红外热像图对颈心综合征阻滞疗法的疗效评价

目的 观察星状神经节阻滞治疗颈心综合征的疗效及探讨红外热像图的诊断价值。方法 66例颈心综合征患者分为观察组（36例）和对照组（30例），对照组用常规局部注射和物理治疗，观察组加用星状神经节阻滞，并于治疗前、后用红外热像仪检测2组患者测温点的变化。结果 2组患者在治疗2个疗程后，观察组中有30例患者的症状明显改善，对照组有17例患者症状明显改善，2组疗效比较，差异有统计学意义（P〈0．05），红外热像图显示除颈点外，其余各点2组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论 星状神经节阻滞对颈心综合征有治疗作用，红外热像图作为颈心综合征的疗效评定方法之一，具有较高的临床实用价值。     

脂质体介导基因转染人精子膜蛋白PH20DNA疫苗质粒向小鼠骨骼肌导入

目的:精子膜蛋白PH-20分布在精子表面,在受精过程中起重要作用,可作为免疫避孕候选疫苗.采用脂质体介导基因转染法将pcDNA3.1( )-hPH20DNA疫苗质粒导入小鼠骨骼肌中,检测目的基因hPH-20在体内的表达水平.方法:实验于2006-06/2007-02在郑州大学解剖学实验室完成.①清洁级健康BALB/C小鼠12只,随机数字表法分为重组质粒组、空载体组、生理盐水组,4只,组,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准.已构建好的pcDNA3.1( )-hPH20重组质粒由本室保存.②实验方法:质粒提取后,用精胺盐酸去除内毒素,鲎试剂榆测晕阳性代表去除成功.取少量质粒行琼脂糖电泳鉴定纯度,用紫外分光光度计测量质粒DNA的含量.每只小鼠于股四头肌分点注射利多卡因预处理3 d.重组质粒组将脂质体包裹的peDNA3.1( )-hPH20 DNA缓慢注射于股四头肌内,200μg/只.空载体组单纯将pcDNA3.1( )缓慢注射到股四头肌内,200 μ g/只.生理盐水组于相同部位缓慢注射等鼍生理盐水.重组质粒组分别于注射后第4,7,11,16天以断颈法各处死1只小鼠,空载体组、生理盐水组小鼠均于注射后第11天同法处死.迅速取股内侧肌肉30mg,研磨成粉末状,RT-PCR法检测目的基因hPH-20 mRNA在体内的表达.结果:①提取质粒琼脂糖凝胶电泳检测结果:提取的质粒成功去除内毒素后,琼脂糖凝胶电泳显示质粒纯度较高,绝大部分处于超螺旋状态,有利于体内转基因的表达.紫外分光光度计测量质粒DNA的含量(A 260/A280)为1.8～2.0.②目的基因hPH-20mRNA体内表达RT-PCR检测:重组质粒组注射后第4天即可检测到1530 bp特异性条带,第7天表达增强,第11天达到高峰,第16天表达下降.空载体组、生理盐水组各时间点均未见特异性条带.结论:脂质体介导基因转染法能够高效将peDNA3.1( )-hPH20 DNA疫苗质粒导入小鼠骨骼肌中,且hPH-20基因于注射后11 d呈峰值表达.     

四黄散外敷联合光子照射治疗发疱型化疗药物外渗

化疗药物刺激性大，毒性强，特别是发疱型药物可引起血管内膜缺血、缺氧导致血管损伤，外渗后可引起严重的持续组织损伤坏死，影响化疗方案实施。因我市地处海岛，病人大多居住在各小岛，因交通不便、经济因素和医疗安全等因素，能接受深静脉置管和PICC者少，四肢外周静脉仍是肿瘤病人化疗的主要途径，但由于血管条件、药物毒性等原因，发生渗漏损伤的可能性较大，国内报道为4．65％。临床常用的处理方法是采用局部多点注射解毒剂，但对发疱型化疗药物外渗治疗效果不佳。2004年9月-2007年10月采用四黄散外敷联合光子照射治疗发疱型化疗药物外渗19例，取得满意效果。现报告如下。     

