金刚丸对骨质疏松大鼠骨代谢和血清骨钙素的影响

目的 探讨金刚丸对骨质疏松大鼠骨代谢和血清骨钙素的影响.方法 将60只SPF级大鼠随机分为正常对照组、模型组及高、中、低剂量组和己烯雌酚组,每组10只.高、中、低剂量金刚丸组每天分别以3.24、1.62、0.81 g/kg的剂量灌胃1次;己烯雌酚组大鼠每天给予1.0 mg/kg灌胃1次;正常对照组及模型组给予等体积的生...     

阳离子化牛血清白蛋白诱导膜性肾病模型大鼠足细胞相关蛋白的表达

BACKGROUND: Establishing the animal model of membranous nephropathy is of importance to figure out the pathogenesis of membranous nephropathy.     

MT01/PEN复合物对人成骨样细胞MG63表达骨保护蛋白和核因子κB受体活化因子配体的影响

目的 应用聚乙烯亚胺阳离子聚合物（PEN）载体装载寡脱氧核苷酸MT01,制备MT01/PEN复合物,检测该复合物对人成骨样细胞MG63表达骨保护蛋白（OPG）和核因子κB受体活化因子配体（RANKL）的影响。方法 制备3种不同配比的MT01/PEN（质量比分别为1∶2、1∶4、1∶6）复合物,以全硫代化修饰MT01（MT01-s）和未修饰的MT01作阳性对照,分别转染MG63细胞。采用酶联免疫吸附测定法和real-time聚合酶链反应法分别检测培养24、48、72 h时各组上清液及细胞内OPG和RANKL的表达水平。结果 经MT01/PEN复合物转染后,上清液及细胞内OPG表达水平均升高（P<0.05）;多数组中RANKL表达水平降低,而OPG/RANKL比值呈升高趋势（P<0.05）;不同质量配比的MT01/PEN均对MG63细胞的成骨具有影响,其中质量比为1∶6时作用最明显。结论 应用PEN作为基因载体装载MT01可增强MT01对MG63细胞的促成骨作用。     

瞬时受体电位通道与神经系统疾病的研究进展

瞬时受体电位通道(TRP)是位于细胞膜上的一类重要的非选择性阳离子通道超家族,在人体神经系统、免疫系统、肾脏、肺、脾脏、平滑肌中均有表达。其中TRPC通道在哺乳动物的中枢神经系统中有很高的表达,TRPC可导致细胞内钙、镁等阳离子浓度的变化,可能参与了多种神经系统疾病的发生发展过程。     

去铁酮与人有机阳离子转运体及有机阴离子转运体1体外相互作用研究

目的：建立细胞裂解液中去铁酮测定的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）方法,体外考察去铁酮与人有机阳离子转运体（hOCTs）及有机阴离子转运体1（hOAT1）的相互作用。方法：以Agilent Eclipse Plus C18柱（2.1 mm×50 mm, 3.5 μm）为分析柱;0.1%甲酸-水（v/v）和0.1%甲酸-乙腈（v/v）为流动相,梯度洗脱;应用电喷雾离子源（ESI源）、多反应监测（MRM）模式进行检测;应用稳定表达hOCTs及hOAT1的细胞模型（MDCK-hOCTs和MDCK-hOAT1）考察去铁酮对经典底物在细胞内积聚的影响;比较去铁酮在转空载体的mock细胞及MDCK-hOCTs中积聚的差异,以及经典抑制剂对其积聚的影响。结果：去铁酮在5~300 nmol/L的浓度范围内线性关系良好;准确度大于94%,日内相对标准偏差小于2%。300 μmol/L去铁酮使hOCTs经典底物MPP⁺在MDCK-hOCTs的积聚降低至阴性对照的70.4%~87.1%;去铁酮在MDCK-hOCTs细胞和mock细胞中的积聚无明显差别,且经典抑制剂对去铁酮的积聚无明显抑制作用;100 μmol/L去铁酮对hOAT1经典底物6-CF在MDCK-hOAT1细胞中的积聚无显著影响。结论：本实验建立的方法适用于细胞裂解液中去铁酮的定量分析;去铁酮对hOCT1和hOCT3有一定的抑制作用,对hOCT2和hOAT1则无明显抑制作用;hOCTs在去铁酮跨膜转运中不起主导作用。     

巨噬细胞钙敏感受体通过TRPC6/Ca2+信号促进炎症反应

目的 观察钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)对RAW264.7细胞炎症反应的影响,并探讨其分子机制.方法 采用Fura-2荧光探针对RAW264.7细胞质中Ca2+进行荧光染色,使用单细胞荧光钙离子检测仪检测CaSR对巨噬细胞内Ca2+信号的影响;采用脂多糖(lipopolysac...     

