人端粒结合因子在端粒酶阳性和阴性细胞中的定位与周期性表达的研究

目的:研究人端粒结合因子1(telomere repeat binding factor 1,TRF1)在端粒酶阳性和阴性细胞中的定位以及在细胞周期中的表达.方法:应用分子克隆技术扩增TRF1基因全长(TRF1FL)和N、C端缺失突变体(TRF1ΔNC)序列,并克隆入pEGFP-C2真核表达载体,表达绿色荧光(GFP)融合蛋白;将含目的基因质粒转染端粒酶阳性Hela细胞和端粒酶阴性WI38-2RA细胞,Western Blot验证目的蛋白分子量,荧光显微镜观察TRF1在间期细胞和染色体的定位;利用药物阻断HeLa细胞于不同周期,流式细胞仪检测细胞周期,半定量Western Blot检测TRF1在不同细胞周期中的表达.结果:TRF1FL、TRF1ΔNC序列长度分别为1.3 kb和0.9 kb;GFP融合TRF1FL、TRF1ΔNC分子量大小分别为80 kD和60 kD.TRF1FL在间期细胞胞核内呈点状表达,在染色体则表达于染色体未端,TRF1ΔNC在细胞核内呈弥散性表达;TRF1在端粒酶阴性细胞中与早幼粒细胞白血病小体(promyelocytic leukemia body,PML)共定位,在端粒阳性细胞中则没有共定位.TRF1在HeLa细胞中以M期表达量最高,G1/S表达最低,M期表达量是G1/S期的3.9倍(t=12.92,P<0.01).结论:TRF1在端粒酶阳性和阴性细胞中有不同的定位模式,在HeLa细胞中TRF1呈周期性表达.     

免疫组化法检测脱落细胞端粒酶活性在良、恶性胸腹水鉴别中的应用

常规胸腹水中肿瘤细胞病理学检查，由于受经验、技术条件等因素的影响，敏感性低，对良、恶性胸腹水有时很难定性诊断。除生殖细胞、造血干细胞外，正常细胞不表达端粒酶活性，而85％～90％的肿瘤细胞表达端粒酶活性，端粒酶活性检测对肿瘤的诊断具有较强的专一性。本文用免疫组化方法检测胸腹水脱落细胞端粒酶活性，旨在探讨其在良、恶性胸腹水鉴别诊断中的价值。     

端粒、端粒酶及其与皮肤疾病的关系

端粒为真核生物线性DNA末端的一组6核苷酸的串联重复序列5'-TTAGGG-3’。它能维持染色体末端稳定性，防止降解、融合、重排和DNA丢失。端粒的长度和端粒酶的活性有关，因此端粒酶的活性决定了细胞的寿命。端粒和端粒酶的研究涉及到细胞生物学的许多方面，本文仅就其与疾病的关系做一综述。     

甘蓝复合果蔬汁的稳定性

单一的稳定剂并不能解决甘蓝复合果蔬汁的稳定性问题,而多种稳定剂的稳定效果较好,为此挑选出较好的3种稳定剂,对其进行不同比例的复配,观察一段时间的相对粘度及浊度变化,发现两种稳定剂的复配就能达到稳定的效果,最佳添加量(质量分数)为果胶0.07%,黄原胶0 03%.     

前列腺部尿道长度测量法的改进及临床应用

自1996年9月～2002年10月，我们广东省潮州市中心医院泌尿外科采用改进的直视下前列腺部尿道长度测量法，应用于记忆合金网状支架置人术，治疗高龄、高危前列腺增生症(BPH)62例，取得满意效果，报道如下。     

端粒酶核酶hTERT 5''RZ时辰治疗人肝癌裸鼠移植瘤

我们在既往的研究中 ,为探讨肝癌裸鼠移植瘤细胞DNA合成与端粒酶表达的生物节律 ,在时辰同步化裸鼠中构建了肝癌细胞SMMC 772 1裸鼠移植瘤。继续在程控光照条件下饲养 ,于光照后 3,6 ,9,1 2 ,1 5 ,1 8,2 1小时取样 ,用流式细胞仪测定各时期细胞DNA含量 ,细胞周期分布及端粒酶活性水平。结果 ,肝癌裸鼠移植瘤细胞DNA合成随昼夜节律变化 ,且伴随端粒酶活性的同步节律变化 ,均在光照后 2 1小时达高峰 ,光照后 9小时处于低谷 ;节律周期呈余弦分布。表明 ,肝癌裸鼠移植瘤的生长与端粒酶活性表达在静止相达高峰 ,为制定肿瘤时辰化疗方案提…     

Ku70的多样性功能及研究展望

Ku70是一种非常丰富的核蛋白，广泛存在于人类、哺乳类动物、线虫、昆虫、酵母、原核生物以及植物体内。现代研究发现，Ku70在DNA双链破裂修复、DNA复制、基因转录调控、端粒结构的维持等多种细胞活动中，均扮演着重要角色。本文主要对Ku70结构、功能及其研究展望作一个简要概述。     

髋关节置换术后的疼痛防治

髋关节置换术的主要目的是缓解髋关节疼痛，改善患髋功能和调整肢体长度。本对术后引起髋关节疼痛的常见病变的防治予以综述。     

输卵管复通术28例临床分析

本院于1997年3月～2001年3月对26例输卵管绝育妇女及2例输卵管妊娠未生育者,行输卵管再通术.随访发现已获妊娠21例,妊娠率达75.0%,妊娠成功率与输卵管复通不同术式及复通后输卵管长度等有着密切关系.现分析报道如下. 1临床资料 1.1一般资料28例输卵管复通术者多数因子女夭折,要求输卵管吻合,2例为再婚者,2例输卵管妊娠未生育者;受术者年龄22～37岁,平均27.7岁.农民占96%;术前月经均规则,无生殖器炎症,绝育术距复通时间为1～8年.     

头位难产剖腹产指征探讨

头位难产是指在头位分娩过程中，由于产道、胎儿、产力诸因素异常所导致的难产。本文分析我院近5年间剖宫产1544例，其中头位难产剖宫产占68．02％，因相对头盆不称所行剖宫产术比例显著增加。探讨其指征变迁因素，以期通过分析，提高对头位难产剖宫产指征的认识。