康复训练对脑梗死大鼠梗死灶周围脑源性神经营养因子表达的影响

目的：研究康复训练对脑梗死大鼠梗死灶周围脑源性营养生长因子(brain—derived neurotrophic factor,BDNF)表达的影响，为康复训练改善脑梗死患者神经功能的机制提供理论依据。方法：40只Wistar大鼠采用Longa颈外动脉线栓法制备大脑中动脉闭塞模型，随机分为康复组、造模对照组，康复组每天进行1h滚筒、平衡木、转棒及网屏训练，造模对照组不予以康复训练。每组随机分为3，7，14，21d4个时间点，每个时间点各5只大鼠，分别于相应天数取脑，采用免疫组织化学方法观察每个时间点脑梗死灶周围BDNF的表达。结果：脑梗死后3，7，14d康复训练组大鼠脑梗死灶周围BDNF表达分别为(43．00&;#177;3．85)，(64．29&;#177;4．34)，(40．40&;#177;1．50)个／视野．较造模对照组[(22．10&;#177;2．60)，(30．80&;#177;1．65)，(20．99&;#177;1．83)个／视野]明显增加，其差异具有显著性意义(P&;lt;0．05)，且脑梗死后3d梗死灶周围BDNF表达即已增加，7d达到高峰，14d有所回落，至第21天康复训练组[(33．10&;#177;3．06)个／视野]与造模对照组[(31．40&;#177;1．38)个／视野]之间已无明显差异。结论：康复训练可诱导脑梗死灶周围BDNF的表达，通过其稳定细胞内环境以及促进树突中的某种蛋白合成，引起突触重塑等方面的作用，从而推动脑梗死后神经功能的恢复。     

飞点扫描式LASIK术后角膜地形图临床观察

准分子激光角膜原位磨镶术(LASIK)用于治疗近视 ,特别是中高度近视 ,疗效确切 ,是近年来矫正近视较为理想的一种手术方式 ,已广泛应用于临床[1]。临床使用的准分子激光器 ,较为常见的扫描方式有宽光束型及裂隙扫描型 ,至2000年底 ,由于波前像差技术的介入 ,临床开始使用<1mm的小光斑、飞点扫描式的准分子激光器。作者用飞点扫描式激光器行LASIK术后 ,计算机辅助的角膜地形图仪的角膜形态进行分析 ,并统计模拟角膜计度数的差值(SimK的最大屈光力与其垂直90度经线上的屈光力的差值) ,评估飞点扫描式准分子激光器LASIK术后角膜形态改变…     

脓毒症小鼠多器官髓样细胞触发受体1基因的表达及其意义

目的 探讨脓毒症时小鼠肺、肝、肾及小肠组织髓样细胞触发受体1(TREM1)表达的改变及其意义.方法 雄性昆明小鼠60只,随机分为对照组(10只)、假手术组(10只)、盲肠结扎穿孔(CLP)组(40只), CLP法制备脓毒症模型,CLP后6、12、24和48 h处死动物分别留取肺、肝、肾及空肠组织,采用半定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测TREM1、TNF-α mRNA 的表达.结果 CLP组6、12、24和48 h肺、肝、肾组织TREM1及TNF-α mRNA 的表达升高,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01),而空肠组织差异无统计学意义(P＞0.05);而且CLP后肝、肺、肾、小肠组织TREM1 mRNA 表达与TNF-α mRNA 水平均呈显著正相关.结论 脓毒症时小鼠多器官TREM1基因的表达明显上调,可能与组织炎症反应失控及多脏器功能损害密切相关.     

