。     

肝硬化患者继发急性肾损伤的实验室评价

目的探讨中性粒细胞相关载脂蛋白(NGAL)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)和肌酐(Cr)检测在肝硬化患者继发急性肾损伤(AKI)中的应用价值。方法选取2015年1月至2016年8月绵阳市中心医院符合入选标准的肝硬化继发AKI患者207例(AKI组)、单纯肝硬化患者260例(LC组)和健康者106例(HC组),统计分析3组及不同分期AKI患者血清NGAL(sNGAL)、尿NGAL(uNGAL)、血清CysC和血清Cr(sCr)及其估算肾小球滤过率(eGFR:CysC-eGFR/c-aGFR)水平的差异性和相关性,并评估其对肝硬化继发AKI的诊断性能。结果 AKI组sNGAL、uNGAL、CysC和sCr水平高于LC组和HC组(P0.01),CysC-eGFR和c-aGFR则相反,低于LC组和HC组(P0.01)。随着AKI分期递增,患者sNGAL、uNGAL、CysC和sCr水平逐渐升高(P0.01),c-aGFR和CysC-eGFR水平逐渐降低(P0.01)。相关分析显示,sNGAL、uNGAL和CysC水平与sCr(r=0.662、0.672、0.726,P0.01)呈正相关,与c-aGFR(r=-0.639、-0.661、-0.732,P0.01)呈负相关;CysC-eGFR则反之,与sCr(r=-0.711,P0.01)呈负相关,与c-aGFR(r=0.736,P0.01)呈正相关。ROC曲线分析显示曲线下面积(AUC)以uNGAL最大(0.995),均显著高于sNGAL、sCr、CysC、c-aGFR和CysC-eGFR(P均0.01);sNGAL的AUC次之,但仅高于c-aGFR和CysC-eGFR(P均0.05),与sCr和CysC(P均0.05)的AUC差异无统计学意义。uNGAL和sNGAL对肝硬化继发AKI的诊断有效性分别为0.962和0.920。结论对诊断肝硬化患者发生AKI,NGAL可能优于sCr和CysC,检测uNGAL比sNGAL能提高诊断性能。