福莫特罗对过敏性哮喘大鼠嗜酸性粒细胞炎症的作用

目的：研究福莫特罗对过敏性哮喘大鼠嗜酸性粒细胞（eosinophil,EOS）炎症的作用以及影响肺组织内嗜酸性粒细胞浸润的机制。方法：48只雄性wister大鼠随机分为6组：正常对照组（A）、哮喘模型组（B）、小剂量（0．08mg·kg^-1）福莫特罗组（C）、中剂量（0．12mg·kg^-1）福莫特罗组（D）、大剂量（0．16mg·kg^-1）福莫特罗组（E）、地塞米松（0．5mg·kg^-1）组（F）,每组8只。卵蛋白致敏诱发建立哮喘大鼠模型,福莫特罗口服,地塞米松腹腔注射给药7d。常规HE染色观察病理变化;原住凋亡法（TUNEL）检测细胞凋亡指数;酶联免疫吸附法测肺组织匀浆中嗜酸性粒细胞趋化活化因子（eotaxin）及嗜酸性粒细胞阳离子蛋白（eosinophil cationic protein,ECP）的含量。结果：（1）A组气道炎症无明显变化;B组炎症变化明显,大量EOS浸润,与A差异显著（P〈0．01）;随着福莫特罗治疗量的增大炎症逐渐减轻,浸润EOS数量明显减少（P〈0．01）。（2）B组凋亡指数下降,与A组有显著差异（P〈0．01）;D、E组凋亡指数较B组显著下降（P〈0．05）。（3）B组eotaxin较A组显著升高（P〈0．01）;各用药组显著下降（P〈0．05）。各用药组eotaxin与EOS数量呈正相关。（4）B组ECP含量较A组显著升高（P〈0．01）;各用药组均显著低于13组（P〈0．01）。结论：（1）哮喘大鼠气道中嗜酸性粒细胞增多。（2）在体内福莫特罗能够抑制嗜酸性粒细胞凋亡。（3）福莫特罗能够明显降低气道中EOS数量,与抑制EOS趋化有关。（4）福莫特罗可能通过减少肺组织内eotaxin的表达来抑制EOS趋化。（5）福莫特罗能够抑制EOS活化,减少肺组织中的ECP含量。     

阻断TRPC6通道对人子宫内膜癌细胞和裸鼠移植瘤放射敏感性的影响

目的:探讨阻断瞬时受体电位阳离子通道6(TRPC6)对子宫内膜癌细胞和裸鼠移植瘤放射敏感性的影响。方法:选用高表达TRPC6的子宫内膜癌细胞株HEC-1A,用阻断剂SKF96365阻断子宫内膜癌细胞中TRPC6表达,流式细胞仪检测细胞周期。将HEC-1A细胞分为4组:对照组、单纯SKF96365组、单纯照射组和SKF96365+照射组(10μmol/L SKF96365+放射),计算细胞克隆数,判断细胞的增殖能力和放射增敏率。将32只雌性裸鼠随机分为4组,每组8只,分别为单纯SKF96365组、单纯照射组、SKF96365+照射组和对照组,右腹皮下注射5×10~6个细胞,每周测量裸鼠皮下肿瘤体积,接种12周后处死小鼠,测肿瘤的重量和体积,计算肿瘤生长延迟时间(TGD)和放射增敏因子。结果:SKF96365处理后,子宫内膜癌HEC-1A细胞中G_2/M期细胞百分比明显增加,G_0/G_1期百分比减少。SKF96365+照射组的细胞克隆数最低。裸鼠的实验结果与细胞实验结果相似,SKF96365+照射组裸鼠的皮下移植瘤体积和重量最小。结论:阻断TRPC6通道对子宫内膜癌HEC-1A细胞和裸鼠的肿瘤均有明显的放射增敏作用。TRPC6通道可作为子宫内膜癌放射增敏的调控点,可能成为子宫内膜癌治疗的新靶点。     

阳离子聚合物介导的基因治疗细胞内途径和主要屏障研究进展

阳离子聚合物作为一种非病毒基因载体,携带目的基因形成聚合复合物,在达到靶器官或靶细胞之前要克服使复合物解离、DNA降解或被清除的各种胞外屏障,到达靶细胞后还要克服胞膜、内涵体/溶酶体、胞浆和核膜等胞内屏障,才能成功转染靶细胞并最终发挥治疗作用。本文对阳离子聚合物介导的基因治疗的细胞内途径、胞内胞外屏障及阳离子聚合物的设计展望等进行综述。     

米托蒽醌隐形阳离子脂质体的制备及体内外抗肿瘤活性

目的:制备米托蒽醌隐形阳离子脂质体(YM),并研究其制剂学性质及体内外抗肿瘤作用。方法:膜材料中引入2-二油酰基羟丙基-3-N,N,N-三甲铵氯(DOTAP)和聚乙二醇2000-二硬脂酰磷脂乙醇胺(DSPE-PEG₂₀₀₀)分别作为阳性和隐形膜材,采用硫酸铵梯度法制备YM,并以泄漏率为指标,考察其稳定性;高内涵扫描仪考察2 h时其在B16F10细胞中的摄取情况;MTT 法测定其对B16F10细胞的增殖影响;B16F10皮下移植瘤模型研究其体内抗肿瘤作用。结果:YM的粒径和Zeta电位分别为(118.2±4.6)nm和(31.6±4.9)mV;载药量和包封率分别为(6.5±0.2)%和(96.2±1.8)%;血清中48 h累积泄漏率<30%,稳定性良好;YM的细胞摄取量是普通长循环脂质体(CM)的10倍,IC₅₀与CM相比显著降低(P<0.05),体内抑瘤率为58.8%,显著高于CM组的42.7%。结论:YM稳定性良好,具有较好的体内外抗肿瘤活性。