量子点标记神经生长因子纳米化颗粒修饰羊膜间充质干细胞移植治疗大鼠实验性脑损伤

目的:量子点是由Ⅱ-Ⅵ族元素或Ⅲ-Ⅴ族元素组成的纳米颗粒,因三维上受到量子限制而表现出独特的光学特征,其标记的神经生长因子纳米化颗粒由于是纳米级,易通过细胞生物膜.实验观察负载此纳米颗粒的羊膜间充质干细胞移植治疗大鼠脑损伤的效果.方法:实验于2007-01/10在郑州大学完成.①材料:SPF级健康成年Wistar大鼠40只,按体质量编号分为4组:神经生长因子细胞组、常规细胞组、损伤模型组、培养基对照组,10只/组,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准.羊膜间充质干细胞来自健康产妇胎盘羊膜,产妇对实验知情同意,实验经医院医学伦理委员会批准.量子点神经生长因子纳米粒由兰州大学功能有机分子化学国家重点实验室协助构建.②实验方法;向羊膜间充质干细胞中加入含10%胎牛血清、20 μg/L碱性成纤维生长因子的DMEM/F12培养基,置于37 ℃、体积分数为0.05的CO2饱和湿度培养箱中培养,待细胞达80%～90%融合时胰酶消化传代.取传至第3代细胞,分别加入终浓度为20,40,60 μg/L的量子点标记神经生长因子纳米粒进行修饰处理72 h,并设立空白对照和空载量子点对照.4组大鼠均采用Feeney自由落体法建立脑损伤模型,神经生长因子细胞组于大鼠损伤部位注入经40 mg/L量子点标记神经生长因子纳米粒修饰的羊膜间充质干细胞悬液10 μL(约4.0×108 个细胞),常规细胞组注入等量单纯量子点标记的羊膜间充质干细胞悬液,培养基对照组注入等量DMEM/F12细胞培养基,损伤模型组不给予移植操作.③实验评估:经量子点标记的神经生长因子纳米粒修饰后,MTT法检测细胞活性,荧光显微镜观察量子点在细胞内的分布,免疫细胞化学鉴定细胞分化.细胞移植后对各组大鼠运动及感觉功能进行评分,免疫组织化学染色及荧光显微镜观察量子点荧光化羊膜间充质干细胞在脑内存活分化和迁移情况.结果:①细胞生长率:培养72 h后与空白对照和空载量子点对照细胞比较,20,40,60 μg/L量子点标记的神经生长因子纳米粒组细胞生长率均呈增长趋势,40 μg/L时细胞无明显生长抑制,达60 μg/L时增长有所减慢.②体外量子点分布:荧光显微镜连续观察羊膜间充质干细胞.约6 h后开始摄入量子点标记的神经生长因子纳米粒,随着时间延长摄入量逐渐增加,于32 h荧光强度达高峰.③体外免疫细胞化学鉴定:经量子点神经生长因子纳米粒修饰的羊膜间充质干细胞表达神经元烯醇化酶和神经丝蛋白,向神经元方向分化,但不表达胶质纤维酸性蛋白.④神经行为学检测结果:细胞移植后24h,各组神经行为学各项指标评分均基本相似(P＞0.05);移植后10,20 d,损伤模型组与培养基对照组无明显变化,神经生长因子细胞组、常规细胞组运动及感觉功能各项评分均显著降低(P＜0.05),且神经生长因子细胞组下降幅度明显强于常规细胞组(P＜0.05).⑤免疫组织化学和荧光检测结果:经量子点神经生长因子纳米粒修饰的羊膜间充质干细胞在脑组织损伤区存活,并向周围迁移.结论:量子点是一种较好的细胞示踪剂,负载其标记的神经生长因子纳米化颗粒的羊膜间充质干细胞移植能够改善脑损伤大鼠神经功能.     

人宫颈癌DNA与HPV16型核酸分子杂交的研究

本文以人乳头状瘤病毒(HPV)16型-PBR_(322)重组质粒,对大肠杆菌HB101进行转化实验。经筛选、扩增、酶切、电泳鉴定。获得满意的电泳图谱及kb值,HPV-16Bam HI DNA为7.2kb,其260/280O.D比值为1.9-2。纯度合乎要求,可用以制备探针。以HPV-16DNA7.2kb片段为探针,应用~(32)P(α)-dATP标记进行了点杂交及Southern印迹杂交实验。结果表明38例宫颈癌组织DNA,其点杂交阳性率为76.3％,Southern杂交阳性率为65.7％。点杂交与Southern杂交结果基本符合。上述结果说明了在人宫颈癌组织中,存在着HPV-16相关的基因组,Southern杂交表明其以整合形式存在。说明宫颈癌的发病可能与HPV-16型的感染有密切关系。从分子水平进一步探讨了宫颈癌的病毒病因。     

经翼点入路显微切除蝶骨嵴脑膜瘤40例

目的：分析总结40例蝶骨嵴脑膜瘤特点，利用显微方法提高全切率。方法：对98年后．我科经翼点入路显微切除蝶骨嵴脑膜瘤40例回顾性研究。结果：外侧组全切率100％，中侧组90％，内侧组70％，死亡0例，外展神经受损1例．滑车神经受损1例。结论：经翼点入路．据颅底显微解剖．运用显微外科手术技巧，可显著提高蝶骨嵴脑膜瘤的全切率．降低手术死亡率及并发症。     

尿液N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶自动化测定

目的建立用对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷自动化测定尿液N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的方法。方法采用两点终点法,无需做尿样空白,用自动生化分析仪直接测定。结果线性范围0～90U/L,精密度批内CV2.3%,批间CV2.8%,与手工终点法比较,Y(本法)=0.7831X(手工法) 0.5238,r=0.9719。结论该法简便,试剂稳定,适用于尿液NAG活力的自动分析。